国家自然科学基金(30400534)
- 作品数：6 被引量：11H指数：2
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- 相关机构：东南大学南京中医药大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 癌基因RegⅣ的研究进展被引量：1
- 2009年
- 徐佳佳郭英黄培林
- 关键词：消化道肿瘤信号转导通路
- RegⅣ基因在大肠癌中抗凋亡作用的体外研究被引量：1
- 2007年
- 目的观察RegⅣ基因在大肠癌细胞系中的表达情况及其体外抗凋亡作用。方法采用RT-PCR和免疫组织化学染色法检测4种大肠癌细胞系中RegⅣ基因的表达,通过MTT法分析不同浓度的姜黄素对4种大肠癌细胞系(HT-29、Caco2、Sw480和Lovo)的生长抑制作用,应用流式细胞仪评价RegⅣ基因的抗凋亡作用。结果RegⅣmRNA在HT-29细胞系高表达,Caco2细胞系较高表达,Sw480细胞系较低表达,Lovo细胞系不表达;RegⅣ蛋白在HT-29细胞胞核和胞质内表达阳性,Lovo细胞胞核和胞质表达阴性,Sw480细胞胞质内表达阳性,Caco2细胞胞质内表达弱阳性。不同浓度的姜黄素对4种细胞系的生长抑制作用强弱依次为Lovo>Sw480>Caco2>HT-29;用20μmol.L-1的姜黄素处理24 h后,4种细胞系的凋亡率大小依次为Lovo>Sw480>Caco2>HT-29。结论RegⅣ基因高表达与大肠癌发生可能有关;RegⅣ基因在大肠癌中可能具有抗凋亡作用。
- 郑声琴何杰王建华黄培林高峰
- 关键词：大肠癌抗凋亡
- RegⅣ基因在结直肠癌细胞系中的mRNA表达及pcDNA-RegⅣ的构建与转染被引量：5
- 2006年
- 目的:探讨RegⅣ基因在4种结直肠癌细胞系中的表达水平,构建并转染pcDNA-RegⅣ重组质粒,为阐明RegⅣ基因在结直肠癌发生发展中的作用机制奠定基础。方法:采用RT-PCR方法检测HT-29、Caco-2、Sw480、LoVo细胞系的RegⅣ基因表达水平,将获得目的基因RegⅣ克隆于pcDNA3.1/(-)质粒上,用PCR、酶切进行鉴定后,脂质体转染至低表达甚至不表达RegⅣ的结直癌细胞系,用G418筛选后进行RT-PCR鉴定。结果:HT-29、Caco-2细胞系RegⅣ基因高表达,Sw480细胞系表达较前两者弱,LoVo细胞系RegⅣ阴性表达;构建的重组质粒中含有RegⅣ基因,经pcDNA-RegⅣ转染的LoVo细胞RegⅣ基因呈阳性表达。结论:RegⅣ基因在不同的结直肠癌细胞系中表达水平不同。成功构建和转染了pcDNA-RegⅣ,可使得RegⅣ(-)的LoVo细胞系RegⅣ基因呈阳性表达。
- 高峰郑声琴张宇伟金月玲田小强黄培林
- 关键词：重组质粒基因转染
- Reg Ⅳ基因缺失CRD结构域片段获得及其表达载体的构建与转染被引量：2
- 2009年
- 目的:探讨应用基因重叠延伸拼接PCR(SOE-PCR)技术构建Reg Ⅳ基因缺失CRD结构域表达载体,并转染Reg Ⅳ低表达结直肠癌细胞系。方法:应用SOE-PCR法获得Reg Ⅳ缺失CRD结构域片段,构建真核表达载体并转染Reg Ⅳ低表达结直肠癌LoVo细胞,G418筛选,RT-PCR检测鉴定。结果:经酶切鉴定筛选出的重组体测序结果与目的序列完全一致,重组载体构建成功,经pcDNA3.1-Reg Ⅳ-dom ain△转染的LoVo细胞Reg Ⅳ-dom ain△呈阳性表达。结论:利用SOE-PCR技术可成功构建Reg Ⅳ基因缺失CRD结构域的表达载体。
- 郭英徐佳佳商延芳李楠高峰黄培林
- 关键词：REG结直肠癌基因转染
- EGFR/AKT信号转导通路在调控结肠癌LoVo细胞生物学行为中的作用研究被引量：1
- 2009年
- 目的:探讨EGFR/AKT(表皮生长因子受体/蛋白激酶B)信号转导通路在调控人结肠癌细胞株LoVo生物学行为中的作用机制方法:用EGFR抑制剂AG1478处理人结肠癌细胞LoVo;用免疫细胞化学法检测p-EGFR及p-AKT蛋白表达;用MTT法检测细胞的增殖;用流式细胞仪检测细胞的凋亡水平;用Transwell小室观察体外细胞迁移能力;用Transwell小室结合Matrigel胶检测肿瘤细胞侵袭能力结果:AG1478(20μmol/L)处理后,p-EGFR及p-AKT的表达水平明显降低(P<0.05),细胞的增殖、迁移和侵袭能力明显下降(P<0.05),细胞凋亡水平明显提高(P<0.05)。结论:EGFR与人结肠癌细胞LoVo的增殖、凋亡、迁移和侵袭性密切相关,并可能通过AKT信号转导通路调控人结肠癌的发展。
- 徐佳佳郭英李楠商延芳夏海鸣金治吴鹏黄培林
- 关键词：AG1478细胞增殖细胞迁移细胞侵袭
- RegⅣ基因对5-FU干预结直肠癌LoVo细胞增殖、凋亡的影响被引量：1
- 2009年
- 目的观察RegⅣ基因对5-FU干预结直肠癌LoVo细胞增殖、凋亡的影响。方法构建重组质粒pcDNA3.1-RegⅣ并转染LoVo细胞,RT-PCR和细胞免疫组化检测转染前后细胞中RegⅣ基因的mRNA和蛋白表达。终浓度80μmol/L的5-FU干预细胞48h后,MTT检测细胞的增殖活性。平板克隆实验观察细胞的克隆形成能力。FCM检测细胞凋亡。结果LoVo细胞不表达RegⅣ基因,转染后的LoVo/RegⅣ细胞高表达RegⅣ。5-FU干预后,未转染组(LoVo)和空转质粒组(LoVo/空载)细胞增殖活性、克隆形成能力较RegⅣ转染组(LoVo/RegⅣ)明显降低(P<0.05),细胞凋亡率较RegⅣ转染组明显升高(P<0.05)。结论RegⅣ基因表达可能降低5-FU抑制LoVo细胞的增殖活性及克隆形成能力,并能抑制5-FU诱导LoVo细胞凋亡的作用。RegⅣ基因可能是患者对5-FU化疗产生抗药性的标志及导致临床化疗失败的原因之一。
- 郭英李楠徐佳佳高峰黄培林
- 关键词：REG结直肠癌基因转染5-FU
