河北省自然科学基金(C2007001060)
- 作品数：10 被引量：47H指数：5
- 相关作者：郭建文左连富刘亮刘江惠王静更多>>
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- 三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2基因在食管癌中的表达及意义被引量：8
- 2008年
- 目的探讨三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2(ATP-binding cassette transporer G2,ABCG2)基因在食管癌组织中的表达及其意义。方法采用RT-PCR方法检测44例原发性食管癌患者的癌组织、癌旁组织(距离癌2cm)及食管切缘正常黏膜(距离癌5cm以上)ABCG2的mRNA表达。结果ABCG2在食管癌原发灶组织中有较高程度的表达,其表达量为0.77±0.11,而正常食管黏膜中的表达量为0.66±0.12;其在食管癌中的表达显著高于正常黏膜(P<0.01)。ABCG2在低分化鳞癌中的表达显著高于中-高分化鳞癌(P<0.05)。食管癌中ABCG2在年龄和性别间表达无显著性差异(P>0.05)。结论ABCG2在食管癌组织中高表达可能在某种程度上参与了食管癌原发性耐药及化疗中多药耐药的形成。其可作为一种新的引起多药耐药的分子,指导临床上食管癌的化疗。
- 刘亮赵丽刘江惠郭建文王静左连富
- 关键词：食管癌三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2多药耐药
- 食管癌耐药皮下移植瘤裸鼠模型的建立
- 2012年
- 目的建立食管癌耐药裸鼠模型及探讨食管癌耐药机制。方法 4周龄的BALB/c nu/nu裸小鼠36只,随机分为6组,左前肢肩胛下皮下分别接种食管癌细胞Eca109及食管癌耐药细胞Eca109/ABCG2,建立裸鼠皮下移植瘤模型。成瘤后腹腔注射阿霉素(ADM)1、4 mg/kg。RT-PCR方法检测移植瘤细胞中三磷酸腺苷结合转运蛋白G2(ABCG2)mRNA表达,流式细胞术检测移植瘤细胞中ABCG2蛋白、凋亡及细胞中ADM含量。结果成功建立裸鼠食管癌耐药细胞移植瘤模型,皮下接种细胞1周后成瘤,成瘤率100%。注射ADM,接种Eca109/ABCG2细胞的裸鼠皮下移植瘤体积、质量和ABCG2表达量显著高于接种Eca109细胞移植瘤(P<0.05),但细胞凋亡率及细胞内ADM含量显著降低(P<0.05)。结论接种Eca109/ABCG2细胞的裸鼠皮下移植瘤模型是具有ABCG2耐药表型的食管癌耐药动物模型。
- 刘亮左静左连富郭建文李金丫
- 关键词：食管鳞状细胞癌流式细胞术多药耐药三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2
- 青蒿琥酯逆转裸鼠种植食管癌耐药作用研究被引量：3
- 2011年
- 目的探讨三磷酸腺苷结合转运蛋白G2(ABCG2)与食管癌多药耐药的关系以及青蒿琥酯(Art)逆转食管癌多药耐药的作用机制。方法将食管癌多药耐药细胞Eca109/ABCG2接种于裸鼠皮下,建立荷瘤裸鼠动物模型。裸鼠皮下成瘤后用药,经腹腔给予Art和(或)阿霉素(ADM),分为Art高、低剂量组(50、25mg/kg Art),ADM组(1mg/kg ADM)和ADM+Art高、低剂量组(1mg/kg ADM+50、25mg/kg Art),对照组给予生理盐水。停药后第2天处死裸鼠,剥离瘤结节,网搓法制备单细胞悬液。采用流式细胞术检测皮下种植瘤细胞凋亡率,细胞ABCG2蛋白表达及细胞内ADM含量。结果成功建立Eca109/ABCG2种植瘤裸鼠模型,1周内成瘤率为100%。与对照组比较,ADM+Art高、低剂量组皮下种植瘤细胞凋亡率显著增加(P<0.05),细胞中ABCG2蛋白表达量显著降低(P<0.05),ADM含量显著增加(P<0.05)。结论 ABCG2参与了食管癌多药耐药的形成,Art可通过降低食管癌细胞中ABCG2的表达从而逆转食管癌耐药作用。
