博士科研启动基金(201207-18)
- 作品数:4 被引量:9H指数:2
- 相关作者:李纪顺周红姿郭凯杨合同陈泉更多>>
- 相关机构:山东省科学院武夷学院更多>>
- 发文基金:博士科研启动基金山东省科技发展计划项目国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:生物学农业科学医药卫生更多>>
- 重组人促性腺激素-铜绿假单胞菌外毒素A蛋白的可溶性表达、纯化和对肿瘤细胞的抑制活性被引量:2
- 2013年
- 以人促性腺激素-铜绿假单胞菌外毒素A衍生物(GnRH-PE39KDEL)为研究对象,根据大肠杆菌密码子偏好性优化,通过基因合成的方法获得重组蛋白核酸序列,连接至pET-24b载体中,并转化入大肠杆菌BL21(DE3)及BL21(DE3)plyS中进行诱导表达。结果显示,在含有2 mg/mL葡萄糖的LB培养基中37℃培养至OD600约为0.6 h,加入0.2 mmol/L IPTG在30℃诱导2 h后,重组蛋白可以实现可溶性高表达。工程菌经超声波破碎、高速离心后,经镍柱纯化和脱盐后得到重组蛋白,蛋白纯度达到95%以上,蛋白最终得率在2.6 mg/g菌体。重组蛋白经IC50检测,可以较好地抑制肿瘤细胞株的生长。
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- 关键词:绿脓杆菌外毒素A可溶性表达
- 靶向抗肿瘤GnRH-PE39KDEL融合蛋白表达培养基的优化被引量:1
- 2014年
- 通过筛选培养基、单因子筛选试验及正交试验进行摇瓶发酵,确定适合该菌株表达融合蛋白的最佳培养基配方。采用该优化培养基可使抗肿瘤GnRH-PE39KDEL融合蛋白表达量占总蛋白的34.5%,占可溶蛋白的40%。
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- 关键词:培养基优化
- TL_2的鉴定及其对植物病原菌的抑制作用被引量:3
- 2013年
- 对枯草芽孢杆菌TL2进行了16SrDNA序列分析,结合菌落形态、生理生化特征研究,将其鉴定为芽孢杆菌属的枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis。通过对峙培养法测定TL2对10种植物病原菌的抑制作用,结果表明,对峙培养5d后,TL2对10种病原菌均有不同程度的抑制作用,其中枯草芽孢杆菌TL2对辣椒疫霉菌的平均抑制率最高(65.12%),对苹果轮纹病菌的平均抑制率最低(24.14%)。
- 赵晓燕洪永聪郭凯张新建周红姿李纪顺杨合同
- 关键词:RDNA序列植物病原菌
- 重组血管内皮受体F3肽-铜绿假单胞菌外毒素A蛋白抑制肿瘤生长的实验研究被引量:3
- 2014年
- 检测融合表达的F3肽-铜绿假单胞菌外毒素A(F3-PE39KDEL)在抗肿瘤细胞及活体肿瘤抑制方面的作用效果。用MTT法检测F3-PE39KDEL对肿瘤细胞株的抑制活性。小鼠半致死剂量LD50检测毒理学性质,裸鼠成瘤实验检测F3-PE39KDEL对荷瘤裸鼠中肿瘤的生长抑制。结果表明,融合蛋白F3-PE39KDEL能很好抑制肿瘤细胞和人结肠癌的生长,同时具有较低的生物学毒性。说明F3-PE39KDEL具有抑制人结肠癌生长的潜在应用价值。
- 郭凯陈泉周红姿陈凯李纪顺扈进冬杨合同
- 关键词:受体肿瘤