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国家自然科学基金(30400515)

作品数:7 被引量:15H指数:2
相关作者:董炜疆胡海涛宫惠琳崔媛媛张冠军更多>>
相关机构:西安交通大学西安医学院西安交通大学医学院第一附属医院更多>>
发文基金:国家自然科学基金陕西省科技攻关计划国家教育部博士点基金更多>>
相关领域:医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 7篇中文期刊文章

领域

  • 6篇医药卫生
  • 1篇生物学

主题

  • 3篇细胞
  • 3篇分泌
  • 3篇分泌酶
  • 3篇Β-分泌酶
  • 3篇阿尔茨海默病
  • 2篇底物
  • 2篇基因
  • 2篇病毒载体
  • 1篇单个核细胞
  • 1篇多抗甲素
  • 1篇抑瘤
  • 1篇抑瘤效应
  • 1篇英文
  • 1篇融合基因
  • 1篇神经胶质
  • 1篇神经胶质细胞
  • 1篇树突
  • 1篇树突状
  • 1篇树突状细胞
  • 1篇他汀

机构

  • 6篇西安交通大学
  • 3篇西安医学院
  • 1篇西安交通大学...
  • 1篇西安交通大学...
  • 1篇西安变通大学

作者

  • 6篇董炜疆
  • 5篇胡海涛
  • 3篇崔媛媛
  • 3篇宫惠琳
  • 1篇吴志新
  • 1篇赵璇
  • 1篇张海英
  • 1篇王洪权
  • 1篇郑慧媛
  • 1篇冯改丰
  • 1篇靳辉
  • 1篇刘苏虎
  • 1篇师社会
  • 1篇李扩
  • 1篇王兰
  • 1篇侯惠莲
  • 1篇石明娟
  • 1篇张冠军

传媒

  • 4篇西安交通大学...
  • 1篇Journa...
  • 1篇四川大学学报...
  • 1篇中南大学学报...

