国家自然科学基金(30070678)
- 作品数：12 被引量：190H指数：9
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- 相关领域：理学轻工技术与工程医药卫生生物学更多>>
- 转基因玉米的多重PCR-毛细管电泳-激光诱导荧光检测方法研究被引量：17
- 2007年
- 采用三重PCR反应,同时扩增CaMV 35S启动子、hsp70 intron1和CryIA(b)基因之间序列以及Invertase基因,扩增产物用无胶筛分毛细管电泳-激光诱导荧光检测,从而建立了多重PCR-毛细管电泳-激光诱导荧光快速检测转基因玉米的新方法.对影响多重PCR扩增和毛细管电泳的因素进行了优化.在优化的条件下,本方法可以同时检测转基因玉米样品中3种外源基因.经序列测试证实,三重PCR扩增产物的序列与原基因完全一致,表明扩增结果可靠.该方法能检出0.05%MON810转基因玉米成分,远低于欧盟对转基因食品规定标识的质量分数阈值(1%).该方法对玉米及其制品的检测结果与实时荧光PCR方法的检测结果一致,与传统的琼脂糖凝胶电泳法相比,具有特异性高、快速及灵敏等优点,适用于玉米中转基因成分以及转基因玉米MON810品系的快速筛选、鉴定和检测,能满足我国实施转基因食品标签法规的要求.
- 周颖黎源倩裴晓方
- 关键词：多重PCR激光诱导荧光检测转基因玉米
- 高效液相色谱法测定大鼠血清中4-壬基酚和双酚A被引量：19
- 2004年
- 目的 建立高效液相色谱测定血清 4 -壬基酚和双酚 A的方法。方法 大鼠血清样品用正己烷 -乙醚混合溶剂 (70∶ 30 )提取 ,采用 C1 8色谱柱分离 ,以乙腈 -乙酸铵缓冲液 (p H 4 .5 ) (80∶ 2 0 )为流动相 ,在激发波长 2 2 7nm、发射波长 313nm处用荧光检测器检测。结果 血清中的待测组分的质量浓度与峰面积呈良好的线性关系 ,4 -壬基酚和双酚 A线性范围分别为 0 .0 13～ 5 .0μg/ml,0 .0 0 4～ 3.0μg/ml。本方法的检测限 4 -壬基酚为 13ng/ml,双酚 A为 4 ng/ml,加标回收率 4 -壬基酚为 83.8%～ 10 0 .0 % ,双酚 A为 83.3%～ 10 0 .0 % ;日内精密度为 1.70 %～2 .70 % ,日间精密度为 2 .0 6 %～ 9.78%。结论 该法适用于血清中双酚 A和 4
- 肖全伟黎源倩张浩梁疆莉吴德生
- 关键词：高效液相色谱法血清4-壬基酚双酚A
- 毛细管电泳-激光诱导荧光检测装置的研制及应用被引量：16
- 2004年
- 目的 自行组建高效毛细管电泳 -激光诱导荧光分析装置。方法 以波长 5 4 3.5 nm He- Ne激光为激发光源 ,滤色片 -单色仪分光 ,光电倍增管检测 ,用计算机采集和处理电泳图谱。结果 优化了毛细管电泳 -激光诱导荧光检测装置的设计和分析参数 ,用该装置获得了高信噪比毛细管电泳谱。对罗丹明类荧光试剂 (Sulforhdam ineB)溶液的检出限为 10 - 9m ol/ L,线性范围为 1× 10 - 6～ 1× 10 - 9mol/ L。采用该装置检测了分枝杆菌 DNA的 PCR扩增产物、酶切产物以及人血清白蛋白。结论 所组建的高效毛细管电泳 -激光诱导荧光分析装置结构合理 ,灵敏度高 ,成本低、光路校准方便 ,分离效能明显高于常规琼脂糖电泳 ,能作为研究生物样品中 DNA片段和蛋白质含量的有效检测手段。
