浙江省自然科学基金(300493)
- 作品数：9 被引量：9H指数：2
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- 相关机构：浙江省疾病预防控制中心浙江省丽水市疾病预防控制中心中国人民解放军南京军区军事医学研究所更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 汉坦病毒感染Vero细胞病毒滴度和抗原滴度的动态观察
- 2004年
- 目的 观察汉坦病毒 (HV)在Vero细胞上的适应能力和毒株在该细胞中的增殖规律。方法 将HV感染Vero细胞 ,每隔 3d收取细胞培养液 ,直到细胞衰老 ,并观察细胞的病变情况。采用间接免疫荧光法 (IFAT)和反向被动血凝试验 (RPHA) ,观察细胞培养液的病毒滴度和抗原滴度的动态变化。结果 HV不致Vero细胞产生病变 ,病毒感染细胞第 8～ 11天时细胞培养液的病毒滴度和抗原滴度最高 ,以后逐渐降低 ,但直到细胞感染病毒 3 2d时其培养液的病毒滴度和抗原滴度仍稳定在 5 .0 0LgTCID50 /ml和 1∶2 0以上。结论 两株病毒已适应于Vero细胞 ,且具有病毒滴度高、毒力强和抗原性良好的特性 ,是Vero细胞肾综合征出血热灭活疫苗良好的后备筛选毒株。
- 徐芳姚苹苹朱智勇
- 关键词：汉坦病毒VERO细胞病毒滴度增殖流行病学
- 肾综合征出血热疫苗后备筛选毒株在Vero细胞上的适应传代及其抗原性研究被引量：2
- 2004年
- 〔目的〕将肾综合征出血热疫苗后备毒株适应于Vero细胞 ,观察病变情况 ,并对其抗原性和繁殖特性进行研究。〔方法〕将新分离的汉坦病毒ZJ2、ZJ4、ZJ7株和汉城病毒ZJ5株在Vero细胞上进行连续传代 ,采用间接免疫荧光法(IFA)、反向被动血凝试验 (RPHA) ,研究传代后毒株的病毒滴度、抗原量以及细胞的病变情况 ,同时将传代后的病毒接种敏感动物 ,观察动物的发病情况和毒株的繁殖特性。〔结果〕经过 5次连续传代 ,四株病毒在Vero细胞上均显示出良好的适应性 ,从第二代开始病毒滴度稳定在 6.0 0LgTCID5 0 ml以上 ,第五代时最高达 7.5 0LgTCID5 0 ml ,第三代毒株抗原量均已达到 1:12 8,ZJ7株抗原量最高时达 1:768,四株毒株感染Vero细胞 ,连续观察 12d不见细胞产生病变 ,第五代细胞病毒液接种敏感动物 ,9d后动物发病甚至死亡。〔结论〕四株病毒已适应于Vero细胞 ,且具有病毒滴度高、毒力强和抗原性良好的特性 ,是Vero细胞肾综合征出血热灭活疫苗良好的后备筛选毒株。
- 姚苹苹徐芳朱函坪朱智勇
- 关键词：肾综合征出血热疫苗毒株VERO细胞抗原性汉坦病毒
- 肾综合征出血热疫苗后备毒株的分离和生物学特性研究被引量：4
- 2004年
- 目的从肾综合征出血热(HFRS)疫区阳性鼠肺中分离汉坦病毒(HV),并对分离到的病毒进行型别鉴定和生物学特性研究,为HFRS疫苗后备毒种库的建立打下基础。方法疫区阳性鼠肺研磨液接种长爪沙鼠分离病毒,并将分离到的HV经乳沙鼠脑内连续传代,采用直接免疫荧光法和酶联免疫吸附试验,检查毒株的型别,研究传代后毒株的繁殖特性、病毒滴度和抗原滴度。结果从疫区32份阳性鼠肺中分离到9株HV,经单克隆直接荧光血清检查6株为汉滩病毒株,3株为汉城病毒株,经乳沙鼠脑内连续传代,其中4株毒株的病毒滴度和抗原滴度较高,汉滩和汉城毒株的病毒和抗原滴度最高分别达106.50、106.00和1∶5120、1∶5120。结论4株毒株的病毒滴度和抗原滴度均较高,可作为HFRS疫苗后备毒种的筛选毒株。
- 姚苹苹朱智勇赵芝雅朱函坪徐芳傅桂明陆群英翁景清李敏红
- 关键词：HFRS毒株病毒滴度肾综合征出血热生物学特性研究疫区
- 汉坦病毒浙江分离株的分子生物学研究被引量：1
- 2005年
- 目的浙江新分离的汉坦病毒ZJ4、ZJ7毒株,与20年前浙江分离的汉坦病毒Z10疫苗株的M片段核苷酸序列进行比较,揭示它们之间的差异。方法提取汉坦病毒RNA,利用逆转录聚合酶链反应扩增病毒部分M基因片段,克隆入质粒载体,进行核苷酸序列测定及分析。结果汉坦病毒浙江新分离株ZJ4、ZJ7均为HTN型病毒,ZJ4、ZJ7株与Z10株部分M片段核苷酸的同源性分别为88.3%和92.3%。结论新分离株ZJ4、ZJ7株与疫苗株Z10株分离时间跨度有20多年,其相互间变异不大,证实了HTN型汉坦病毒基因的稳定性。
- 姚苹苹朱函坪徐芳朱智勇
- 关键词：汉坦病毒病毒分离株分子生物学病毒基因
- 汉坦病毒Vero细胞灭活疫苗候选毒种的选择
- 肾综合征山血热(HFRS)是一种严重危害人体健康的自然疫源性疾病。我国占全球发病总数的90％,病死率约为3％-10％,波及全国30个省市和自治区。在各种预防HFRS的措施中,疫苗是一种最特异和最有效的预防手段。迄今为止,...