年份

  • 2篇2010
  • 1篇2008
  • 1篇2007
  • 2篇2006
  • 1篇2005
7 条 记 录,以下是 1-7
排序方式:
他汀类药物对神经细胞和神经胶质细胞ABCA1基因表达的影响被引量:3
2010年
目的观察他汀类药物对神经细胞和神经胶质细胞ATP结合盒式转运体1(ATP-binding cassette transporter1,ABCA1)基因表达的影响。方法培养人类神经细胞和神经胶质细胞,分别加入不同浓度的辛伐他汀(si mvastatin)和普伐他汀(pravastatin),孵育不同时间后分别提取细胞总RNA和胞质蛋白,RT-PCR观察ABCA1基因的表达,Western blot检测ABCA1蛋白。结果辛伐他汀和普伐他汀组显著降低了ABCA1基因和蛋白的表达,其中辛伐他汀的作用比普伐他汀明显(辛伐他汀对神经元和神经胶质细胞ABCA1基因表达分别降低95%和75%P<0.05),神经元实验组比神经胶质细胞组更为敏感。结论他汀类药物可以显著降低神经元和神经胶质细胞ABCA1基因和蛋白的表达,ABCA1的降低有可能影响细胞内胆固醇的代谢,对全面评价他汀类药物对高血脂相关基因的影响及用药安全性提供了一定的实验依据。
宫惠琳李扩张冠军侯惠莲董炜疆
关键词:普伐他汀
TAT-BACEsp-GFP三融合基因慢病毒载体的构建与鉴定被引量:1
2008年
目的构建穿膜肽基因和BACE底物肽融合基因与绿荧光融合基因慢病毒载体,为进一步对阿尔茨海默病进行基因治疗奠定基础。方法利用非对称互补引物/模板法制备两端含有酶切位点的TAT-BACEsp融合基因的cDNA,使之克隆到带GFP慢病毒表达载体质粒FUGW中,经限制性酶切和测序鉴定重组载体。结果限制性内切酶酶切和DNA测序分析证实获得的TAT-BACEsp产物与设计的完全吻合;TAT-BACEsp准确克隆入FUGW的多克隆位点。结论成功构建了TAT-BACEsp与GFP融合基因慢病毒载体,为进一步对阿尔茨海默病进行基因治疗提供了适合的稳定转染的载体。
王洪权胡海涛靳辉张海英崔媛媛董炜疆
关键词:Β-分泌酶穿膜肽融合基因慢病毒载体
多抗甲素与GM-CSF,TNF-α,IL-4联用对脐血单个核细胞抑瘤效应被引量:9
2005年
目的:研究多抗甲素(PA)与GM-CSF,TNF-α,IL-4(GTI)联用对脐血单个核细胞(CBMC)杀瘤效应的影响。方法:①分别用PA,GTI及GTI+PA(GTIP)体外诱导培养CBMC,免疫组织化学法检测细胞表型变化,以CD1a和CD83作为树突状细胞(DC)特异性标记;②GTI体外培养CBMC24h后,分别加入凋亡坏死的Hela和HepG2细胞共孵育2d,再加入PA,3d后以处理后的CBMC作为效应细胞(另设未加凋亡坏死肿瘤细胞组、未加PA组为对照),以相应的肿瘤细胞为靶细胞,用MTT法测定不同效靶比(10∶1,20∶1)下效应细胞对Hela和HepG2细胞的杀伤率。结果:①培养第7天,PA组CD1a+和CD83+细胞比率分别达(19.63±3.61)%和(9.28±4.31)%,显著高于对照组,但明显低于GTI组;②GTI与PA联用后,CBMC对Hela和HepG2细胞的杀伤率显著提高,明显高于对照组,GTI组及PA组;而与凋亡坏死瘤细胞共孵育后,杀伤率进一步提高。结论:PA能促进脐血DC体外扩增、成熟;PA不仅可协同GTI增强CBMC对肿瘤的杀伤率,还可增强GTI作用下负载肿瘤细胞抗原的CBMC对肿瘤杀伤率。
董炜疆胡海涛宫惠琳
关键词:多抗甲素树突状细胞
β-分泌酶底物肽对阿尔茨海默病细胞模型的保护作用
2010年
目的探讨β-分泌酶底物肽(BACEsp)对阿尔茨海默病(AD)细胞模型保护作用的机制。方法用携带BAC-Esp基因的重组病毒pLXSN-BACEsp(pBV),作用经淀粉样前体蛋白(APP)转染SK-N-SH细胞建立的AD细胞模型。MTT法检测细胞的活性,免疫细胞化学方法观察BACEsp作用前、后细胞内APP表达量的变化。结果pBV预处理组细胞的活性、胞内APP的表达量显著高于AD模型组和pBV后处理组。结论BACEsp对由APP所造成的AD细胞模型的神经毒性具有明显的保护作用。
崔媛媛师社会胡海涛董炜疆
关键词:阿尔茨海默病AD细胞模型
短干扰RNA对人β淀粉样前体蛋白裂解酶基因表达的影响(英文)被引量:1
2006年
目的探讨β淀粉样前体蛋白裂解酶(β-site APP cleaving enzyme,BACE)的短干扰RNA(short interfering RNAs,siRNA)对BACE在神经母细胞瘤细胞中的表达的影响,为阿尔茨海默病(AD)的治疗提供新的手段。方法采用PCR分别扩增增强型绿色荧光蛋白(EGFP)、U6启动子和靶向BACE的特异性小干扰RNA(siBACE),随后将相应的序列片段克隆入真核表达载体pLXSN,通过限制性内切酶和测序对该重组表达载体pLXSN/ECFP-U6-siBACE进行鉴定;制备稳定高表达BACE基因的神经母细胞瘤SK-N-SH细胞株,用荧光显微镜和免疫组织化学的方法观察siRNA对BACE表达的影响。结果限制性内切酶酶切和测序结果均表明成功构建了靶向BACE的短干扰RNA的逆转录病毒载体pLXSN/EGFP-U6-siBACE;并能特异性地抑制BACE在神经母细胞瘤SK-N-SH细胞株中的表达。结论成功构建了针对BACE的短干扰RNA的逆转录病毒表达载体pLXSN/EGFP-U6-siBACE,并能有效抑制哺乳动物BACE基因的表达,该研究将为利用RNA干扰技术作为治疗AD的新方法提供重要的实验基础。
董炜疆冯改丰宫惠琳刘苏虎胡海涛
关键词:RNA干扰BACE基因阿尔茨海默病
β-分泌酶底物肽反转录病毒载体及其包装细胞株的构建被引量:1
2007年
目的用pLXSN反转录病毒载体构建介导β-分泌酶底物肽(BACEsp)基因表达的pLXSN-BACEsp反转录病毒载体,并建立高效、稳定表达BACEsp的包装细胞株。方法根据BACEsp基因序列设计引物,PCR合成的BAC-Esp片段和pLXSN载体用EcoRⅠ、BamHⅠ双酶切后连接,构建成表达BACEsp的pLXSN-BACEsp反转录病毒载体。用脂质体介导转染PT67包装细胞,经抗性筛选后,挑单克隆扩大培养,用NIH3T3细胞测定病毒滴度,筛选出高效产毒细胞株。结果经酶切、连接后构建成的质粒称为pLXSN-BACEsp,经测序证实构建成功,无任何碱基突变。经脂质体介导转染包装细胞、抗性筛选和测定病毒滴度,筛选出具有高病毒滴度的细胞集落,扩大培养后建立BAC-Esp高效表达的包装细胞株。结论成功构建了能表达BACEsp的pLXSN-BACEsp反转录病毒载体,并建立了稳定、高效地产生有活性的BACEsp产毒包装细胞株。
崔媛媛胡海涛董炜疆王兰郑慧媛赵璇石明娟吴志新
关键词:阿尔茨海默病反转录病毒载体转染
Construction and identification of eukaryotic eukaryotic expression plasmid pcdna3.1-bace and its transient expression in cells
2006年
Objective: To generate eukaryotic expression vector of pcDNA3.1-BACE and obtain its transient expression in COS-7 cells and high expression in the neuroblastoma SK-N-SH cells. Methods: A 1503 bp cDNA fragment was amplified from the total RNA of human neuroblastoma by RT-PCR method and cloned into plasmid pcDNA3.1. The vector was identified by digestion with restriction enzymes BamHI and XhoI and sequenced by Sanger-dideoxy:mediated chain termination. The expression of BACE gene was detected by immunocytochemistry method. Results: The results showed that the cDNA fragment included 1503 bp total coding region. The recombinant eukaryotic cell expression vector of pcDNA3.1-BACE was constructed successfully, and the sequence of insert was identical to the published sequence. The COS-7 cells and the neuroblastoma SK-N-SH cells transfected with the pcDNA3.1-BACE plasmid expressed high level of BACE protein in cytoplasm. Conclusion: The recombinant plasmid pcDNA3.1-BACE can provide very useful tool for researching the mason of Alzheimer's disease and lays the important foundation for preventing the AD laterly.
Huilin GongGuanjun ZhangWeijiang Dong
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