上海市卫生局青年科研基金(2008Y085)
- 作品数：6 被引量：49H指数：6
- 相关作者：傅志仁刘芳宋少华郭闻渊王正昕更多>>
- 相关机构：第二军医大学更多>>
- 发文基金：上海市卫生局青年科研基金国家自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 丹参多酚酸盐对小鼠肝脏缺血再灌注后肺损伤的保护作用被引量：9
- 2011年
- 目的研究丹参多酚酸盐对小鼠肝脏缺血再灌注后肺损伤的保护作用及其机制。方法 24只C57BL/6小鼠随机分为假手术组、对照组和丹参多酚酸盐组,每组8只。假手术组小鼠仅接受麻醉、开腹及关腹操作;丹参多酚酸盐组及对照组小鼠建立肝脏90min缺血再灌注模型,缺血前丹参多酚酸盐组小鼠经尾静脉注射丹参多酚酸盐60mg/kg,对照组小鼠经尾静脉注射等量生理盐水。再灌注4h后,检测各组小鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)水平及肝、肺组织形态学变化,测定肺组织湿/干重比,酶联免疫吸附试验(ELISA)及荧光定量PCR检测肺泡灌洗液及肺组织内肿瘤坏死因子(TNF-)α、白细胞介素(IL-)6、IL-1β、IL-10表达水平,蛋白印迹法检测肺组织内核因子(NF-)κB亚单位P65磷酸化水平。结果假手术组无明显病理性变化。与对照组比较,丹参多酚酸盐组小鼠血清ALT、AST水平明显降低(P<0.01),肝脏、肺脏损伤明显改善(P<0.05),肺组织湿/干重比明显降低(P<0.05),肺泡灌洗液及肺组织内TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-10的表达明显降低(P<0.05或P<0.01),转录因子NF-κB活化程度明显减弱。结论丹参多酚酸盐能够减轻小鼠肝缺血再灌注后肺损伤,其机制可能与抑制肺组织内炎症介质释放及炎症信号通路活化有关。
- 滕飞傅志仁孙克彦郭闻渊刘芳王正昕丁国善
- 关键词：丹参多酚酸盐肝脏再灌注呼吸窘迫综合征
- 丹参多酚酸盐抑制库普弗细胞活化减轻肝脏再灌注损伤被引量：10
- 2010年
- 目的研究丹参多酚酸盐(SV)对肝脏缺血再灌注(IR)损伤的保护作用及其机制。方法选择健康、雄性的C57BL/6小鼠24只,随机分为假手术组、0.9%氯化钠溶液(NS)组和SV组,每组8只。假手术组小鼠仅接受开腹及关腹操作,NS组和SV组小鼠建立IR模型。IR术前1h,SV组小鼠经尾静脉注射SV60mg/kg,NS组小鼠注射等量NS。再灌注6h,检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)水平,并观察肝组织形态学的变化。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)及荧光定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测血清及肝组织内肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素(IL)-6的表达水平;应用免疫组织化学技术检测各组肝脏标本内库普弗细胞特异性抗原F4/80的表达情况,采用荧光定量RT-PCR检测库普弗细胞表面分子CD11bmRNA的表达水平。分离小鼠腹腔巨噬细胞,以脂多糖(LPS)作为活化剂,TNF-α作为巨噬细胞活化指标,检测体外培养体系中SV能否抑制巨噬细胞活化。结果与NS组相比,SV组再灌注6h的血清ALT、AST水平显著降低(P值均<0.01),血清TNF-α和IL-6表达水平显著降低(P值分别<0.05、0.01),肝组织内TNF-αmRNA和IL-6mRNA表达水平亦显著降低(P值均<0.05),肝组织内F4/80阳性库普弗细胞的浸润显著减少(P<0.05),肝组织内库普弗细胞表面分子CD11bmRNA的相对表达水平显著降低(P<0.05)。SV体外抑制腹腔巨噬细胞活化实验显示,SV组的上清液内TNF-α水平显著低于NS组(P<0.05)。结论 SV对肝脏IR损伤具有保护作用,其机制可能与抑制肝脏再灌注后库普弗细胞的活化有关。
