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染矽尘大鼠肺组织一氧化氮合酶的表达被引量：8: 2004年; 目的　研究染矽尘大鼠早期炎性肺损伤过程中一氧化氮合酶 (NOS)的表达规律 ,为矽肺纤维化机制提供理论依据。方法　气管暴露法建立矽肺动物模型。测定支气管肺泡灌洗液 (BALF)中诱导型NOS(iNOS)的表达和总NOS的活力。在组织芯片上使用SP法检测大鼠肺组织iNOS的表达 ,并用Image ProPlus图像分析法对iNOS的表达进行定量测定。结果　iNOS主要表达在巨噬细胞和中性粒细胞胞浆内。与对照组相比 ,染矽尘大鼠肺组织中iNOS积分光密度于染尘后 3、7d时分别增加了1.47× 10 5 、2 .73× 10 5 ,2 8d时降低了 1.11× 10 5 ,差异均有显著性 (P <0 .0 5或P <0 .0 1)。大鼠BALF中iNOS活力在染尘后 3、7、14d时分别增加了 0 .86、1.89、0 .92U/ml ,差异均有显著性 (P <0 .0 5或P <0 .0 1)。BALF总NOS活力在染尘后 1、3、7、14d时分别增加了 1.43、2 .0 5、2 .61、2 .19U/ml,差异均有显著性 (P <0 .0 5或P <0 .0 1)。结论　在矽尘诱导下 ,大鼠肺组织中表达iNOS的细胞主要是肺泡巨噬细胞和中性粒细胞 ,其肺组织中iNOS的表达从染尘后 1d至 2; 王世鑫张西正蔡绍皙杜海科张诗武; 关键词：矽尘肺组织一氧化氮合酶酶表达矽肺组织芯片

牛磺酸对染矽尘大鼠肺组织炎性细胞影响被引量：6: 2013年; 目的探讨牛磺酸对染矽尘大鼠肺组织炎性细胞趋化的影响。方法 Wistar大鼠144只,随机分为对照组、染矽尘组和牛磺酸组,后2组气管内注入质量浓度为50 g/L的矽尘混悬液,牛磺酸组在实验开始前3 d即给予含质量分数为2.5%的牛磺酸饲料持续喂养,对照组气管内注入等体积灭菌生理氯化钠溶液。偏振光显微镜观察肺纤维化发生情况,行在体全肺灌洗术,血细胞计数仪测定支气管肺泡灌洗液细胞数。结果牛磺酸组第7、14、21和28天炎性细胞总数均低于染矽尘组,差异有统计学意义(P<0.05)。牛磺酸组第14、21天巨噬细胞数低于染矽尘组,差异有统计学意义(P<0.05)。牛磺酸组第21天中性粒细胞数低于染矽尘组,差异有统计学意义(P<0.05)。牛磺酸组第14、21天淋巴细胞数均低于染矽尘组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论牛磺酸对矽尘诱导大鼠肺组织巨噬细胞、中性粒细胞、淋巴细胞的趋化具有抑制作用。; 徐峥嵘杜海科王世鑫刘殿武; 关键词：牛磺酸矽肺

染矽尘大鼠早期肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达被引量：1: 2005年; 目的探讨染矽尘大鼠早期肺组织中Ⅰ型、Ⅲ型胶原形成的时间规律。方法采用气管暴露法建立矽肺动物模型。取肺组织制作石蜡切片,天狼猩红法染色,偏振光显微镜观察Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达,用图像分析系统对Ⅰ、Ⅲ型胶原进行定量分析。结果染矽尘后第3天,Ⅲ型胶原开始增生,染矽尘后第7天,Ⅰ型胶原开始增生,直至染矽尘后第28天。这2种胶原进行性增加。Ⅰ、Ⅲ型胶原阳性面积百分比在染矽尘后均有不同程度的增加。染矽尘后第7天、第14天、第21天、第28天,Ⅰ型胶原阳性面积百分比分别增加27.12(P<0.01),24.73(P<0.01),16.01(P<0.05),52.45(P<0.01)。染矽尘后第3天、第28天,Ⅲ型胶原阳性面积百分比分别增加2.20(P<0.01)、24.13(P<0.01)。结论染矽尘大鼠Ⅰ、Ⅲ型胶原明显增加。Ⅰ、Ⅲ型胶原增生出现的时相有所不同,染矽尘后第3天,Ⅲ型胶原开始出现,染矽尘后第7天,Ⅰ型胶原开始形成,此后,Ⅰ、Ⅲ型胶原呈进行性增多的趋势。天狼猩红-偏振光显微镜法是一种定量检测Ⅰ、Ⅲ型胶原的更加准确的方法。; 杜海科刘彦王世鑫常爱华; 关键词：肺组织矽尘天狼猩红微镜观察胶原增生

