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吉林省科技厅资助项目(200505249)
吉林省科技厅资助项目(200505249)
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特异性10-23脱氧核酶对肝癌相关基因IGF-Ⅱ mRNA的体外切割作用
2010年
目的体外观察10-23脱氧核酶(DRz)对肝癌相关基因-胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)mRNA的切割活性。方法用RT-PCR方法扩增出IGF-Ⅱ基因的cDNA片段,然后定向克隆到质粒PGEM-3ZT7启动子的下游,获得重组质粒PGEM-3Z-IGF-Ⅱ,用限制性核酸内切酶HindⅢ将重组质粒线性化后,在体外转录出IGF-Ⅱ基因的mRNA片段,作为DRz切割的底物。结果在无细胞系只观察到DRz1具有切割靶mRNA的作用,DRz2,DRz3和ASODN均未显示出切割活性。结论筛选出的活性DRz1可进一步的用于细胞内实验。
刘雁飞
罗速
赵锐
关键词:
原发性肝细胞肝癌
脱氧核酶
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