四川省教育厅重点项目(09ZA068)
- 作品数：12 被引量：52H指数：4
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- 相关机构：四川农业大学甘孜州林业科学研究所国家质检总局更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 复配芽孢杆菌对撑绿杂交竹枯萎病的生物防治效果研究被引量：8
- 2018年
- 【目的】通过对比单一芽孢杆菌和复配芽孢杆菌对撑绿杂交竹枯萎病的防治效果,为开发防治撑绿杂交竹枯萎病的稳定高效、低成本的复合菌剂提供理论基础。【方法】本文制备了解淀粉芽孢杆菌B01-2、枯草芽孢杆菌B23-1以及二者的复配菌株的发酵滤液,并采用菌丝生长速率法、孢子萌发法和盆栽试验法,研究了各菌株发酵产物对病原菌尖孢镰刀菌菌丝生长、孢子萌发以及对杂交竹抗性生理指标的影响。【结果】复配芽孢杆菌处理对病原菌抑制效果显著高于单一菌株。复配芽孢杆菌菌落直径和孢子萌发率分别为1. 9 cm和8. 8%;单一菌株B01-2和B23-1的菌落直径与孢子萌发率分别为3. 4 cm、4. 1 cm和17. 8%、31. 0%;盆栽防效试验中,芽孢杆菌处理组的枯萎病发病率比对照低。复配芽孢杆菌的发病率(50%)较单一菌株B01-2(60%)与B23-1(60%)更低;复配芽孢杆菌对撑绿杂交竹枯萎病的防治效果达到81. 5%,高于单一菌株B01-2(70. 4%)与B23-1(63. 0%)。杂交竹叶片生理指标测定表明,3种处理的发酵液都能诱导激发杂交竹体内的过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)防御酶的活性,降低杂交竹叶片叶绿素的分解和减少丙二醛(MDA)的生成,触发植物的系统抗病性,增强植株免疫能力。此外,复配菌株较单一菌株对杂交竹叶片的生理指标的影响更明显。【结论】复配芽孢杆菌具有强大的拮抗活性,在室内盆栽苗条件下能够有效防治撑绿杂交竹枯萎病,具有潜在的应用开发前景。
- 李凤刘会涛田莎刘应高
- 关键词：撑绿杂交竹枯萎病芽孢杆菌生物防治
- 粗枝云杉幼林落针病的生理生化特性被引量：4
- 2014年
- 以粗枝云杉(Picea asperata)为研究对象,在马厂梁人工云杉幼龄林内设立标准样地,每样地按云杉发病程度分别采集云杉针叶,测定其生理生化指标,同时对病害进行调查。结果表明:高海拔比低海拔地区发病严重。该地病原菌一般从3月份开始对云杉进行侵染。相关分析表明,发病期间,各防御酶系间协同效率低,云杉抗病能力弱;叶绿素a与叶绿素b质量分数变化趋势相反,叶绿素a先降后升,而叶绿素b先升后降。叶绿素(a+b)质量分数前期有所增加,但后期降至较低水平,已影响到针叶的光合能力。在健康与发病云杉针叶中,其叶绿素(a/b)值变化差异明显,可作为云杉抗性鉴定的辅助指标。
- 杨春琳许秀兰黄晓丽刘应高徐明庆刘韩
- 关键词：粗枝云杉落针病生理生化指标
- 华山松凋落针叶上的真菌多样性及4株真菌的纤维素分解能力被引量：4
- 2016年
- [目的]研究二郎山林场华山松针叶凋落初期针叶上的真菌多样性,分析凋落物分解初期的真菌结构组成及其功能性,揭示真菌多样性与凋落物分解的关系以及根球壳孢菌在针叶分解中的产酶特性。[方法]采用研磨法对分别从海拔2 750,2 650,2 510和2 460 m采集的华山松新近凋落针叶进行真菌分离,结合形态学和真菌ITS序列的分子生物学对分离物鉴定分类。选取3株在形态学上存在明显差异的根球壳孢菌以及1株分离自华山松的二郎山散斑壳为分解菌株,以华山松针叶为唯一底物,采用试管培养法进行发酵,探讨根球壳孢菌的腐生性能。[结果]分离鉴定结果显示,从华山松凋落针叶中获得了23个属于不同分类单元的真菌,其中半知菌数量最多,共有15个分类单元,子囊菌次之,为5个。所有分离菌株隶属15属,毛霉属、木霉属、根球壳孢菌属、青霉属和蓝状菌属在4个海拔凋落物中均存在,为华山松凋落物前期的丰富物种。木霉属和青霉属等丝状真菌在数量上的优势以及种类上的多样性,说明其在凋落物分解过程中发挥着重要作用,而担子菌在数量以及种类上的缺乏说明其在分解前期参与少,推测其后期将从环境进入参与木质素的分解。通过测定4株真菌分解华山松凋落针叶时的纤维素酶活,4株真菌分泌的内切纤维素酶和β-葡聚糖酶活性在第13天达到峰值,外切纤维素酶活性在第17天达到峰值,但4株真菌菌株之间的各纤维素酶活力差异不大,引起的针叶质量损失率也并无显著差异。根球壳孢菌和二郎山散斑壳对针叶的纤维素成分具有分解作用,内切纤维素酶、外切纤维素酶、β-葡萄糖苷酶之间存在协同效应。二郎山散斑壳分解的华山松针叶的平均质量损失率为15.74%,该菌多存在于落地华山松针叶上,而活体针叶中鲜有发现,且未能造成华山松的落针病害;根球壳孢菌在25天内引起华