染矽尘大鼠早期肺组织中转化生长因子-β_1的表达被引量：3: 2005年; 【目的】探讨染矽尘大鼠肺组织转化生长因子-β1(TGF-β1)蛋白水平的改变在矽肺发病中的意义。【方法】将96只大鼠随机分为对照组、染矽尘组,采用一次性气管内注入矽尘法建立矽肺动物模型。染尘后按不同时间点取大鼠肺组织制作组织芯片,链菌素-过氧化物酶法检测TGF-β1在肺组织中的表达,用Image-ProPlus图像分析系统对TGF-β1表达作定量分析。【结果】对照组大鼠有极少量TGF-β1在肺组织内表达;染矽尘组大鼠肺组织TGF-β1表达明显增强,TGF-β1阳性细胞积分光密度增加,7 d时达高峰,与对照组比较有显著性差异(P<0.05),14 d时开始下降,至28 d时两组差异无显著性(P>0.05)。【结论】矽尘可以诱导肺组织过度表达TGF-β1,TGF-β1可能与早期矽肺纤维化病变有关。; 李宏伟高秀霞杜海科曾锦波王世鑫; 关键词：二氧化硅矽肺转化生长因子-Β1

染矽尘大鼠肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的变化被引量：8: 2005年; 【目的】探讨染矽尘大鼠肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原表达变化的意义。【方法】将96只大鼠随机分为对照组、染矽尘组,采用一次性气管内注入矽尘法建立矽肺动物模型,染尘后按不同时间点取大鼠肺组织,用天狼猩红染色法结合偏振光显微镜观察Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达,Image-Pro Plus图像分析系统进行定量分析。【结果】与对照组比较,染矽尘大鼠肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原表达增强,各时间点胶原面积百分比均有不同程度的增加,Ⅰ型胶原在染矽尘后7 d、Ⅲ型胶原在染矽尘后3 d开始增加,两种胶原在28 d时增加幅度最大。【结论】矽尘诱导染矽尘大鼠肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原的增生,且这两种胶原的增生具有时相性。; 李宏伟高秀霞杜海科王奕飞王世鑫; 关键词：矽尘胶原

川芎嗪对染矽尘大鼠肺组织转化生长因子-β_1表达的影响被引量：2: 2005年; 【目的】观察中药川芎嗪对染矽尘大鼠肺组织转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响。【方法】将128只大鼠随机分为对照组、染矽尘组、川芎嗪组,采用气管暴露法建立矽肺动物模型,川芎嗪组每日腹腔注射川芎嗪注射液50 mg/kg。染尘后按不同时间点取大鼠肺组织制作组织芯片,链菌素-过氧化物酶法检测TGF-β1在肺组织中的表达,用Image-Pro Plus图像分析系统对TGF-β1表达作定量分析。【结果】对照组大鼠有极少量TGF-β1在肺组织巨噬细胞内表达,染矽尘组大鼠肺组织TGF-β1表达明显增强。与染矽尘组相比,川芎嗪组表达TGF-β1的细胞数量及强度有所降低,阳性细胞积分光密度下降,染矽尘后7 d具有显著性差异(P<0.01)。【结论】中药川芎嗪可以抑制矽尘诱导的肺组织TGF-β1的过度表达。; 高秀霞杜海科李宏伟王奕飞王世鑫; 关键词：川芎嗪二氧化硅转化生长因子-Β1

