艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项(2008ZX10004-002)
- 作品数：23 被引量：91H指数：6
- 相关作者：张建中闫笑梅何利华陶晓霞刘国栋更多>>
- 相关机构：中国疾病预防控制中心传染病预防控制所中国疾病预防控制中心安徽理工大学更多>>
- 发文基金：艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 空肠弯曲菌CadF蛋白的原核表达与产物分析被引量：1
- 2010年
- 目的构建空肠弯曲菌cadF基因重组表达质粒pET30a(+)-cadF,分析其在大肠埃希菌中的表达情况及其融合蛋白的抗原性。方法用PCR方法扩增cadF基因,构建重组克隆质粒和表达质粒,经菌落PCR、双酶切和测序鉴定后在E.coli(DE3)原核表达系统中诱导表达,SDS-PAGE和飞行时间质谱鉴定表达蛋白,Western blot分析其抗原性。结果含重组表达载体pET-30a(+)-cadF中的cadF基因序列经测序证实与出发菌株cadF基因序列100%同源,并成功诱导表达CadF蛋白,Westernblot显示该CadF融合蛋白能被抗空肠弯曲菌多克隆兔血清识别。结论成功构建了空肠弯曲菌cadF基因重组表达载体,表达产物具有抗原性。
- 周益装张茂俊肖迪孟凡亮张建中
- 关键词：空肠弯曲菌原核表达抗原性
- A组链球菌检测方法研究进展被引量：6
- 2010年
- A组链球菌(GAS)常可引起多种感染,GAS可以说是目前为止能引起人类疾病种类最多的一种病原菌,也是一类最为常见的呼吸道致病菌。GAS感染的检测对于临床上早期诊断与治疗预防猩红热、风湿热、急性肾小球肾炎等的发生具有重要意义。本文对GAS常规检测方法和核酸分子检测方法进行了综述。
- 杨志光尤元海张建中
- 关键词：A组链球菌免疫学检测
- BIOMIC药敏分析系统对最小抑菌浓度判读能力的评价
- 2009年
- 目的评价BIOMIC药敏分析系统对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant S.aureus,MRSA)最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)的判读能力。方法用纸片扩散法检测50株MRSA对10种抗生素的敏感性,用BIOMIC药敏分析系统进行结果判读,与Etest结果进行比较,WHONET5.4为分析软件。用BIOMIC推算的MIC值与Etest测得值的比值(BIOMIC MIC/Etest MIC)进一步比较两种方法测得的MIC一致性。结果两种方法测得庆大霉素结果(S、I、R)的一致率为98.00%,次要误差率为2.00%,其余抗生素结果(S、I、R)的一致率为100%。BIOMIC MIC/Etest MIC比值分析结果为,MIC总一致率为83.92%。结论BIOMIC分析系统和Etest方法对于检测MRSA具有较好一致性,尤其是药物敏感菌株,可以用于临床检测或耐药监测的初步判定。
- 闫笑梅何利华陶小霞张慧芳张建中
- 关键词：微生物敏感性试验金黄色葡萄球菌最小抑菌浓度
- 基于TPI基因的城市污水中蓝氏贾第鞭毛虫的分子鉴定被引量：1
- 2012年
- 目的对哈尔滨市污水处理厂原水中的蓝氏贾第鞭毛虫进行分子鉴定。方法收集哈尔滨市污水处理厂原水样,提取基因组DNA,巢式PCR扩增蓝氏贾第鞭毛虫TPI基因,通过序列分析确定蓝氏贾第鞭毛虫的集聚体类型和亚型,并进行同源性分析。结果从哈尔滨市污水处理厂原水DNA提取物中扩增出蓝氏贾第鞭毛虫TPI基因,经分子鉴定为蓝氏贾第鞭毛虫集聚体AII,其序列与文献报道人源蓝氏贾第鞭毛虫集聚体AII序列(AB516351,FJ560570,EF688021)的同源性为100%。结论哈尔滨市污水处理厂原水中存在蓝氏贾第鞭毛虫集聚体AII,威胁当地居民健康。
- 张唯哲凌虹张晓丽李懿宏姬红杨凤坤沈玉娟刘爱芹
- 关键词：蓝氏贾第鞭毛虫污水分子鉴定
- 溶藻弧菌TaqMan实时PCR快速检测体系的建立被引量：4
- 2011年
- 目的:建立溶藻弧菌TaqMan实时PCR快速检测体系。方法:根据溶藻弧菌胶原酶基因colH的保守序列设计一对引物和一条TaqMan探针,优化反应体系中的引物浓度和探针浓度,评价此反应体系的特异度,并确定其检测下限。结果:优化的反应体系中,引物浓度为200 nmol/L,探针浓度为200 nmol/L,检测下限为1.0×102拷贝/μl,较普通PCR提高了100倍。特异度为100%。结论:本研究所建立的检测体系能够灵敏和特异地检测溶藻弧菌,可以作为溶藻弧菌的快速检测方法。