- 许秀兰杨春琳田莎姜欣华刘韩刘应高
- 关键词：华山松凋落物真菌多样性
- 云杉落针病几个生理生化指标的变化被引量：3
- 2015年
- 以四川马厂梁林场川西云杉(Picea balfouriana)为研究对象,探讨云杉落针病发病的生理生化变化规律。设置3个海拔高度(2 590、2 690、2 790 m)样地,进行病害调查,每样地按云杉发病程度分4个病级,分级采集1年生针叶,测定针叶各生理生化指标。病害调查发现,海拔越高,云杉落针病发病越严重。生理生化测定结果表明,云杉落针病发病越严重,POD、PPO和PAL酶活性偏高,MDA含量增加,叶绿素b和总叶绿素含量减少。
- 杨春琳许秀兰徐明庆刘应高
- 关键词：川西云杉落针病生理生化指标
- 云杉叶栖真菌的群落结构与多样性被引量：3
- 2014年
- 采用表面消毒和不消毒2种方式处理,对四川二郎山林场不同海拔、不同冠层以及不同叶龄的云杉叶栖真菌进行了分离鉴定。结果表明:分离纯化的真菌有26个属,其中Pestalotiopsis和Penicillium同为云杉上、中、下冠层的优势种群。多样性分析表明,云杉下冠层的多样性和均匀度最高,中冠层最低。随着叶龄的增加,真菌种群数量也表现为上升趋势。从云杉上分离得到了引起云杉叶疫病的根球壳孢菌(Rhizosphaera kalkhoffia)。
- 许秀兰张翅黄晓丽张雪刘应高
- 关键词：叶栖真菌群落结构物种多样性
- 四川主要松树内生拟盘多毛孢被引量：2
- 2013年
- 从5种松树健康的枝、叶、干中共分离了2,400个组织块,得到199株内生拟盘多毛孢Pestalotiopsis,形态学和分子生物学鉴定分属于11个种,平均分离率为8.29%。所得11种内生拟盘多毛孢都是首次在四川的松属植物中分离得到,其中葡萄生拟盘多毛孢P.uvicola和山桃草拟盘多毛孢P.gaurae为首次在松树上分离得到。基于ITS序列的分子系统发育分析显示松树内生拟盘多毛孢种类之间存在一定的遗传差异,部分内生拟盘多毛孢与病原拟盘多毛孢的ITS序列具有很高的同源性。
- 刘韩王欢赵景阳袁川李万艳刘应高
- 关键词：拟盘多毛孢属
- 5种优势腐生真菌降解华山松针叶的酶活测定被引量：7
- 2015年
- 【目的】分析腐生真菌降解华山松落针过程中各种酶活性变化与酶间关系,探索真菌对华山松落针的降解能力。【方法】通过形态学观察和转录间隔区ITS序列分析,鉴定分离自华山松凋落物的5种优势菌株。以此为供试菌株,华山松落针为底物,通过发酵纯培养方法,测定底物总有机物质(Total organic matter,TOM)质量损失率及在发酵过程中产生的内切葡聚糖酶(Endoglucanase,EG)、木聚糖酶(Xylanase,Xyl)、木质素过氧化物酶(Lignin peroxidase,Li P)、锰过氧化物酶(Manganese peroxidase,Mn P)和酸性磷酸酶(Acid phosphatase,AP)活性。【结果】5种菌株分别为Mucor sp.、Pestalotiopsis sp.、Allantophomopsis sp.、Phoma sp.和Hypocrea sp.。5种菌引起的针叶TOM质量损失率在6.63%-15.77%之间,Pestalotiopsis sp.具有最高的AP酶活性,且EG酶、Xyl酶和Li P酶3种酶活性较高。Allantophomopsis sp.的Li P酶活性最高,并具有很高的Mn P酶活。Hypocrea sp.分泌的EG酶、Xyl酶活性低,但能产生Li P酶且有较高的AP酶活。相关性分析表明菌株分泌的AP酶活性与TOM质量损失率负相关,EG酶、Xyl酶及AP酶3种酶之间存在协同作用,特别是EG与AP之间。【结论】5种腐生真菌对华山松针叶均有降解作用,降解能力:Pestalotiopsis sp.>Allantophomopsis sp.>Hypocrea sp.>Phoma sp.>Mucor sp.。酶活大小及酶协同作用共同影响针叶降解,Pestalotiopsis sp.、Allantophomopsis sp.和Hypocrea sp.能产生木质纤维素降解酶并能引起较高的质量损失率,因此这3株菌为木质纤维素降解真菌。
