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杭州市医药卫生科技计划项目(20072001)

作品数：1 被引量：2H指数：1
相关作者：吴盛海严杰徐丽慧王贤军更多>>
相关机构：浙江大学杭州市第一人民医院更多>>
发文基金：浙江省医药卫生科学研究基金杭州市医药卫生科技计划项目更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇幽门螺
  • 1篇幽门螺杆菌
  • 1篇原核表达
  • 1篇趋化
  • 1篇螺杆菌
  • 1篇基因
  • 1篇基因表达
  • 1篇CHEY

机构

  • 1篇杭州市第一人...
  • 1篇浙江大学

作者

  • 1篇王贤军
  • 1篇徐丽慧
  • 1篇严杰
  • 1篇吴盛海

传媒

  • 1篇中华微生物学...

年份

  • 1篇2009
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
幽门螺杆菌cheA和cheY基因表达及其产物与细菌趋化的相关性被引量：2
2009年
目的克隆幽门螺杆菌趋化相关基因cheA和cheY并构建其原核表达系统，建立幽门螺杆菌体外趋化模型并确定其趋化诱导物质，了解特异性抗体和氯氰碘柳胺对幽门螺杆菌趋化的抑制作用。方法PCR扩增幽门螺杆菌NCTC11637株全长cheA和cheY基因片段，T—A克隆后测序。构建上述目的基因原核表达系统，采用SDS-PAGE和Bio—Rad凝胶成像分析系统检查目的重组蛋白rCheA和rCheY的表达情况，Ni—NTA亲和层析法提纯rCheA和rCheY。rCheA和rCheY免疫家兔获得抗血清，用饱和硫酸铵沉淀法和DEAE-32离子交换法提纯IgG，用免疫扩散法检测抗血清及其IgG效价。采用硬琼脂法建立幽门螺杆菌NCTC11637株体外趋化模型并检测11种物质的趋化诱导作用，同时分别观察抗rCheAIgG（rCheA—IgG）和氯氰碘柳胺钠对细菌趋化的抑制作用。结果PCR扩增获得预期大小的cheA和cheY基因片段，其核苷酸和氨基酸序列与文献报道完全相同。所构建的原核表达系统能有效表达rCheA和rCheY。rCheA和rCheY兔抗血清及其IgG免疫扩散效价均分别为1：4和1：2。盐酸、硫酸和乙酸对该幽门螺杆菌均有趋化诱导作用，一定浓度的rCheA—IgG和氯氰碘柳胺钠均对幽门螺杆菌趋化有抑制作用（P〈0．05）。结论本研究成功地构建了幽门螺杆菌NCTC11637株cheA和cheY基因原核表达系统。H^＋是诱导幽门螺杆菌趋化的信号物质，rCheA—IgG和氯氰碘柳胺钠均能抑制幽门螺杆菌对H^＋的趋化。
吴盛海徐丽慧严杰王贤军
关键词：幽门螺杆菌原核表达趋化
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