- 黎源倩杨经国周颖邹晓莉米建萍曾红燕
- 关键词：激光诱导荧光毛细管电泳蛋白质分析
- 毛细管电泳-激光诱导荧光检测肌腱和肌腱细胞中的羟脯氨酸被引量：11
- 2006年
- 建立毛细管电泳-激光诱导荧光检测(CE-LIF)分析羟脯氨酸的方法。肌腱和肌腱细胞中的胶原蛋白碱水解生成氨基酸,经异硫氰酸荧光素(FITC)衍生,采用LIF-CE分离测定胶原蛋白特异性氨基酸-羟脯氨酸。羟脯氨酸在0.5μg/L^8×103μg/L浓度范围内线性关系良好;检出限为0.5μg/L。相对迁移率和相对峰高的相对标准偏差(RSD)分别为5.0%和6.1%。测定了60份肌腱和9份细胞样品,加标回收率为95%~110%。将所建立的毛细管电泳方法与高效液相色谱法(HPLC)进行比较,两者测定结果相对误差为-1.9%~2.0%。本法仅需一次荧光标记,操作简单、快速灵敏,12min内完成一个分析周期,适于测定肌腱和细胞样品。
- 邹晓莉周春艳黎源倩曾红燕
- 关键词：羟脯氨酸激光诱导荧光检测毛细管电泳肌腱细胞
- CCD阵列检测-流动注射分析保健食品中原花青素被引量：9
- 2005年
- 建立了原花青素的流动注射分析方法.利用原花青素在强酸介质中,铁离子的催化下形成红色花色素,以NH4 Fe(SO4)2、盐酸、乙醇的混合溶液为载流,用流动注射-二极管阵列检测器扫描待测物的吸收光谱图,测定最大吸收波长(545 nm)处的吸光度值.优化了影响显色反应的有关因素及流动注射参数,原花青素的浓度在0.010～0.20 mg·mL-1的范围内呈良好的线性关系.方法检出限为5μg·mL-1,加标回收率为82.47%～98.18%,相对标准差1.5%～4.9%.本文所建立的分析方法灵敏、准确,采样频率为10 samp1es·h-1,并已成功用于保健食品中原花青素的检测.
- 黎源倩吕星邹晓莉米建萍杨经国
- 关键词：原花青素流动注射分析保健食品
- 毛细管区带电泳法测定消毒剂中三氯新被引量：5
- 2005年
- 建立了消毒剂中三氯新的毛细管电泳分析方法。探讨了缓冲介质和电泳参数对三氯新测定的影响。以15mmol/LNa2HPO4(pH6.0)-乙腈(V(Na2HPO4)∶V(乙腈)=50∶50)为电泳缓冲液,三氯新在12kV电压下电泳,于254nm检测波长处测定,6min可以完成分析。本方法的检出限为0.04mg/L,线性范围0.04～2.00mg/mL(r=0.997),加标回收率在90.9%～108.2%范围内,测定值的相对标准偏差分别为峰高7.7%,迁移时间5.5%。将本法与高效液相色谱法进行比较,样品测定结果的相对误差小于10%。将所建立的方法已用于消毒剂样品中三氯新的测定。
- 毛红霞黎源倩邹晓莉曾红燕
- 关键词：三氯新毛细管电泳
- 高效液相色谱法测定大鼠组织中双酚A和4-壬基酚浓度被引量：26
- 2004年
- 建立了大鼠组织中双酚A和4 壬基酚的提取和含量测定方法。大鼠组织样品经甲醇 乙酸铵缓冲液匀浆、正己烷 乙醚混合溶剂提取、氮气吹干后用流动相溶解,以乙腈 0 01mol/L乙酸铵缓冲液(pH4 5)(体积比为75∶25)为流动相,经C18色谱柱分离,在激发波长227nm、发射波长313nm下进行荧光检测。大鼠心、脑、肝和肾脏组织样品中,双酚A的检出限为3 2～4 6ng/g,4 壬基酚的检出限为11 8～15 6ng/g;日内检测精密度为0 89%～4 50%,日间检测精密度为3 10%～12 40%;不同剂量的加标回收率为81 2%～96 5%,相对标准偏差小于5.28%。该方法简便快速,灵敏可靠,适用于动物组织中环境类激素双酚A和4 壬基酚含量的同时检测。
