广西壮族自治区科学研究与技术开发计划(0626001-3-1)
- 作品数：5 被引量：9H指数：2
- 相关作者：张明卢克焕陆阳清卢晟盛付强更多>>
- 相关机构：广西大学广西亚热带生物资源保护利用重点实验室更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区科学研究与技术开发计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 应用荧光原位杂交技术进行哺乳动物性别鉴定的研究进展被引量：1
- 2008年
- 荧光原位杂交(FISH)技术应用于哺乳动物性别鉴定,近年来取得了长足进展。本文阐述了荧光原位杂交技术的原理及其在胚胎性别鉴定方面和精细胞筛选鉴定方面较PCR法和LAMP法所具有的优势,并着重概述了该技术在人类医学和家畜性别鉴定方面的研究进展和应用前景。
- 庄新杰陆阳清张明卢克焕
- 关键词：哺乳动物性别鉴定荧光原位杂交
- 水牛输卵管上皮细胞无血清培养的研究
- 2008年
- 以广西沼泽型水牛(Bubalus bubalis)输卵管为材料,比较研究不同取材方法、有无血清及生长因子对水牛输卵管上皮细胞培养的影响。试验采用了三种不同的取材方法。原代用含血清的培养液来培养,传代用添加生长因子的无血清复杂培养液和不添加生长因子的无血清基础培养液结合梯度减量无血清培养法和直接无血清培养法来培养并进行观察。结果表明,水牛输卵管上皮细胞可以在添加生长因子的无血清复杂培养液中生长、并且最长可维持56 d优于基础无血清培养的15 d;刮取法获得的细胞活率为95%优于消化法的70%和剪碎法的83%;细胞冷冻复苏率为83.6%;第5代的染色体数目为48条,这说明细胞依然保持正常的生物学特性和二倍体核型。
- 庄新杰戢开丽孙雷段亚苹陆阳清张明卢克焕
- 关键词：水牛输卵管上皮细胞无血清培养核型
- 水牛胚胎性别鉴定的PCR方法被引量：4
- 2008年
- 根据荷斯坦牛SRY基因设计1对引物扩增得到水牛SRY基因的全长序列2005 bp,对该片段测序后,设计2对特异于水牛SRY基因核心区的引物用于早期胚胎性别鉴定,同时根据水牛G3PDH基因设计2对引物作为内对照共同扩增,建立了多重巢式PCR体系并进行优化,使用优化后的PCR体系对取样后的27枚IVF胚胎和24枚Y精子受精胚胎进行检测,并使用斑点杂交检测扩增准确率。结果表明,27枚IVF胚胎均能有效扩增,雄性、雌性比例分别为51.9%(14/27)、48.1%(13/27),斑点杂交表明扩增准确率为100%;24枚Y精子受精胚胎的雄性比例为83.3%(20/24)。该巢式多重PCR方法具有很高灵敏度和稳定性,能够在实际生产中应用。
- 付强张明郑海英秦文松陆阳清卢晟盛卢克焕
- 关键词：SRY基因胚胎PCR性别鉴定
- 家畜胚胎性别鉴定技术的研究进展被引量：1
- 2006年
- 性别控制是按照人们的意愿生产特定性别后代的动物繁殖新技术。早期胚胎性别鉴定是人们实现性别控制的重要途径。随着科学技术的发展和各种新的研究工具在性别鉴定中的应用,尤其是聚合酶链式反应(PCR)技术的应用,性别鉴定在生产实践中的应用越来越广泛。本文综述了胚胎性别鉴定方法的基本原理和研究概况,并阐述了该技术存在的问题和发展前景。
- 付强张明卢克焕
- 关键词：性别鉴定胚胎SRY基因
- 水牛促卵泡素受体(FSHR)基因5′端侧翼序列的克隆与分析被引量：3
- 2006年
- 促卵泡素(FSH)是动物脑垂体分泌作用于卵巢卵泡生长、发育、分化、成熟和排卵的重要繁殖激素。由于是生物大分子,不能透过细胞膜,FSH必须与靶细胞膜上的促卵泡素受体(FSHR)结合,经过受体介导将信息传递到靶细胞内,才能发挥其生物学功能。目前国内外已对牛、山羊等多种动物的FSHR基因的cDNA序列进行了克隆测序,但是关于水牛FSHR基因5′端侧翼序列还未见报道。本研究对水牛FSHR基因5′端序列进行克隆和序列分析,其目的是寻找水牛FSH受体基因的SNP突变位点,从而为以后进行FSH受体基因的多态性分析和探索该受体基因在水牛繁殖中的可能作用打下基础。由水牛血液中提取DNA,与根据牛FSH受体基因序列设计的特定引物进行PCR反应,以合成FSHR 5′端侧翼调控区,扩增的该片断经分离、回收和纯化后再插入到pMD18-T质粒中,筛选阳性克隆,将插入了FSHR 5′端侧翼端片断的质粒纯化后进行序列测定和分析,弄清核苷酸序列和假定的氨基酸顺序并通过GeneBank进行同源性分析。结果表明,PCR扩增获得的片段为939 bp,与中国西门塔尔牛该段序列相比,同源性为97.44%,在-720 bp处的1个碱基缺失;与山羊的FSHR基因比较,同源性为94.78%,在-625^-619 bp处有7个碱基的插入;在此激素反应元件3′端一段序列(-530^-526 bp)水牛和山羊的相同均为TGACC,而西门塔尔牛为CGACC,但三者5′端一段序列(-679^-675 bp)没有突变并且相同,均为GGTCA;与人和大鼠FSHR基因不同的是,在牛、水牛和羊的FSHR基因启动子区检索出了TATA盒基元和多个类CAAT盒序列,且在水牛、山羊和牛之间没有碱基差异。因此,对水牛FSHR基因转录启动和表达调控值得进一步研究。
- 牛金涛陆阳清任子利卢晟盛卢克焕张明
- 关键词：克隆测序水牛
- FISH技术在牛性控分离精子比率鉴定中的应用研究
- 本试验借助显微操作仪分离牛的X和Y染色体,经DOP-PCR(degenerate oligonu-cleotide primet-PCR)扩增后用Biotin-11-dUTP和CY3-dUTP分别标记以制备牛性染色体荧光...
- 庄新杰陆阳清孙雷许凯张明卢克焕
- 关键词：分离精子探针荧光原位杂交
- 文献传递