- 刘亮左连富李金丫郭建文王静
- 关键词：青蒿素类三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2
- 青蒿琥酯逆转Eca109/ABCG2细胞对阿霉素耐药的作用及机制被引量：8
- 2011年
- 目的研究青蒿琥酯(Art)逆转食管癌耐药细胞Eca109/ABCG2对阿霉素(ADM)耐药的作用及其机制。方法采用不同浓度的青蒿琥酯(Art,0、0.01、0.1、1μmol/L),阿霉素(ADM,0、0.02、0.2、2、20mg/L),Art(0.01、0.1、1μmol/L)+ADM(0.02、0.2、2、20mg/L)处理Eca109/ABCG2细胞48h,然后以MTT法检测细胞生长抑制率。采用ADM(0、0.02、0.2、2mg/L),Art(0、0.01、0.1、1μmol/L)和ADM(0.2mg/L)+Art(0.01、0.1、1μmol/L)处理细胞,48h后以流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率及细胞内ADM含量,72h后检测细胞内ABCG2蛋白的表达。结果与单独应用Art或ADM相比,Art+ADM处理后,Eca109/ABCG2细胞的生长抑制率、凋亡率和细胞内ADM含量均显著增加(P<0.05),而细胞内ABCG2蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论 Art可通过下调Eca109/ABCG2细胞ABCG2蛋白表达,增加细胞内ADM的药物浓度,从而增强疗效、逆转耐药。
- 刘亮左静郭建文左连富
- 关键词：三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2
- 阿霉素诱导食管癌耐药细胞中ABCG2的表达及其意义被引量：4
- 2010年
- 目的研究阿霉素(ADM)药物诱导食管癌细胞(Eca109)产生耐药细胞株(Eca109/ADM)中ATP结合转运蛋白G超家族成员2(ABCG2)的表达及其意义。方法通过逐步增加培养液中阿霉素的浓度,长期筛选培养,建立食管癌耐药细胞株Eca109/ADM。逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测耐药细胞中ABCG2mRNA的表达量,流式细胞术(FCM)和蛋白印迹(Westernblot)方法检测耐药细胞中ABCG2蛋白的表达量及细胞定位。FCM方法检测Eca109/ADM细胞药物外排作用,MTT方法检测Eca109/ADM细胞对阿霉素的耐药系数。结果Eca109/ADM细胞与Eca109细胞相比,ABCG2表达显著性增高(P<0.05)。Eca109/ADM细胞药物外排作用较Eca109细胞增加,Eca109/ADM细胞对阿霉素的耐药系数为3.29。结论成功建立耐药细胞株Eca109/ADM。Eca109/ADM细胞是一个理想的耐药细胞模型。Eca109/ADM细胞中ABCG2的表达量增高,提示ABCG2参与食管癌细胞耐药的形成。
- 刘亮左静赵丽王静郭建文刘江惠左连富
- 关键词：阿霉素食管癌
- 青蒿琥酯与阿霉素联用对人食管癌细胞生长及凋亡的影响被引量：4
- 2009年
- 目的探讨青蒿琥酯(AS)与阿霉素(ADM)联合应用对人食管癌细胞Ec9706生长及凋亡的影响,并探讨其机制。方法应用流式细胞仪检测AS与ADM联合应用前后人食管癌细胞Ec9706凋亡率及细胞内ADM的含量;应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测AS作用前后细胞三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2(ABCG2)mRNA的表达。结果ADM单独作用24h后,Ec9706细胞的凋亡率同对照组比较显著性增高(P<0.05)。AS与不同浓度的ADM联合作用后,Ec9706细胞的凋亡率及细胞内ADM的含量同单独应用ADM组比较显著增高(P<0.01)。RT-PCR检测发现AS作用24h后Ec9706细胞ABCG2mRNA表达显著降低(P<0.05)。结论ADM对人食管癌细胞Ec9706具有生长抑制和诱导凋亡的作用,AS可以使其作用明显增强,其发生机制可能是通过AS下调ABCG2mRNA表达,增加细胞内ADM的含量而实现的。