- 郭闻渊滕飞宋少华刘芳王正昕丁国善傅志仁
- 关键词：缺血再灌注肝脏丹参多酚酸盐库普弗细胞
- 落新妇苷对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用被引量：13
- 2009年
- 目的:探讨落新妇苷对大鼠肾脏缺血再灌注(ischemia reperfusion,IR)损伤的保护作用。方法:将24只健康雄性SD大鼠随机分成假手术组、模型组和落新妇苷组,每组8只。模型组和落新妇苷组大鼠用于制作肾脏IR模型。自术前3d开始,落新妇苷组大鼠腹腔注射12mg/mL落新妇苷30mg/kg,1次/d;模型组大鼠腹腔注射等量生理盐水。于再灌注6h后检测各组大鼠血清尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)和肌酐(serum creatinine,SCr)水平,并观察肾组织形态学变化;半定量逆转录聚合酶链式反应及蛋白印迹法检测肾组织内单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)mRNA及蛋白表达水平;酶联免疫吸附测定法检测各组大鼠血清白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)和白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)含量。结果:再灌注6h后与模型组相比,落新妇苷组大鼠BUN和SCr水平均显著降低(P<0.01),大鼠肾小球及肾小管上皮细胞损伤明显减轻,肾组织内MCP-1mRNA(P<0.05)和蛋白表达下降,血清IL-6和IL-1β含量下降(P<0.01)。结论:落新妇苷能够有效减轻肾脏IR损伤,其保护作用可能与抑制IR后趋化因子MCP-1及细胞因子IL-6和IL-1β的产生有关。
- 宋少华沈筱芸刘芳唐乙王振猛傅志仁
- 关键词：落新妇苷再灌注损伤肾脏
- 丹参多酚酸盐通过线粒体途径诱导人肝癌SMMC-7721细胞的凋亡被引量：16
- 2010年
- 目的:研究丹参多酚酸盐(salvianolate)体外诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡作用及其可能机制。方法:不同质量浓度丹参多酚酸盐(0.5、1、2mg/ml)与肝癌细胞共培养24h后,流式细胞仪检测肝癌细胞凋亡,线粒体膜电位试剂盒(JC-1)检测线粒体膜电位变化;比色法测定1.0mg/ml丹参多酚酸盐作用后肝癌细胞内caspase-8、caspase-9及caspase-3的活性,流式细胞仪检测培养体系内加入caspase-9抑制剂(z-LEHD-fmk)或caspase-3抑制剂(z-DEVD-fmk)后细胞凋亡率的变化,Western blotting检测肝癌细胞内线粒体凋亡途径相关蛋白Bax、Bcl-2表达水平。结果:丹参多酚酸盐显著诱导肝癌细胞SMMC-7721凋亡(P<0.05),同时线粒体膜电位随着药物浓度的升高而加剧下降(P<0.05)。1.0mg/ml丹参多酚酸盐处理肝癌细胞24h后caspase-9与caspase-3的活性明显升高(P<0.05),而caspase-8的活性无明显变化(P>0.05);当培养体系内加入caspase-9或caspase-3活性抑制剂后,丹参多酚酸盐诱导肿瘤细胞凋亡的作用明显降低(P<0.05)。Western blotting检测显示,丹参多酚酸盐处理组前凋亡蛋白Bax表达明显升高,抗凋亡蛋白Bcl-2表达降低。结论:丹参多酚酸盐(0.5～2.0mg/ml)剂量具有促进肝癌细胞凋亡的作用,且有剂量依赖的趋势,其机制与线粒体凋亡途径有关。
