杭州市卫生科技计划项目(2010Z010)
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 相关作者：李钧刘继峰胡俊斯国静俞骅更多>>
- 相关机构：杭州市第三人民医院杭州市疾病预防控制中心更多>>
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- 单纯疱疹病毒Ⅱ型G蛋白免疫优势肽段在杆状病毒表达系统的表达及其反应原性
- 2013年
- 目的利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统对单纯疱疹病毒II型(HSV-2)糖蛋白G(gG-2)免疫优势片段gG321-580进行表达,纯化并评价其反应原性,以探索HSV-2免疫诊断试剂的研制。方法提取HSV-2DNA作为模板,PCR扩增gG321-580基因,克隆至pFastBac HTC载体中,通过Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达His-gG321-580融合蛋白,SDS-PAGE和Western-blotting鉴定表达产物,NTA-Ni 2+纯化后间接ELISA评价其反应原性。结果 HSV-2gG321-580在昆虫细胞Sf9中得到特异性表达,纯化后的重组gG321-580蛋白对HSV-2阳性血清抗体有较好的抗原性和特异性。结论 gG321-580蛋白在Bac-to-Bac杆状病毒表达系统中成功表达,表达产物表现出良好的反应原性,为发展HSV-2免疫诊断试剂奠定了基础。
- 刘涛刘继峰斯国静俞骅胡俊李钧
- 2型单纯疱疹病毒糖蛋白G基因片段的表达及其抗原性分析被引量：1
- 2013年
- 目的获得单纯疱疹病毒2型(HSV-2)糖蛋白G(gG2)免疫优势片段gG321-580并初步研究其抗原性。方法 PCR扩增gG321-580基因,利用Bac-to-Bac表达系统表达gG321-580His融合蛋白,Western blot和间接ELISA鉴定蛋白活性。结果在Sf9细胞中成功表达HSV-2 gG321-580His蛋白,gG321-580His能与小鼠抗HSV-2 gG2单抗结合,在60 KDa附近出现特异性结合条带,ELISA分析初步证实gG321-580His能够与HSV-2阳性血清反应,而不与HSV-1阳性血清和正常人血清反应。结论 gG321-580His蛋白获得成功表达,ELISA检测显示其具有良好的抗原性,为研究以gG321-580蛋白作为靶区域的HSV-2型特异性诊断试剂盒打下实验基础。
- 刘涛刘继峰斯国静俞骅胡俊李钧
- 关键词：单纯疱疹病毒2型酶联免疫吸附