- 刘亮赵丽郭建文刘江惠王静左连富
- 关键词：青蒿琥酯三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2阿霉素流式细胞术
- 青蒿琥酯逆转食管癌Eca109/ADM细胞对多柔比星的耐药被引量：6
- 2011年
- 目的:研究青蒿琥酯(artesunate,Art)逆转食管癌细胞Eca109/ADM对多柔比星(doxorubicin,ADM)的耐药作用及其机制。方法:实验分为生理盐水(normal saline,NS)对照组(NS组)、Art组(0.1μmol/L)、ADM组(0.2μg/ml)和Art+ADM联合组。Art、ADM、Art+ADM作用Eca109/ADM细胞48 h后,流式细胞术检测细胞凋亡率、细胞内ADM的含量及细胞中三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2(ATP-binding cassette transporter G2,ABCG2)蛋白的表达量,Western blotting检测细胞中ABCG2蛋白表达水平。结果:Art+ADM作用Eca109/ADM细胞48 h后,细胞的凋亡率[(12.89±0.87)%]显著高于Art组[(1.58±0.12)%]、ADM组[(6.55±0.90)%]及NS组[(1.44±0.10)%](P<0.05),Art可提高Eca109/ADM细胞对ADM的敏感性。流式细胞术检测结果显示,Art+ADM组Eca109/ADM细胞中ABCG2蛋白表达量(644.60±3.21)显著低于ADM组(659.15±4.59)及NS组(658.14±6.88)(P<0.05),但与Art组(644.31±3.96)相比无显著差异(P>0.05)。Western blotting检测结果与流式细胞术结果一致,Art组Eca109/ADM细胞中ABCG2蛋白的表达水平为(0.70±0.02),与对照组的(0.80±0.03)相比显著降低(P<0.05),Art+ADM组的ABCG2蛋白(0.71±0.04)与单独应用ADM组的ABCG2蛋白(0.81±0.05)相比,ABCG2蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。Art+ADM组Eca109/ADM细胞内ADM的含量(848.02±5.04)显著高于单独应用Art组(763.29±4.02)、ADM组(800.25±3.84)及NS组(763.88±2.03)(P<0.01)。结论:Art可以降低食管癌Eca109/ADM细胞内ABCG2蛋白表达,增加ADM的含量,逆转肿瘤细胞对ADM的耐药。
- 刘亮左静李金丫郭建文左连富王静刘江惠
- 关键词：青蒿琥酯多柔比星耐药逆转
- ABCG2食管癌耐药细胞系Eca109/ABCG2的建立被引量：8
- 2010年
- 目的探讨腺苷三磷酸结合转运蛋白G超家族成员2(ABCG2)在介导食管癌多药耐药中的作用。方法扩增ABCG2基因,与pcDNA3.1载体连接,构建pcDNA3.1-ABCG2重组质粒,转染Eca109细胞后用G418筛选稳定转染细胞。采用流式细胞术检测细胞内阿霉素的含量,评价细胞对药物的外排作用。MTT法检测阿霉素对Eca109/ABCG2、Eca109/pcDNA3.1、Eca109细胞生长的抑制作用,并计算半数抑制浓度(IC50)和细胞的耐药指数。采用Western blotting和RT-PCR法检测细胞中ABCG2蛋白及mRNA的表达量。结果成功建立转染ABCG2基因的Eca109/ABCG2细胞。Eca109/ABCG2细胞中ABCG2的mRNA和蛋白表达量升高。阿霉素对Eca109/ABCG2、Eca109/pcDNA3.1、Eca109细胞的IC50值分别为18.61±3.94、4.18±0.14、4.69±0.88μg/ml。Eca109/AB-CG2细胞对阿霉素的耐药指数为3.97,且外排阿霉素的作用增强。结论Eca109/ABCG2细胞具有ABCG2的耐药表型,能够稳定表达ABCG2蛋白,可作为研究ABCG2介导的多药耐药相关机制的细胞模型。