- 姚苹苹徐芳朱函坪翁景清陆群英朱智勇
- 文献传递
- 评价肾综合征出血热疫苗效果的攻击毒株的选择
- 2006年
- 姚苹苹徐芳朱函坪翁景清朱智勇
- 关键词：肾综合征出血热疫苗效果毒株疫苗免疫效果HFRS自然疫源性疾病
- 汉坦病毒Vero细胞灭活疫苗候选毒种筛选被引量：4
- 2007年
- 目的将肾综合征出血热疫苗后备筛选毒株适应于Vero细胞，并对其抗原性和免疫原性进行研究。方法将新分离的4株汉坦病毒接种敏感动物，在乳沙鼠脑内连续传代。比较脑内病毒抗原的含量以及乳鼠的发病情况；在Vero细胞中传代，比较培养液中的病毒滴度和抗原滴度以及细胞的病变情况；利用筛选出的毒株研制Veto细胞灭活疫苗。研究疫苗的免疫原性。结果4株病毒经乳沙鼠脑内传代，鼠脑悬液的病毒滴度和抗原滴度分别达7．00～7．75LgCCID50／ml和1：3201：1280；4株毒株经Vero细胞连续传5代，培养液病毒滴度和抗原滴度分别达6．50～7．50LgCID50／ml和1：160～1：768；疫苗免疫家兔2针后，其中出血热病毒株Z34与ZJ5株疫苗免疫血清对同型毒株的中和效价达到1：10。结论ZJ4与ZJ5两毒株已适应于Vero细胞，且具有病毒滴度高和免疫原性良好的特性，适合用作Vero细胞肾综合征出血热疫苗理想的候选毒株。
- 姚苹苹徐芳朱函坪翁景清陆群英谢荣辉朱智勇
- 关键词：汉坦病毒细胞培养
- 2007年浙江丽水地区汉坦病毒的分离与型别鉴定被引量：2
- 2009年
- 目的对2007年从浙江省丽水地区肾综合征出血热(hemorrhagic fever with renal syndrome,HFRS)疫区鼠肺分离的汉坦病毒进行型别鉴定和分子生物学特性研究。方法将汉坦病毒抗原阳性的鼠肺标本接种Vero-E6细胞,分离汉坦病毒。提取病毒总RNA,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增病毒S基因全片段,克隆入质粒载体,进行核苷酸序列测定及分析,应用DNA STAR软件分析比较,确定病毒型别。结果从疫区7份阳性鼠肺中分离到2株汉坦病毒,经汉坦病毒单克隆直接荧光血清检查和基因序列测定,结果为汉滩型(HTN)病毒,2株病毒与国际标准株76-118(HTN型)和80-39(SEO型)S片段核苷酸的同源性分别为84.7%、84.6%和64.2%、64.0%。结论浙江省丽水地区可能存在以HTN型病毒为主的肾综合征出血热自然疫源地。
- 姚苹苹雷永良徐芳朱函坪梅玲玲王复甦朱智勇
- 关键词：肾综合征出血热汉坦病毒型别碱基序列基因变异
- 汉坦病毒ZJ5株M和S全片段的分子特性及序列的比较分析被引量：1
- 2008年
- 目的对浙江新分离的汉坦病毒疫苗后备筛选毒株ZJ5株的M和S全片段进行基因序列测定与基因分型，了解该毒株分子基础，并分析与其他病毒株以及20年前浙江分离的汉坦病毒Z10、Z37疫苗株的差异。方法提取汉坦病毒ZJ5株感染细胞总RNA，进行逆转录PCR扩增，产物纯化后克隆于T载体并测定序列。结果扩增出ZJ5病毒M和S全片段并测定了序列，经对核苷酸和氨基酸序列分析表明，与汉城型（SEO）病毒有最高的同源性，为SEOV，但与国内外已知的SEOV核苷酸差异高达11．7％～19．2％和6．7％～14．5％；用M和S片段核苷酸序列所构建的系统进化树显示，病毒株分在SEOV发生群，与SEOV的Gou3株亲缘关系最近，但独自构成一进化支。结论ZJ5株为一不同于现已报道的SEO型毒株的新亚型．
- 姚苹苹朱函坪徐芳谢荣辉梅玲玲陆群英朱智勇邓小昭张云
- 关键词：汉坦病毒系统发生树
- 肾综合征出血热病毒高效价免疫血清抗体毒株的筛选被引量：1
- 2005年
- 徐芳姚苹苹朱函坪翁景清李婵谢荣辉朱智勇
- 关键词：肾综合征出血热病毒抗体
