国家高技术研究发展计划(2001AA249061)
- 作品数:7 被引量:76H指数:5
- 相关作者:钱传范韩丽君江树人王小如李文明更多>>
- 相关机构:中国农业大学河南农业大学军事医学科学院更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划国家科技攻关计划国家科技部农业科技成果转化资金更多>>
- 相关领域:农业科学环境科学与工程轻工技术与工程化学工程更多>>
- 酶联免疫吸附分析法测定水样中的毒死蜱被引量:11
- 2006年
- 自制了毒死蜱多克隆抗体,考察了离子强度和甲醇含量对抗原抗体竞争反应的影响,对反应体系进行了优化,最终建立了水样中毒死蜱的残留检测ELISA方法。结果表明,毒死蜱对抗体竞争性结合的I50为76.8μg/L,方法检出限为5.2μg/L。河水样品经简单前处理后分别采用ELISA和GC测定,用ELISA方法测得水样中毒死蜱的添加回收率为93.40%~102.1%,C.V为4.04%~5.18%,在水样中的最低检出浓度为0.08μg/L,检测灵敏度远高于GC,符合农药残留检测的要求。
- 韩丽君钱传范李文明江树人王小如
- 关键词:酶联免疫吸附测定法毒死蜱水样
- 酶联免疫吸附分析法测定土壤中的毒死蜱被引量:12
- 2005年
- 采用自制多克隆抗体,考察了pH值和甲醇含量对竞争反应的影响,并对反应体系进行了优化,最终建立了土壤中毒死蜱的残留检测ELISA方法.试验表明,毒死蜱对抗体竞争性结合的I50为76.8 μg/L, 方法检出限为5.2 μg/L.土壤样品经简单前处理后,分别采用ELISA和GC测定,用ELISA方法测得土壤中毒死蜱的添加回收率为80.33%~83.36%,CV为5.28%~9.83%,最低检出限为 0.005 mg/kg,与GC测定结果基本相当,符合农药残留分析的要求.
- 韩丽君钱传范李文明江树人王小如
- 关键词:酶联免疫吸附测定法毒死蜱土壤
- 酶联免疫吸附分析法测定黄瓜中的甲基对硫磷被引量:11
- 2005年
- 采用自制多克隆抗体,考察了不同离子强度和不同甲醇含量对竞争反应的影响,并对反应体系进行了优化,最终建立了黄瓜中甲基对硫磷的残留检测ELISA方法。实验表明,甲基对硫磷对抗体竞争性结合的I50为0.13mg/L,方法检出限I20为6.7μg/L。除倍硫磷与杀螟硫磷表现了一定的交叉反应外,其它结构相类似的有机磷农药均无交叉反应。黄瓜样品经简单前与处理后分别采用ELISA和GC测定,用ELISA方法测得黄瓜中甲基对硫磷的添加回收率为83.10% ̄93.46%,C.V为6.61% ̄10.36%,最低检出限为0.003mg/kg,与GC测定数据基本相符,符合农药残留分析的要求。
- 韩丽君钱传范李文明江树人王小如
- 关键词:甲基对硫磷黄瓜农药残留分析最低检出限杀螟硫磷倍硫磷
- 硫代硫酸钠在四甲基联苯胺贮液保存中的应用被引量:5
- 2006年
- 为解决试剂四甲基联苯胺(TMB)贮液在储藏时容易变色的问题,本研究改良了TMB贮液的配方,即在原有每毫升TMB贮液中加入3μL 2mg/mL的抗氧化剂五水硫代硫酸钠(Na2S2O3·5H2O)溶液。试验结果表明,新配方TMB贮液至少能在4℃下贮存3个月不变色且不影响显色效果。同时,对照原有配方中已经变色的TMB贮液,发现根据变色深浅,每毫升中加入2~6μL 2mg/mL Na2S2O3·5H2O溶液,3~6h后会变回无色,颜色消失的TMB贮液可重新利用而不影响显色效果。