- 刘亮左静赵丽王静郭建文刘江惠左连富
- 关键词：三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2多药耐药相关蛋白质类食管肿瘤
- 胃癌中E-cadherin、MMP-2的表达及侵袭转移机制被引量：12
- 2011年
- 目的通过检测E-cadherin和MMP-2蛋白在胃癌中的表达,探讨它们在肿瘤转移和侵袭过程中的作用。方法取胃癌组织50例,正常胃黏膜10例;应用SP法免疫组化检测E-cadherin、MMP-2蛋白的表达。结果 (1)胃癌组织中E-cadherin蛋白的阳性表达率为46%(23/50),明显低于正常黏膜100%(10/10,P<0.001)。转移组阳性表达率为35.29%(12/34)明显低于非转移组68.75%(11/16),差异有显著性(P<0.05)。与临床分期、浸润分级的关系显示,Ⅲ-Ⅳ期和T3-T4级癌组织中E-cadherin蛋白表达分别明显低于Ⅰ-Ⅱ期和T1-T2级(P<0.05)。E-cadherin表达还与组织学分级相关:胃癌分化程度低则阳性表达率也低;分化程度高则阳性表达率也高,差异有显著性(P<0.05)。(2)MMP-2在胃癌组织中阳性表达率为74%(37/50),而正常胃黏膜上皮细胞中几乎无棕染颗粒,其差异有显著性(P<0.05)。转移组MMP-2阳性表达率(82.35%)明显高于非转移组(56.25%,P<0.05)。MMP-2的表达与组织学分级明显相关:随着胃癌分化程度降低,MMP-2阳性表达率升高(P<0.05);Ⅲ-Ⅳ期胃癌表达明显高于Ⅰ-Ⅱ期(P<0.05);T3-T4级MMP-2阳性表达率高于T1-T2级(P<0.001)。(3)MMP-2与E-cadherin表达之间呈高度负相关(相关系数r=-0.368,P<0.009)。结论 MMP-2在胃癌中均呈高表达,而E-cadherin则反之。E-cadherin蛋白表达减弱与胃癌侵袭转移潜能相关,可作为胃癌侵袭转移的生物学标志之一。
- 刘江惠姜忠彩郭建文左连富
- 关键词：胃肿瘤MMP-2E-钙黏蛋白免疫组织化学
- ABCB1、ABCG2与食管癌患者多药耐药的关系被引量：5
- 2011年
- 目的探讨多药耐药蛋白三磷酸腺苷结合转运蛋白G2(ABCG2)蛋白和三磷酸腺苷结合转运蛋白B1(ABCB1)在食管癌组织中的表达及其意义。方法选用80例食管癌患者手术切除标本,采用流式细胞术(FCM)方法检测80例原发性食管癌患者的癌组织、癌旁组织(距离癌2 cm)及食管切缘正常黏膜(距离癌5 cm以上)ABCG2及ABCB1蛋白的表达量。结果 ABCG2及ABCB1蛋白在食管癌组织中有较高程度的表达,表达量分别为(467.30±37.85)、(444.79±22.83),而正常食管黏膜中表达量分别为(418.41±21.70)、(401.35±16.09);其在食管癌中的表达显著高于正常黏膜(P<0.01)。ABCG2蛋白及ABCB1蛋白在低分化鳞癌中的表达量显著高于中高分化鳞癌(P<0.05),在侵及纤维膜的癌组织中表达显著高于未侵及纤维膜的癌组织(P<0.05),在有淋巴结转移的癌组织中表达显著高于无淋巴结转移癌组织(P<0.01),在年龄和性别间表达无显著性差异(P>0.05)。结论 ABCG2及ABCB1参与食管癌多药耐药的形成,对于临床上食管癌的化疗具有一定的指导意义。
- 刘亮左静赵丽左连富郭建文王静刘江惠
- 关键词：食管癌多药耐药流式细胞术
