江苏省卫生厅医学科技发展基金(P200950)
- 作品数：3 被引量：20H指数：2
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- 靶向SMC1A基因慢病毒介导的RNA干扰对奥沙利铂治疗敏感性的影响被引量：1
- 2012年
- 目的探讨沉默结直肠癌细胞株染色体结构维持-1A(SMC1A)基因对奥沙利铂(L-OHP)敏感性的影响。方法构建SMC1A基因的小分子RNA干扰表达质粒。与慢病毒包装质粒一起转染239T细胞制备pGCSIL-GFP/SMC1A-siRNA慢病毒载体,并将重组质粒转染结直肠癌SW480、HT-29细胞株。RT-PCR、Western blotting法检测SMC1A mRNA和蛋白的表达情况。CCK-8法检测不同浓度L-OHP对细胞的抑制作用。结果 pGCSIL-GFP/SMC1A-siRNA慢病毒载体构建成功,RT-PCR产物为343bp。RT-PCR显示重组质粒转染的SW480、HT-29细胞SMC1A mRNA表达量明显低于其对应的未转染细胞(0.13±0.02 vs.1.02±0.06,0.182±0.019 vs.1.114±0.032;P<0.05);Western blotting显示干扰后的细胞SMC1A蛋白表达受到明显抑制;不同浓度的L-OHP处理细胞48h后,CCK-8显示转染SMC1A-siRNA细胞生长抑制率较未转染细胞高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论沉默结直肠癌细胞株SMC1A基因对奥沙利铂的敏感性显著增加,为临床进一步提高结直肠癌的疗效提供了研究基础。
- 冯婉婷喻晓娟李进史玉叶曹维克邓之奎何敬东
- 关键词：RNA干扰慢病毒奥沙利铂
- 康莱特注射液联合奥沙利铂对SW480细胞株增殖和凋亡的影响被引量：17
- 2011年
- 目的:研究康莱特注射液(Kanglaite Injection)联合奥沙利铂(oxaliplatin,L-OHP)对人结直肠癌SW480细胞增殖和凋亡的影响。方法:采用CCK-8法检测康莱特、L-OHP及其联合作用对SW480细胞的增殖抑制率的影响;FCM法检测2者对SW480细胞周期及凋亡率的影响;免疫细胞化学法和蛋白质印迹法检测2者对凋亡相关蛋白Bcl-2表达的影响。结果:康莱特及L-OHP对SW480细胞增殖均有抑制作用,两药联合具有协同作用(P<0.05),细胞周期被阻滞于G2/M期(P<0.05);康莱特联合L-OHP对SW480细胞的凋亡率为(23.3±3.04)%,明显高于L-OHP单药作用的(9.00±2.14)%及康莱特单药作用的(7.50±0.85)%(P<0.05);免疫细胞化学法及蛋白质印迹法检测均显示康莱特能协同L-OHP抑制SW480细胞中Bcl-2蛋白的表达(P<0.05)。结论:康莱特可协同L-OHP抑制SW480细胞的增殖,并促进其凋亡。
- 车晓玲李进何敬东曹维克邓之奎
- 关键词：结直肠肿瘤基因,BCL-2康莱特奥沙利铂
- 奥沙利铂体外干预结直肠癌细胞株HT-29的耐药基因及相关蛋白的表达被引量：2
- 2013年
- 目的:检测结直肠癌(colorectal cancer,CRC)奥沙利铂(oxaliplatin,L-OHP)耐药细胞株HT-29/L-OHP中多药耐药基因(multidrug resistance gene 1,MDR-1)、多药耐药相关蛋白的基因及他们编码的蛋白P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)、多药耐药相关蛋白(multidrug resistance associated protein,MRP)的表达,探讨其在L-OHP耐药中的作用。方法:利用MTT法检测L-OHP对原代细胞HT-29和耐药细胞HT-29/L-OHP的半数抑制率(IC50);利用RT-PCR及蛋白质印迹法检测HT-29/L-OHP中耐药基因及蛋白的表达情况。结果:L-OHP对HT-29和HT-29/L-OHP细胞的IC50分别为(4.15±0.17)μg.ml-1和(32.01±1.87)μg.ml-1,耐药指数为7.71;与原代细胞相比,HT29/L-OHP中耐药基因及蛋白表达均有所增加。结论:结直肠癌耐药细胞株中MDR-1、MRP基因及其编码的蛋白P-gp、MRP的表达高于原代细胞,这为预测CRC的多药耐药提供了新的依据。
- 宗明珠冯婉婷李进喻晓娟刘小宁何敬东
- 关键词：奥沙利铂耐药
