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教育部留学回国人员科研启动基金(20071108-184)
作品数:
1
被引量:2
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相关作者:
周睿卿
杨曦
郭勇
单卿卿
龚玉萍
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华西医科大学
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中华血液学杂...
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2012
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SCL/TAL-1基因沉默对EPO诱导的K562细胞红系分化的影响
被引量:2
2012年
目的通过RNA干扰技术降低SCL/TAL-1mRNA的表达,探讨SCL/TAL-1在K562细胞红系分化中的作用。方法以EPO诱导白血病细胞系K562细胞向红系分化为模型,将靶向SCL/TAL-1基因的特异性短发夹RNA(shRNA)慢病毒质粒pTRIP—dU3-RNAiTALh—EF1a—GFP转染K562细胞,RT—PCR检测其SCL/TAL—l和红系相关基因RhD、血型糖蛋白A(GPA,即CD253a)、CD47mRNA表达水平变化,流式细胞术分析红系分化抗原CD71、CD253a的表达,并以空载体质粒pTRIP—dU3-RNAi—luc—EF1-GFP转染的K652细胞为对照。结果①通过慢病毒转染系统将含SCL/TAL.1shRNA的质粒及空载体质粒转染K562细胞48h,绿色荧光蛋白(GFP)+细胞占总细胞的95%以上,表明感染率达到95%以上。②RT—PCR结果显示转染特异性shRNA的K562细胞SCL/TAL-1mRNA表达水平比空载体对照明显下调(P〈0.05),红系抗原CIM7和RhDmRNA水平也比对照组明显下调(P〈0.05),GPA有所下降,但没有CIM7和RhD下降程度大。③流式细胞术检测到SCL/TAL-1低表达组红系分化抗原CD71、CD235a表达降低,表达率分别是10.4%、76.5%,而在对照组的表达率分别为94.3%、83.6%。结论研究结果提示转录因子SCL/TAL.1参与了红系定向分化。
周睿卿
龚玉萍
郭勇
单卿卿
杨曦
关键词:
细胞分化
RNA干扰
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