国家自然科学基金(31070330)
- 作品数：5 被引量：20H指数：3
- 相关作者：高三基王恒波陈平华陈如凯刘迪更多>>
- 相关机构：福建农林大学西南大学中华人民共和国农业部更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金福建省自然科学基金福建省教育厅科技项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 甘蔗内标基因PCR检测技术研究被引量：2
- 2017年
- 克隆鉴定甘蔗内源低拷贝基因鲜有研究,影响转基因甘蔗精确鉴定。根据其他作物已有的内标基因和内源低拷贝基因,按照内标基因的物种特异性和通用性原则,用12个有代表性甘蔗栽培品种对11个候选基因进行筛选与鉴定,获得了甘蔗特有的内源低拷贝基因,并以该基因建立了甘蔗内标基因PCR检测技术体系,为转基因甘蔗的精确检测和转基因标准的制定奠定了基础。
- 肖乃衍林冰刘迪陈平华许跃语施桂姣王恒波郭晋隆高三基许莉萍陈如凯
- 关键词：甘蔗
- 多重PCR快速检测甘蔗转基因成分研究被引量：3
- 2014年
- 以单子叶植物常见外源转基因元件Ubiquitin启动子、NOS启动子、NOS终止子、Bar基因和Bt基因序列设计多重PCR引物,通过对PCR扩增体系中退火温度、Premix TaqTM浓度、引物浓度的优化,建立一种快速检测转基因甘蔗成分的多重PCR方法。结果表明:建立的体系一次能有效检测5个参数,其检测的最低DNA质量百分比可达1.0%,并在多个转基因甘蔗品种检测中得到验证。
- 张卓许莉萍陈平华李林祥王恒波高世武施桂姣陈忠伟项慰高三基刘迪邰连赛陈容陈如凯
- 关键词：多重PCR甘蔗转基因检测
- 甘蔗花青素转录因子基因ScRS克隆与基因枪转化研究
- 2017年
- 花青素不仅是天然色素,而且具有保健功能。花青素转录因子基因对于调控花青素的合成具有关键作用。本研究根据玉米花青素转录因子基因RS序列设计引物,利用同源克隆技术,得到甘蔗花青素转录因子基因ScRS的全长序列;在ScRS序列两端分别添加KpnⅠ、SalⅠ酶切位点,构建植物表达载体pCAMBIA1301-35SN-ScRS,包被微粒载体通过基因枪对甘蔗愈伤组织进行轰击,转化的愈伤组织明显呈紫红色;将紫红色愈伤组织分化培养获得再生甘蔗植株,经PCR检测,获得转ScRS基因阳性植株,初步证实利用克隆的基因转化甘蔗可以使愈伤组织显色。研究结果对于建立新型的遗传转化可视化示踪体系和培育高花青素甘蔗品种具有重要意义。
- 刘迪施桂姣肖乃衍Khalil Farghama许跃语陈平华张卓王恒波高三基许莉萍张华
- 关键词：甘蔗基因枪轰击
- 甘蔗黄叶病毒与花叶病毒CP基因RNAi载体构建与转化甘蔗研究被引量：8
- 2016年
- 甘蔗黄叶病和甘蔗花叶病是我国甘蔗最主要的病毒病,感病品种产量下降和品质变劣,传统方法难以防治。RNA干扰技术使培育抗病毒甘蔗品种成为可能。本研究根据甘蔗黄叶病毒和侵染甘蔗的高粱花叶病毒结构与功能特性,广泛收集不同来源病毒分离物CP基因序列,经过比对选取保守序列作为干扰序列。通过在序列两端添加酶切位点,合成并连接成双价甘蔗黄叶病和花叶病毒干扰序列,然后构建到中间载体p HANNIBAL上,形成双价RNAi干扰结构,最后插入到p ART27上形成干扰表达载体。利用基因枪轰击甘蔗品种福农15号愈伤组织进行转化,经G418筛选获得抗性再生植株。通过提取DNA和RNA分析,证实双价RNAi干扰结构不仅以不同拷贝整合到甘蔗基因组中,而且得到了转录表达。
- 陈利平陈平华陈忠伟王恒波许莉萍刘迪高三基郭晋隆陈如凯
- 关键词：甘蔗黄叶病毒甘蔗花叶病毒CP基因
- 甘蔗宿根矮化病菌实时荧光定量PCR检测方法的建立被引量：7
- 2015年
- 甘蔗宿根矮化病是由Leifsonia xyli subsp.xyli(Lxx)引起的一种世界性甘蔗细菌病害。根据Lxx的Pat1基因保守序列,设计并合成了一对特异性引物Pat1F(5'-GGTTCCATTGCTTACCGATT-3')/Pat1R(5'-CAAGTTTCGACAGGAACAGC-3'),和一条Taq M an探针(FAM-5'-CCACGGCTACGTCAATTCGGG-3'-TAM RA),建立了一种特异性强、灵敏度高的甘蔗宿根矮化病菌实时荧光定量PCR检测方法。结果表明,本研究建立的实时荧光定量PCR方法,对Lxx的检测最低下限为102copies·μL-1。应用实时荧光定量PCR与常规PCR方法对14个甘蔗品种进行Lxx检测,阳性检出率分别为86%和43%,表明实时荧光定量PCR比常规PCR检测方法具有更高的灵敏度。研究结果为甘蔗宿根矮化病的诊断、田间发生动态监测、脱毒健康种苗检测及品种/材料交换检疫检测提供了新技术支撑。
- 王恒波陈平华高三基郭晋隆陈如凯
- 关键词：甘蔗实时荧光定量PCR