- 王海波张京云王多春阚飙
- 关键词：溶藻弧菌
- 肠道病毒71型抵抗I型干扰素诱导的抗病毒作用被引量：6
- 2012年
- 目的研究肠道病毒71型（EV71）抵抗I型干扰素（interferon，IFN）诱导的抗病毒作用。方法将1000U／ml的I型干扰素（α，β）加入HeLa细胞后，去除上清中的干扰素，感染带有GFP的重组单纯疱疹病毒（HSV-1）和EV71，观察GFP的表达和PCR检测HSV-1核酸，判断I型干扰素对HSV，1的作用。通过RT—PCR方法检测EV712A基因的表达从而判断EV71病毒的复制能力。结果I型干扰素（α，β）诱导HeLa细胞产生抗病毒蛋白而有效地抑制重组HSV-1GFP的表达和核酸扩增。而EV712A的RT—PCR结果证实EV71可在I型干扰素（α，β）作用后的HeLa细胞中有效增殖。结论I型干扰素（α，β）诱导产生抗病毒蛋白；EV71可在I型干扰素（α，β）诱导产生抗病毒蛋白的HeLa细胞中有效增殖。
- 崔雨宋娟宋芹芹孙鹏甘星李公启王克霞韩俊
- 关键词：肠道病毒属干扰素I型
- bla_(OXA-51-like)碳青霉烯酶基因PCR扩增用于鲍曼不动杆菌检测的可行性评价被引量：2
- 2009年
- 目的分析blaOXA-51-like碳青霉烯酶基因PCR扩增用于鲍曼不动杆菌检测和鉴定的可行性。方法PCR扩增105株不动杆菌的blaOXA-51-like碳青霉烯酶基因,并对检测的特异性进行评估。结果PCR检测82株鲍曼不动杆菌blaOXA-51-like碳青霉烯酶基因均阳性,但其中1株PCR产物比预期大(1 664 bp);测序发现blaOXA-51-like碳青霉烯酶基因中包含一段1 308 bp的插入序列。不动杆菌属其他菌株blaOXA-51-like碳青霉烯酶基因PCR检测均阴性。若以353 bp扩增带作为blaOXA-51-like碳青霉烯酶基因PCR阳性标准,检测的敏感度和特异度分别为98.9%和100%;若以出现PCR扩增条带为阳性标准,则检测的敏感度和特异度均为100%。结论blaOXA-51-like碳青霉烯酶基因PCR扩增用于检测鲍曼不动杆菌特异性较高,但如果仅从扩增片段长度判断,存在出现假阴性的可能。
- 胡源何利华张建中
- 关键词：鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶
- 脲原体耐药机制研究进展被引量：3
- 2010年
- 脲原体（包括微小脲原体和解脲脲原体）是引起人类非淋球菌性泌尿生殖道感染的主要病原体之一.四环素类、大环内酯类及喹诺酮类抗生素是治疗脲原体感染的主要药物.随着脲原体对抗生素的耐药情况日趋严重,其耐药机制研究逐渐受到重视.一般认为tetM转座子或整合子介导的核糖体保护作用是脲原体对四环素类耐药的主要机制.23S rRNA操纵子及核糖体相关的L4或L22蛋白的基因突变,可能是脲原体对大环内酯类耐药的原因.对喹诺酮类的主要耐药机制与编码DNA促旋酶和拓扑异构酶Ⅳ亚单位的基因突变有关.
- 黄亚郭晓奎李擎天
- 关键词：四环素类大环内酯类喹诺酮类
- 链球菌属纤连蛋白结合蛋白的生物信息学分析被引量：2
- 2011年
- 对链球菌属纤连蛋白结合蛋白进行系统的分析,找出其特征,为以后的研究奠定基础。通过MUSCLE、BLASTP、PSI-BLAST、PHYLIP、Perl编程等生物信息学方法对217条候选纤连蛋白结合蛋白进行研究。发现共有31个序列纤连蛋白结合蛋白重复单元序列模体,绝大部分蛋白由两个或两个以上的不同模体序列构成,其保守结构域组合呈现多样性等特征。表明链球菌属纤连蛋白结合蛋白重复单元序列模体不是严格统一的,总体上具有变异性,但模体之间又有很大的相似性。
- 周益装尤元海张建中
- 关键词：生物信息学链球菌属
- 狂犬病毒中和抗体检测快速荧光灶抑制试验的建立被引量：10
- 2010年
- 目的建立检测狂犬病毒中和抗体的快速荧光灶抑制试验（RFFIT），检测狂犬病毒中和抗体滴度。方法以狂犬病标准毒株CVS-11为标准攻击毒，制备三代病毒，建立CVS—11病毒库；以国际标准抗狂犬病毒血清为对照血清，参考法国巴斯德研究所的RFFIT操作标准，建立适应于中国狂犬病毒中和抗体检测的RFFIT方法，并验证该方法的特异性、稳定性和重复性。结果成功建立了检测狂犬病毒中和抗体的RFFIT试验，验证该试验方法的特异性为100％；重复性试验表明，在本实验室和不同实验室的检测结果P值均〉0．5，具有很好的重复性。结论RFFIT方法的建立进一步完善了中国狂犬病的实验室检测技术，也将提升中国狂犬病的整体监测能力。
- 于鹏程吕新军申辛欣曹蕾郑新雄单虎唐青
- 关键词：狂犬病毒中和抗体滴度
