国家自然科学基金(200476085)
- 作品数：2 被引量：5H指数：2
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- 类人胶原蛋白工程菌质粒稳定性研究被引量：3
- 2006年
- 目的研究基因重组大肠杆菌补料分批发酵生产类人胶原蛋白过程中质粒稳定性。方法通过平板复制法,观察质粒稳定性在不同生长周期、卡那霉素浓度和不同比生长速率中的变化。结果质粒稳定性受生长周期、卡那霉素和比生长速率的影响。在μ为0.15、卡那霉素浓度为0.005g/L的情况下,工程菌生产效率最理想。结论通过控制发酵过程中的质粒稳定性可以有效地提高菌体产量和目标蛋白产量。
- 郑文超范代娣米钰马晓轩骆艳娥惠俊锋
- 关键词：类人胶原蛋白补料分批发酵质粒稳定性比生长速率
- 重组类人胶原蛋白Ⅰ的层析分离被引量：2
- 2005年
- 目的研究重组类人胶原蛋白的基因工程下游工艺对阴离子交换树脂(DE52)和阳离子交换树脂(CM52)的吸附效果。方法将基因工程菌E.coliBL21经超声破碎、硫酸铵盐析、超滤浓缩后,再进行批量层析进一步分离纯化。结果得到最佳实验条件采用阴离子交换树脂,pH值为6.0,盐浓度为0.2mol/L,蛋白进样浓度为0.4%(质量分数)。结论在HCB I的纯化过程中,阴离子交换树脂(DE52)较阳离子交换树脂(CM52)的分离效果更优,最终产物的纯度达到95.98%,回收率为91.7%,纯化倍数为5.3。纯化的类人胶原蛋白Ⅰ经SDS-PAGE电泳测定为电泳纯,分子质量为90ku。
- 米钰代菊红范代娣童燕韩娟张炜
- 关键词：分离纯化层析
