国家自然科学基金(30770471)
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
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- 相关领域：生物学更多>>
- 基于GST-pull down的小G蛋白Rac1活性检测体系的建立被引量：1
- 2011年
- 目的:根据人PAK1基因的p21结合结构域(PBD)能够特异结合GTP-Rac1的特性,构建GST-PBD原核表达质粒,并利用GST-pull down方法检测真核细胞内小G蛋白Rac1的活性。方法:将人PAK1基因的PBD结构域克隆到pGEX原核表达载体上,经诱导纯化得到GST-PBD融合蛋白,并通过GST-pull down实验评估该方法的特异性和准确性。结果:pGEX-PBD质粒构建成功;纯化得到的GST-PBD融合蛋白能够特异性地与激活形式的Rac1(GTP-Rac1)结合,并且能够准确反映血小板衍生生长因子刺激下细胞内Rac1的激活过程。结论:GST-PBD融合蛋白及其整套GST-pull down检测体系能方便有效地检测细胞内Rac1的活性。
- 甄诚陈亮柏兆方王芊艺满江红
- 关键词：RAC1小G蛋白
- CUEDC1的克隆表达及其对PRB和ERα转录活性的影响被引量：3
- 2009年
- 为了研究CUEDomain Containing1(CUEDC1)蛋白质功能,构建了pcDNA3.0-Flag-CUEDC1表达载体,并且成功表达Flag-CUEDC1蛋白质。通过双荧光报告系统,对比CUEDC1与CUEDC2对PRB和ERα转录活性的影响。其结果显示,CUEDC2能够抑制PRB和ERα转录活性,而CUEDC1对PRB和ERα转录活性的影响不显著。
- 穆蕊赵洁陈媛张佩景李慧艳周涛张学敏李爱玲
- 关键词：CUEDC2转录活性
