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子宫内膜基质干细胞培养方法的比较研究被引量：10: 2011年; 目的通过贴壁纯化技术和磁珠分选法培养人子宫内膜基质干细胞,并对两种方法进行比较,寻求既能方便获得大量子宫内膜基质干细胞,又能减少其分化的理想分离培养方法。方法采用贴壁纯化和磁珠分选法分离培养子宫内膜基质细胞,通过倒置显微镜观察细胞的形态,免疫组化鉴定细胞的来源,流式检测CD146和CD90的表达鉴定基质干细胞。通过比较细胞的克隆形成率和CD146、CD90阳性率的差异,综合评估2种培养方法的优劣。结果倒置显微镜观察2种培养方法所得子宫内膜基质细胞均多呈梭形;波形蛋白免疫组化染色均呈阳性。流式细胞仪检测贴壁纯化培养的基质细胞中CD146、CD90阳性率为51.45%、47.24%;磁珠分选法培养体系为CD146、CD90阳性率为63.53%、77.48%。贴壁纯化和磁珠分选法培养的子宫内膜基质细胞克隆形成率分别为(1.25±0.18)%和(3.3±0.4)%。结论贴壁纯化和磁珠分选培养作为子宫内膜基质干细胞的2种培养方法,均可以获得未分化的干细胞。用磁珠分选培养干细胞的方法比较复杂,但可获得大量的干细胞。用贴壁纯化技术培养干细胞方法简单,但细胞不易贴壁,且数量较少,但也能有效分离出较纯的干细胞,保持较好的细胞活性。; 杨新园陈葳李旭; 关键词：子宫内膜基质干细胞细胞培养

子宫内膜基质干细胞的体外成骨诱导和成脂诱导分化被引量：2: 2012年; 目的探讨子宫内膜基质干细胞的多向分化潜能。方法取因子宫肌瘤行全子宫切除术患者的子宫内膜组织,磁珠分选子宫内膜基质干细胞,进行传代培养。传代细胞分别加入成骨诱导剂和成脂诱导剂培养,并通过茜素红和油红O染色对成骨细胞和脂肪细胞形态进行鉴定。结果子宫内膜基质干细胞呈成纤维细胞样贴壁生长,其经成骨、成脂诱导培养3周后形态、体积发生明显改变。茜素红染色显示细胞团中央能形成钙化结节;成脂诱导后油红O染色可见细胞质内出现橙红色脂滴。结论子宫内膜基质干细胞经体外诱导培养后可向成骨细胞和脂肪细胞分化,并具有明显的成骨和成脂细胞形态,表明子宫内膜基质干细胞具有多向分化潜能。; 杨新园李旭陈葳; 关键词：子宫内膜干细胞成骨分化成脂分化

单孔腹腔镜对卵巢成熟性囊性畸胎瘤患者临床结局的影响被引量：12: 2017年; 目的评估单孔腹腔镜对卵巢成熟性囊性畸胎瘤患者术中和术后临床结局的影响,并通过与传统腹腔镜手术相比较,探讨其临床应用价值。方法回顾性分析西安交通大学第一附属医院妇产科2010年3月至2014年5月诊断的205例卵巢成熟性囊性畸胎瘤患者的临床资料,其中83例行单孔腹腔镜术,122例行传统腹腔镜术,比较两组患者术中和术后的临床结局。结果单孔组患者术后1d出院所占比例显著高于常规组(P=0.02<0.05),两组肿瘤大小、肿瘤部位、附件手术类型、手术时间、失血量、输血需求、Hb水平、术后住院时间、术后并发症均无显著性差异(t/χ2为值0.35~1.37,均P>0.05)。单孔组在术后8h、16h和32h疼痛评分均显著低于常规组(t值分别为1.66、1.64、3.66,均P<0.05),两组患者术后术后24h、40h疼痛评分均无显著性差异(t值分别为1.30、0.88,均P>0.05)。单孔组患者术后0d、1d、2d需求额外止痛剂均显著低于常规组(χ2值分别为10.16、11.45,均P<0.05)。结论卵巢成熟性囊性畸胎瘤患者使用单孔腹腔镜术更为切实可行,可以减少术后疼痛和止痛需求。; 李小雪杨新园; 关键词：成熟性囊性畸胎瘤

Gradient decrease in telomerase and its RNA in progressive passage of human endometrial stromal stem cells: 2011年; The purpose of this study was to explore the change of telomerase in passage from human endometrial stromal stem cells isolated from human endometrium.Telomerase activity of cultured endometrial stromal cells was assessed at mRNA and protein levels using RT-PCR and immunohistochemistry technique.Telomerase mRNA and protein levels were higher at early passages,and then had a gradually decreased trend of immunoreactive intensity and gradually weakened positive cells with progressive passage in endometrial stromal stem cells.These results suggest that telomerase is contributed to the insenecence of endometrial stem cell.; Yang XinyuanWang WeiWang YuelingChen WeiLi Xu; 关键词：TELOMERASE

子宫内膜基质干细胞的分离培养研究被引量：3: 2013年; 目的:通过体外分离、培养子宫内膜基质干细胞,观察其生物学特性,探索一种简便、高效的分离培养人子宫内膜基质干细胞的方法。方法:取10例因子宫肌瘤行全子宫切除术患者的内膜组织标本,磁珠分选及克隆形成实验法分选子宫内膜基质干细胞,传代培养。流式细胞仪检测原代细胞表面标记,MTT法观察基质干细胞体外增殖情况;体外向成骨、成脂诱导分化,茜素红和油红O染色鉴定细胞分化能力,RT-PCR测定骨细胞和脂肪细胞特异性基因表达。同时检测基质干细胞表达胚胎时期标志蛋白OCT-4的情况。结果:通过该方法可获得子宫内膜基质干细胞,细胞易于贴壁,生长良好,传代稳定。细胞CD90和CD105表达阳性而CD45和CD34表达阴性。细胞周期的S期和G2-M期细胞比例高,细胞生长曲线呈"S"形。经成骨及成脂诱导后茜素红和油红O染色分别呈阳性反应,成骨及成脂标志性基因表达阳性。此外,免疫细胞化学染色显示OCT-4表达阳性。结论:子宫内膜基质干细胞具有间充质干细胞特性,来源广、易获取,可作为组织工程种子细胞来源。; 王利公杨新园王伟; 关键词：子宫内膜细胞学干细胞免疫磁化分离流式细胞术细胞培养技术

子宫内膜基质干细胞的成骨及成软骨诱导分化研究被引量：4: 2011年; 目的研究子宫内膜基质干细胞在特定培养条件下向成骨及成软骨细胞分化,探讨其作为骨组织工程的种子细胞的可行性。方法取15例因子宫肌瘤行全子宫切除术患者的内膜组织,磁珠分选法获得子宫内膜基质干细胞,用成骨诱导和成软骨诱导培养基诱导,组织化学染色检测其向成骨和成软骨细胞分化的情况。结果从人子宫内膜组织中培养出基质干细胞,能稳定增殖传代。在成骨诱导培养基诱导下子宫内膜基质干细胞茜素红染色出现钙结节;成软骨诱导培养基诱导下,阿利新兰染色呈阳性。结论从子宫内膜组织中可获得具有多向分化潜能的基质干细胞,并能在体外稳定增殖传代,经诱导后可分化为成骨细胞和成软骨细胞,有可能成为骨组织工程较理想的种子细胞之一。; 杨新园王伟陈葳李旭; 关键词：子宫内膜干细胞成骨分化成软骨分化

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国家自然科学基金(30801238)

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