- 俞彩霞赵静王保民李刚何素平刘威李召虎何钟佩
- 关键词:ELISA硫代硫酸钠
- 棉花黄萎菌落叶型菌系毒素纯化及抗血清制备被引量:5
- 2004年
- 用SephacrylS 200HR层析柱纯化了V991菌系毒素,经叶片针刺涂抹方法确认其致萎功能后,免疫大白兔制备了抗血清。用间接ELISA方法对强、中、弱3种不同致病力共10个菌株的培养液进行了特异性检测,结果表明:抗血清具备一定生理型特异性,能够准确检出全部强致病力落叶型菌系,可作为不同生理型划分的指标之一。用毛细管电泳、SDS PAGE和Western杂交方法检测了V991毒素的组分:在中性条件下,毒素在毛细管电泳时存在2个峰;SDS PAGE将毒素分为8条带,其中4条主带具有强烈的致萎性;Western点杂交的反应强度与相应蛋白回收带的致萎功能之间明显相关。
- 齐俊生史雪岩简桂良李怀方
- 关键词:棉花黄萎菌落叶型菌系毒素纯化
- 甲基对硫磷的酶联免疫吸附分析(ELISA)研究被引量:25
- 2005年
- 根据甲基对硫磷的结构特征,从甲基对硫磷的甲氧基部位连接了两种间隔臂,合成了两种半抗原,并通过活性酯法和混合酸酐法分别制备了与不同的载体蛋白偶联的人工抗原。采用其中两种结合物进行动物免疫,得到了针对两种抗原的高效价抗体。在此基础上,建立了两种甲基对硫磷的酶联免疫吸附测定(ELISA)方法。结果表明,该方法检测限分别为2.0和6.1ng·mL-1。两种抗体对甲基对硫磷表现了很高的特异性,除了对硫磷以外,对结构相似的几种有机磷农药均无交叉反应。土壤和河水中的添加回收实验结果表明,采用ELISA方法得到的回收率及CV值都与GC方法基本吻合,且检测灵敏度比GC还高,符合农药残留分析的要求。
- 韩丽君贾明宏钱传范李成文张冰
- 关键词:酶联免疫吸附测定法甲基对硫磷农药残留
- 根癌病生防菌——葡萄土壤杆菌E26菌株在葡萄植株的定殖研究被引量:12
- 2005年
- 利用绿色荧光蛋白基因(gfp)标记示踪,研究了葡萄根癌病生防菌葡萄土壤杆菌E26菌株应用到田间后在玫瑰香葡萄(Vitisviniferacv. MuscatHumburg)根表面和根际土壤中的群体数量变化,比较了E26菌株与葡萄根癌病原菌K308菌株室内人工接种后在玫瑰香葡萄苗茎和根外植体伤口部位的附着情况。在田间自然状况下,E26菌株可以在葡萄根表面和根际土壤中存活定殖。接种 5个月后,E26在根表面的平均数量为 104cfu/g根 (鲜重),在根际土壤中的平均数量为 104cfu/g土壤(干重)。在室内,E26菌株和K308菌株分别单独接种时均能以相似水平附着在葡萄茎和根的伤口;E26和K308以相同数量同时接种时,附着在葡萄伤口细胞的K308的数量显著低于K308单独接种时所附着在葡萄伤口细胞的数量。扫描电镜显微观察证实E26菌株能够和病菌K308菌株一样附着于葡萄根部伤口处。
- 李金云陈凡王建辉王慧敏
- 关键词:葡萄根癌病生物防治定殖
- 防治小麦纹枯病微生态制剂菌株的筛选
- 从小麦纹枯病重病田选择健康植株,自植株体内分离芽孢杆菌,共获取芽孢杆菌136株,经拮抗性测定和温室盆栽防病试验,获得3株防效在70%以上的菌株,并且对小麦生长有明显的促进作用。
- 王琦付学池梁华荣梅汝鸿
- 关键词:小麦纹枯病
- 文献传递