- 宋少华郭闻渊傅志仁刘芳王正昕丁国善
- 关键词：丹参多酚酸盐肝癌细胞凋亡线粒体
- 供肝丹参多酚酸盐预处理减轻受体大鼠肝移植术后胆道损伤被引量：8
- 2010年
- 目的观察丹参多酚酸盐预处理供肝对受体大鼠肝移植术后胆道损伤的影响,探讨其可能的作用机制。方法根据供体肝脏保存方法,受体大鼠随机分为UW液组、丹参多酚酸盐预处理组(UW液+0.4 mg/ml丹参多酚酸盐)、生理盐水对照组(UW液+等量生理盐水)。大鼠行胆道持续外引流肝动脉化原位肝移植,观察移植术后1、6、24 h胆汁流量及胆汁酸盐分泌量。大鼠行肝动脉化大鼠原位肝移植,移植术后2周检测各组大鼠血清碱性磷酸酶、胆汁酸盐及总胆红素水平,观察胆道并发症发生率;采用实时荧光定量PCR、蛋白印迹法分别检测肝脏移植物内胆汁酸盐输出泵(bile salt export pump,BSEP)基因及蛋白的表达。结果与UW液组及生理盐水对照组相比,丹参多酚酸盐预处理组大鼠术后早期胆汁流量及胆汁酸盐分泌量明显增加(P<0.05);术后2周血清碱性磷酸酶、胆汁酸盐及总胆红素水平明显降低(P<0.05),胆汁淤积等胆道并发症发生率明显降低(P<0.01);肝脏移植物内BSEP mRNA及蛋白表达均升高(P<0.05)。结论UW液内加入丹参多酚酸盐保存供肝可明显减轻受体大鼠肝移植术后胆道损伤,降低术后胆道并发症的发生,可能与其促进移植肝内BSEP表达有关。
- 宋少华郭闻渊傅志仁傅宏沈筱芸刘芳王正昕丁国善
- 关键词：丹参多酚酸盐肝移植胆道损伤
- 丹参多酚酸盐负性调节小鼠骨髓来源树突状细胞成熟及其部分免疫功能被引量：8
- 2009年
- 目的:观察丹参多酚酸盐对小鼠骨髓来源树突状细胞(bone marrow-derived dendritic cells,BMDC)成熟及其部分免疫学功能的影响。方法:小鼠BMDC体外培养时加入促成熟剂脂多糖(DCLPS)或同时加入脂多糖及丹参多酚酸盐(DCSV),其中丹参多酚酸盐设3个浓度:低浓度50μg/ml(SVL)、中浓度100μg/ml(SVM)、高浓度200μg/ml(SVH)。流式细胞仪分析各组细胞表面MHC-Ⅱ分子及共刺激分子CD40、CD80、CD86的表达;FITC-Dextran内吞实验分析各组DC抗原吞噬功能;酶联免疫吸附实验(enzyme linked i mmunosorbent assay,ELISA)检测各组DC培养液上清白细胞介素(interleukin,IL)-12 p40水平。[3H]-TdR掺入法检测各组DC体外混合淋巴细胞反应(mixed lymphocyte reactions,MLR)刺激同种反应性T细胞的增殖能力;ELISA法测定MLR上清IL-10、IL-2、干扰素(interferon,IFN)-γ水平。结果:与DCLPS相比,SVL、SVM、SVH细胞表面MHC-Ⅱ分子和共刺激分子表达明显降低,分泌IL-12 p40明显减少,抗原吞噬能力明显升高,刺激同种反应性T细胞增殖的能力显著下降(P<0.05或P<0.01)。与DCLPS相比,SVL、SVM、SVH组MLR上清中IL-2、INF-γ水平明显降低(P<0.05),而IL-10水平差异无统计学意义。结论:丹参多酚酸盐(50～200μg/ml)能够抑制体外培养体系中小鼠BMDC的成熟,并对其部分免疫学功能具有一定的负性调节作用。
- 宋少华郭闻渊傅志仁傅宏沈筱芸刘芳王正昕丁国善
- 关键词：丹参多酚酸盐树突状细胞免疫功能