- 肖全伟黎源倩吴德生
- 关键词：高效液相色谱法4-壬基酚双酚A大鼠组织
- 顶空固相微萃取-气相色谱法测定酒中的甲醇和杂醇油被引量：46
- 2002年
- 采用环氧树脂作为固相涂层制作固相微萃取 (SPME)装置 ,建立了顶空固相微萃取 气相色谱法 (HS SPME GC)测定酒精饮料中甲醇和杂醇油的方法 ,并对萃取条件和色谱条件进行了优化。方法的检出限为 0 0 2mg/L～0 0 4mg/L ,相对标准偏差为 1 4 %～ 4 1% ;与顶空气相色谱法相比 ,灵敏度可提高 2 0倍～ 30 0倍。将该法用于啤酒、葡萄酒和保健酒中的甲醇和杂醇油的测定 ,加标回收率为 80 8%～ 110 3% ;与顶空气相色谱法 (国家标准方法 )进行了比较 ,相对误差不大于 7 3%。该法简便、快速、灵敏、精密度好 ,拓宽了SPME的应用范围。
- 刘红河黎源倩孙成均
- 关键词：顶空固相微萃取气相色谱甲醇杂醇油
- 二极管阵列检测-流动注射分光光度法同时测定食品中铁铜钴被引量：6
- 2007年
- 目的在于建立同时测定食品中铁、铜、钴三种微量元素的新方法。以2-(5-溴-2-吡啶偶氮)-5-二乙氨基酚(5-Br-PADAP)为显色剂,TritonX-100为增敏剂,采用流动注射-CCD二极管阵列检测-分光光度分析法同时对其进行测定。优化了实验参数,并用偏最小二乘法计算程序解析重叠光谱。结果显示,铁、铜和钴的线性范围分别为0·2～10μg·mL-1,0·1～5·0μg·mL-1,0·01～1·0μg·mL-1,检出限分别为:0·2,0·1,0·01μg·mL-1,进样频率为45样·h-1。所建方法用于茶叶、芝麻、小米等食品测定时,样品加标回收率分别为铁89·4%～102·3%、铜92·2%～108·0%、钴93·2%～110·8%,相对标准偏差为1·1%～12·1%。对国家一级标准参考物质茶叶和桃叶进行测定(n=8),结果在其给出的保证值范围之内。
- 米建萍黎源倩邹晓莉郑波杨经国
- 关键词：流动注射分析食品分析钴
- 毛细管电泳法快速检测消毒剂中的醋酸氯己定被引量：7
- 2005年
- 建立了消毒剂中活性成分醋酸氯己定(又名:醋酸洗必泰)的毛细管电泳快速检测法。采用15mmol/L磷酸盐乙腈(体积比为60∶40)缓冲体系,将醋酸氯己定在50cm×75μmi.d.的石英毛细管柱中进行电泳分离,电泳电压为15kV,检测波长为254nm。同时,对毛细管电泳分析醋酸氯己定的条件(如缓冲液的种类、pH值、浓度及电泳电压等)进行了优化。用该方法对消毒剂样品进行测定,在4min内可完成分析。醋酸氯己定在质量浓度为0.01～0.10g/L时线性良好,检测限为0.004mg/L,吸光度值的相对标准偏差为3.97%,迁移时间的相对标准偏差为2.99%,样品加标回收率为91.4%～116.6%。将该方法与高效液相色谱法进行比较,两种方法测定结果的相对误差≤4%。所建立的检测醋酸氯己定含量的毛细管区带电泳法简单、快速,适用于消毒剂样品的测定。
- 邹晓莉黎源倩毛红霞曾红燕
- 关键词：毛细管电泳醋酸氯己定消毒剂
