国家自然科学基金(30801201)
- 作品数:2 被引量:5H指数:2
- 相关作者:李春霖刘瑜田慧谷昭艳陆菊明更多>>
- 相关机构:中国人民解放军总医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- NF-κB及下游炎症因子在胰岛素抵抗大鼠肾脏中的表达被引量:3
- 2014年
- 目的探讨胰岛素抵抗(IR)大鼠肾脏组织中核转录因子(NF-κB)及下游炎症因子诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、环氧合酶(COX-2)表达的变化及意义。方法健康雄性Wistar大鼠30只,随机分为正常对照(NC)组(n=15)、IR组(n=15)。以高脂高糖喂养法构造IR大鼠模型,并使用高胰岛素正葡萄糖钳夹实验验证模型的有效性。留取大鼠肾脏组织,HE染色观察肾脏结构的变化。免疫组化染色观察肾脏组织中iNOS和COX-2的表达情况。RT-PCR检测肾脏组织中NF-κB、iNOS和COX-2 mRNA的表达情况。采用凝胶电泳迁移率(EMSA)法测定大鼠肾脏组织NF-κB的DNA结合活性。结果 HE染色结果显示,与NC组相比,IR组大鼠可见肾小球体积增大、系膜区增宽等肾脏组织早期受损表现。免疫组化染色结果显示,与NC组比较,IR组大鼠肾脏组织中iNOS和COX-2表达水平明显升高(P<0.05)。RT-PCR结果显示,IR组大鼠肾脏组织中NF-κB mRNA及iNOS mRNA、COX-2 mRNA表达水平与NC组比较均明显升高(P<0.05)。EMSA结果显示,IR组大鼠肾脏组织核蛋白NF-κB DNA结合力与NC组比较明显升高(P<0.05)。结论 IR大鼠肾脏组织中存在NF-κB的激活,从而启动下游靶基因iNOS、COX-2表达的增加,进而导致肾脏组织受损。NF-κB的激活可能是导致IR大鼠肾脏病变的始动因子之一。
- 闫双通李春霖陆菊明田慧谷昭艳刘瑜
- 关键词:胰岛素抗药性环氧化酶2
- BTBD1O对胰岛β细胞增殖的影响和作用机制研究被引量:2
- 2012年
- 目的 观察BTBD10基因在大鼠胰岛β细胞株INS-1细胞过表达后对其增生的影响和可能机制.方法 构建重组真核表达质粒pcDNA4.0-BTBD10,利用脂质体转染INS-1细胞,转染后48 h筛选获得稳定表达细胞株,Western blot方法验证BTBD10表达.四唑盐比色法(MTT法)测定INS-1细胞增殖活性.Western blot方法检测蛋白激酶B(PKB,又名Akt)、磷酸化Akt(p-Akt)、哺乳动物的雷帕霉素靶蛋白(mTOR)和磷酸化-mTOR (p-mTOR)的蛋白表达.结果 成功构建BTBD10过表达的稳定INS-1细胞株,BTBD10的高表达可增加INS-1细胞的增殖活性,促进INS-1细胞p-Akt和p-mTOR的表达,而Akt和mTOR蛋白表达无明显变化.结论 BTBD10在INS-1细胞的过表达可通过促进Akt和mTOR的磷酸化水平而激活Akt/mTOR信号通路,使细胞总体蛋白质翻译水平升高,从而促进INS-1细胞的增殖.
- 刘瑜谷昭艳苗新宇龚艳平肖彧君李剑田慧李春霖
- 关键词:胰岛素分泌细胞细胞增殖