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胰腺癌细胞中蛋白磷酸酶2A催化性C亚基低表达对癌细胞生长的影响被引量：2: 2014年; 目的探讨蛋白磷酸酶2A催化性C亚基（PP2Ac）在胰腺癌组织和细胞系中的表达水平，及其对JNK／c-Jun／AP-1信号通路的调控作用和对癌细胞生长的影响。方法采用实时PCR检测PP2Ac表达水平，MTF法检测细胞活力，Western印迹检测蛋白表达水平和磷酸化水平，流式细胞术检测细胞周期，荧光素酶报告基因检测转录活性。结果胰腺癌组织中PP2Ac表达水平显著低于癌旁组织，胰腺癌细胞系中PP2Ac也呈低水平表达，在胰腺癌细胞中过表达PP2Ac可抑制癌细胞生长（转染PP2Acct、PP2Acl348h后可使细胞活力分别下降（24．85±4．85）％、（11．31±4．62）％；72h后细胞活力分别下降（33．89±2．05）％、（16．66±2．81）％；PP2Ac低水平表达可上调JNK／c．Jun／AP-1通路的活性，在胰腺癌细胞中过表达PP2Ac可下调JNK、C-Jun的磷酸化水平并抑制AP-1的转录沿眭；采用抑制剂阻断JNK通路，可阻滞细胞周期于G2／M期，进而抑制细胞生长。结论胰腺癌细胞中PP2Ac呈低表达，通过上调JNK／c-Jun／AP-1通路的活性促进胰腺癌细胞生长。; 李伟龚斐然陈政宗洋陈凯李道明陶敏徐泽宽; 关键词：JNK信号通路 AP-1

斑蝥素抑制舌癌细胞生长及转移能力被引量：4: 2014年; 【目的】观察斑蝥素(Cantharidin)对舌癌细胞株Tca8113、CAL-27生长及转移能力的抑制作用。【方法】舌癌细胞株Tca8113、CAL-27处理组采用斑蝥素处理,通过噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞生长能力;通过流式细胞术检测细胞的细胞周期分布;通过实时定量PCR和Western-blot检测p21、细胞周期蛋白依赖激酶1(CDK1)、基质金属蛋白酶-2、9(MMP-2,9)基因表达的变化;通过Transwell小室及划痕实验检测斑蝥素对细胞侵袭和迁移能力的影响。【结果】斑蝥素抑制舌癌细胞生长,呈剂量和时间依赖性(P﹤0.01)。斑蝥素处理后G2/M期细胞比例上升(P﹤0.01),呈G2/M期阻滞。斑蝥素处理后,抑制G2/M周期转换的p21表达上调(P﹤0.01),而促进G2/M周期转换的CDK1表达下调(P﹤0.01)。斑蝥素可显著抑制舌癌细胞的侵袭能力,处理24 h使Tca8113、CAL-27细胞侵袭力分别下降(93.50±3.32)%(P﹤0.01),(61.33±4.11)%(P﹤0.01)。斑蝥素处理后MMP-2、9 mRNA表达量显著降低。划痕实验显示斑蝥素可显著抑制舌癌细胞的迁移能力(P﹤0.01),处理12 h使Tca8113、CAL-27细胞迁移能力分别下降(57.60±8.98)%(P﹤0.01),(49.94±5.63)%(P﹤0.01)。【结论】斑蝥素通过阻滞细胞周期抑制舌癌细胞的生长,并通过抑制舌癌细胞迁移和对基质的降解,抑制舌癌细胞转移。; 郑乔丹李伟殷红; 关键词：斑蝥素舌癌

肝癌组织特异性蛋白磷酸酶2A催化性C亚基α亚型显性负性突变体表达载体抑制肝癌移植瘤生长的体内研究: 2013年; 目的构建腺病毒为载体的肝癌组织特异性启动子驱动的蛋白磷酸酶2A催化性C亚基α亚型显性负性突变体（domina negative form of protein phosphatase 2A catalytic subunitα，DN—PP2Acα）表达载体，研究其对肝癌生长的影响。方法前期研究已构建了甲胎蛋白（alpha-fetoprotein，AFP）基因增强子和磷酸甘油酸激酶（phosphoglycerate kinase，pgk）基因启动子组合形成的肝癌组织特异性AFpg启动子，并将AFpg启动子和DNPP2Aca编码序列构建成AFpg启动子调控的DN—PP2Acα表达载体。将该载体重组到腺病毒载体中。Western印迹法检测PP2Ac表达水平。MTT法检测细胞生长。用荷瘤裸鼠进行体内研究。结果AFpg启动子调控的DN—PP2Acα表达载体可特异性地使DN—PP2Acα表达于AFP阳性肝癌细胞HepG2，并抑制细胞及移植瘤的生长，而对AFP阴性肝癌细胞株SK—HEP1、正常肝细胞株L-02和移植瘤的生长无明显影响。结论AFpg启动子调控的DNPP2Acα表达载体能特异性地抑制AFP阳性肝癌细胞的生长，可用于肝癌组织特异性基因治疗。; 龚斐然李伟陈凯陶敏李道明徐泽宽; 关键词：肝癌蛋白磷酸酶2A

蛋白磷酸酶2A抑制剂对胰腺癌细胞活力的影响及其机制: 2012年; 目的研究蛋白磷酸酶2A（PP2A）抑制剂对胰腺癌细胞系PANC-1活力的影响及其机制。方法用PP2A抑制剂斑蝥素和冈田酸处理PANC-1细胞。通过Western印迹检测核因子（NF）-κB通路的激活程度。通过转染PP2A活性亚基ca（PP2Aca）表达质粒、NF-κB抑制蛋白激酶（IKK）a和NF-κB抑制蛋白（IκB）a的显性负性突变体、p65干扰质粒，分别从各环节阻断NF-κB通路，通过四甲基偶氮唑盐比色法（MTT法）检测细胞活力。结果PP2A抑制剂可使IKKa磷酸化，进一步使IKBa磷酸化并降解，继而释放p65入核。过表达PP2Aca、IKKa显性负性突变体、IKBa显性负性突变体或干扰p65可分别使斑蝥素对细胞活力的抑制率下降（31．85±13．37）％、（23．48±8．98）％、（22．63±5．81）％、（20．88±3．24）％，使冈田酸对细胞活力的抑制率下降（40．17±11．65）％、（27．34士14．28）％、（24．85±3．39）％、（27．08±3．81）％。结论PP2A抑制剂通过PP2A／IKKa／IκBa／p65依赖性通路发挥抗胰腺癌作用。; 李伟陈政龚斐然宗洋苗毅陶敏徐泽宽; 关键词：斑蝥素冈田酸核因子-ΚB 磷酰化

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苏州市“科教兴卫工程”青年科技项目(SWKQ1003)

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