- 文自兰许秀兰杨春琳田莎刘应高
- 关键词：真菌降解华山松酸性磷酸酶
- 云杉内生优势毛壳菌的筛选及其生防机制研究被引量：15
- 2014年
- 通过形态学和分子生物学鉴定方法,将从云杉针叶中分离得到的10株毛壳菌Chaetomium鉴定为球毛壳C.globosum、粪生毛壳C.funicola、印度毛壳C.indicum和近缘毛壳C.subaffine。通过平板生长筛选和拮抗性复筛,筛选出2株生长势高且对9种常见林木病害病原拮抗性好的优势生防菌株,分别为粪生毛壳菌株C-45和近缘毛壳菌株C-44。为了进一步了解2株优势毛壳菌的生防潜力和作用机制,对其进行了包括营养竞争、重寄生、胞外酶及代谢产物等生防机制的研究。结果显示,菌株C-45和C-44对病原菌的抑制是多种生防机制的协同作用。根据2株优势菌株在不同生防机制上表现出的差异,菌株C-44的生防作用强于菌株C-45,具有很好的生防潜力。
- 许秀兰黄晓丽张翅徐明庆骆军刘应高
- 关键词：云杉内生真菌生防机制
- 散斑壳菌对华山松凋落针叶的室内分解被引量：1
- 2014年
- 为了探明散斑壳菌（Lophodermium spp．）分解利用针叶时的各纤维素酶酶解的作用机制和了解该菌的腐生性能，以华山松（ Pinus armandii）新近凋落针叶为底物进行纯培养分解试验。试验以针叶为唯一碳源，采用试管培养液法，对Lophodermium conigenum、L． pinastri、L． kumaunicum、L． sichuanense 和L． erlangshanense 5种散斑壳菌进行纯培养试验，同时测定针叶失重率和纤维素酶酶活大小。相关性分析表明，内切纤维素酶（ Endoglucanase， EG）、外切纤维素酶（ Cellobiohydrolase， CBH）与β-葡萄糖苷酶（β-glucosidase， BGL）三者之间存在一定协同效应（ L． pinastri与L． erlangshanense除外），特别是CBH与EG之间。各酶类活性大小是制约针叶纤维素分解的主要因素，协同效应强酶活高凋落针叶分解就越快。5种菌引起针叶质量损失率在8.5％～11.8％之间，各菌株引起针叶质量损失依次为L． pinastri＞L． sichuanense＞L． kumaunicum＞L． conigenum＞L． erlangshanense。5种菌均能分泌纤维素酶，对凋落针叶有一定分解能力，且EG、CBH与BGL之间存在不同程度的协同作用，属于兼性寄生物，但其腐生性不强。
- 杨春琳许秀兰田莎文自兰刘应高姜欣华张岩刘会涛
- 关键词：华山松微生物分解
- 川西云杉几丁质酶基因PlCHI的克隆、表达与生物信息学分析被引量：5
- 2019年
- 以川西云杉(Picea likiangensis var. balfouriana (Rehd. et Wils.) Hillier ex Slsvin)为材料,利用RTPCR技术,克隆获得几丁质酶基因Pl CHI的cDNA全长序列,并对该基因的序列特征及基因表达情况进行分析。结果显示,Pl CHI的开放阅读框长1017 bp,共编码338个氨基酸;蛋白序列结构域分析结果表明,Pl CHI为ClassⅠ类几丁质酶,属19家族,兼具溶菌酶活性;该序列与其他植物几丁质酶的蛋白序列相似性较高。系统发育分析结果显示,川西云杉Pl CHI序列与北美云杉(Picea sitchensis (Bong.) Corr.)、黑松(Pinus thunbergii Parl.)等松科植物亲缘关系最近。进一步将Pl CHI重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)中,表达出约45 k D的蛋白,主要以包涵体形式存在,且在25℃下采用0.2 mmol/L的IPTG诱导4 h时蛋白的表达量最佳。
- 刘利娟刘裕峰杨帅刘应高
- 关键词：川西云杉几丁质酶生物信息学原核表达
