广东省自然科学基金(92510515000008)
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 相关作者：张璐王斌张磊张琳李娟更多>>
- 相关机构：南方医科大学广州市红十字会医院南方医科大学南方医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- Rac1-GTPase慢病毒的构建及生物学活性鉴定被引量：1
- 2010年
- 目的构建携带绿色荧光蛋白的Rac1-GTPase显性负效突变体(Rac1N17)和组成型活性突变体(Rac1L61)的慢病毒。方法构建Rac1N17和Rac1L61慢病毒表达质粒,并以酶切和测序等方法鉴定。利用ViraPowerTM慢病毒表达系统包装制备Rac1-GTPase突变体慢病毒上清,用其感染大鼠前皮质神经元,分别进行Rac1生物学活性检测、细胞转染效率鉴定与神经元形态学观察。结果构建的Rac1N17和Rac1L61慢病毒表达质粒经酶切与测序鉴定正确,包装的慢病毒滴度为1×106TU/ml。用制备的慢病毒上清感染原代培养的前皮质神经元,Rac1生物学活性检测结果显示Rac1N17慢病毒显著抑制表皮生长因子诱导的Rac1活性的升高,而Rac1L61慢病毒感染神经元Rac1活性显著升高。感染效率鉴定显示病毒上清可感染80%以上的前皮质神经元。形态学观察显示经慢病毒感染后的神经元其胞体与树突分支清晰可见。结论成功制备了Rac1N17和Rac1L61慢病毒,并成功实现了慢病毒感染前皮质神经元,为进一步研究Rho蛋白家族信号通路提供了一个重要工具。
- 王斌李娟张磊张琳张璐
- 关键词：慢病毒绿色荧光蛋白生物学活性
- 构建与制备RhoA-GTPase突变体慢病毒
- 2011年
- 目的构建携带绿色荧光蛋白的RhoA显性负效突变体(RhoAN19)和组成型活性突变体(RhoAL63)慢病毒。方法构建RhoAN19和RhoAL63慢病毒表达质粒,并以酶切及序列测定方法进行鉴定。利用ViraPowerTM慢病毒表达系统包装制备RhoA突变体慢病毒上清,用其感染大鼠前皮质神经元,分别进行RhoA生物学活性检测、细胞转染效率鉴定与神经元形态学观察。结果构建的RhoAN19和RhoAL63慢病毒表达质粒经酶切与测序鉴定正确,包装的慢病毒滴度为1×106 TU/ml。用制备的慢病毒上清感染原代培养的前皮质神经元,生物学活性检测结果显示RhoAN19慢病毒显著抑制溶血磷脂酸(LPA)诱导的RhoA活性的升高,而RhoAL63慢病毒感染神经元后RhoA活性显著升高。感染效率鉴定结果显示病毒上清可感染80%以上的前皮质神经元。形态学观察显示经慢病毒感染后的神经元其胞体与树突分支清晰可见。结论成功制备了RhoA突变体慢病毒,并成功实现了慢病毒感染前皮质神经元,为进一步研究Rho蛋白家族信号通路提供了研究工具。
- 李良平顾晶晶王斌李娟张磊张琳张璐
- 关键词：慢病毒绿色荧光蛋白生物学活性
- Rho蛋白信号通路和神经元树突重塑
- 2011年
- 神经元树突重塑是神经元正常生长发育关键环节。实验证明Rho GTPase信号通路在神经元树突重塑过程中发挥着重要的作用。Rho GTPase是神经元细胞骨架形成的关键性调节因子,作为信号转导通路中的信号转换器和分子开关,它可以作用于细胞骨架或其靶蛋白,影响肌动蛋白的聚合与肌球蛋白的激活,从而影响神经元树突重塑。本文将重点介绍Rho GTPase的下游传导途径以及它在神经元树突重塑过程中所发挥的重要作用。
- 魏丹赵飞鹏张璐
- 关键词：信号通路RHOGTPASE
