国家自然科学基金(81072498)
- 作品数：3 被引量：6H指数：1
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- 识别疟色素的模式识别受体
- 2011年
- 疟色素是疟原虫消化宿主血红蛋白产生的副产物,能激发宿主的先天性炎症反应。然而对于疟色素是如何被宿主模式识别受体识别,各个研究者的实验结果和结论不尽相同。本文综述了近期该研究领域的一些进展。
- 钱锋徐沪济
- 关键词：TOLL样受体NOD样受体
- 疟疾偶联疫苗被引量：6
- 2012年
- 很多疟疾抗原在人体中是弱免疫原,化学偶联是一种提升弱免疫原免疫原性的方法,其价值已在疟疾疫苗的研究工作中得到证明。本文介绍了蛋白质偶联的一些常用化学连接剂和载体蛋白,并综述了疟疾偶联疫苗的研究进展。
- 钱锋徐沪济
- 关键词：疟疾疫苗
- 用多肽-蛋白偶联方法制备抗恶性疟原虫抗体被引量：1
- 2012年
- 目的介绍一种多肽-蛋白偶联的流程,并用多肽-蛋白偶联产物制备抗疟原虫抗体。方法用化学连接剂Sulfo-EMCS在作为载体蛋白的铜绿假单胞菌重组去毒外毒素(rEPA)上加马来酰亚胺基团,用间接Ellman反应测定载体蛋白上所加的马来酰亚胺基团数量。用马来酰亚胺修饰的载体蛋白滴定Pfs48/45-158多肽[含恶性疟原虫表面蛋白48/45(Pfs48/45)第158～173氨基酸序列,其N末端带有一个半胱氨酸残基],绘制滴定曲线并用线性回归进行曲线拟合,根据滴定曲线确定理论滴定终点,计算多肽与载体蛋白的偶联比(每摩尔载体蛋白所能结合的多肽的摩尔数)。用过量的Pfs48/45-158多肽与马来酰亚胺修饰的rEPA进行反应,规模制备Pfs48/45-158-rEPA多肽-蛋白偶联物,偶联物用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)进行鉴定。用所制备的Pfs48/45-158-rEPA偶联物免疫BALA/c小鼠,制备免疫血清。用ELISA测定免疫小鼠血清抗Pfs48/45-158多肽的抗体效价,用免疫荧光试验(IFA)测定免疫血清识别疟原虫的能力。结果通过化学连接剂在每摩尔rEPA上添加约6.94摩尔的马来酰亚胺基团。制备了偶联比约为7.33的Pfs48/45-158-rEPA多肽-蛋白偶联物。偶联物免疫小鼠激发出抗Pfs48/45-158多肽的高抗体应答,免疫血清抗Pfs48/45-158多肽的效价为12 500 ELISA单位(即吸光度A405值为1时的血清稀释度倒数),同时免疫血清可识别疟原虫。结论多肽-蛋白偶联是一种可用于制备抗疟原虫抗体的便捷方法,间接Ellman检测、滴定反应和SDS-PAGE分析构成了多肽-蛋白偶联物制备的质控方法,可更好地保证多肽-蛋白偶联物的质量和稳定性。
- 钱锋
- 关键词：多肽抗体疟疾