染矽尘大鼠肺组织不同时间点FasL表达与细胞凋亡被引量：4: 2006年; 目的探讨染矽尘大鼠肺组织FasL表达及细胞凋亡在矽肺病理变化中的意义。方法将96只Wistar大鼠随机分为对照组和染矽尘组。对染矽尘组以暴露式气管内一次注入二氧化硅粉尘悬液(1 ml,0．2 g/kg)建立大鼠矽肺模型,对照组气管内注入1 ml灭菌生理盐水。分别于处理后1、3、7、14、21和28 d,每组分别取8只大鼠处死取肺组织,用组织芯片技术结合免疫组化SP法检测大鼠肺组织不同时间点FasL的表达;末端脱氨核苷酸转移酶末端标记技术(TUNEL)法检测大鼠肺组织细胞凋亡,并采用Image-Pro Plus Version 4．5 for windowsTM图像分析计算积分光密度。结果染矽尘组大鼠肺组织FasL在染矽尘后的7、14、21和28 d时,表达明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0．05),14 d时表达最高为157．50±23．12;染矽尘组大鼠肺组织凋亡阳性细胞在染矽尘后的1、3、7、14、21和28 d时,明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0．05),7和14d,分别最高为32．95±20．40和31．07±7．15。结论矽尘能导致肺组织细胞凋亡;FasL在染矽尘大鼠肺组织多种细胞中表达并介导细胞的凋亡,凋亡细胞主要以炎性细胞为主。; 张露新曾锦波杜海科张诗武王世鑫; 关键词：细胞凋亡矽肺

烟酸对染矽尘大鼠肺组织Ⅰ型和Ⅲ型胶原形成的影响被引量：4: 2004年; 目的　阐明饲料中添加烟酸对染矽尘大鼠早期Ⅰ型、Ⅲ型胶原形成的影响。方法　采用气管暴露法建立矽肺动物模型 ,高效液相色谱法测定血浆烟酸含量 ,天狼红染色法结合偏振光显微镜观察Ⅰ型、Ⅲ型胶原的形成 ,图像分析系统对胶原定量分析。结果　烟酸组不同时点血浆中烟酸含量明显升高 ,与对照组和矽尘组相比 ,差异均有显著性。染矽尘后第 7天、第 2 8天 ,与对照组比较 ,矽尘组大鼠肺组织Ⅰ型胶原阳性区域面积百分比显著增加 ,而烟酸组Ⅰ型胶原阳性区域面积百分比则明显低于矽尘组。染矽尘后第 2 8天 ,Ⅲ型胶原阳性区域面积百分比显著高于对照组 ,而烟酸组Ⅲ型胶原阳性区域面积百分比则显著低于矽尘组。结论　烟酸通过抑制Ⅰ型、Ⅲ型胶原的形成。; 杜海科王世鑫刘彦高秀霞; 关键词：烟酸矽尘

染石英肺泡巨噬细胞中转化生长因子-β_1蛋白水平变化: 2006年; [目的]观察石英与小鼠肺泡巨噬细胞(Alveolar Macrophage,AM)转化生长因子-β1(Transforming Growth Factor-β1,TGF-β1)蛋白表达水平之间的剂量-效应关系和时间-效应关系,从而探讨TGF-β1在石英引起肺纤维化中的作用。[方法]以不同剂量石英及不同作用时间刺激小鼠AM,收集其培养上清液,并作用于小鼠胚肺成纤维细胞,用ELISA法测定AM上清液TGF-β1蛋白水平,Western Blot方法检测AM内TGF—β1蛋白水平,四唑盐(MTT)比色法测定成纤维细胞增殖效应(A570 nm)。[结果]小鼠AM经不同剂量石英刺激4h后,结果显示随着石英剂量增加细胞培养上清TGF-β1蛋白水平逐渐升高,剂量100μg/106细胞时,与空白对照组比较差异有显著性(P<0．05)。同剂量的石英作用不同时间后,TGF-β1蛋白随时间延长呈现先升高而后逐渐降低的趋势,染石英8 h时,其水平最高(276．6±38．1 pg/ml),然后开始下降,但到第16 h仍高于对照组。AM内TGF-β1蛋白的表达有随石英剂量增高而上升的趋势,且随作用时间延长也呈先升高后降低,但其表达高峰时间在4 h,较上清中出现为早。石英剂量0～200μg／106细胞范围内,AM上清液作用于小鼠胚肺成纤维细胞,可引起细胞增殖;从100μg/106细胞开始差异有显著性,并存在剂量效应关系(r=0．92,P<0．05)。AM上清TGF-β1蛋白水平与A570 nm进行相关分析,两者呈正相关,即TGF-β1水平越高,则成纤维细胞增殖活性越强(r=0．76,P<0．05)。[结论]石英体外刺激小鼠AM,引起TGF-β1蛋白表达水平升高,且呈现剂量-效应关系和时间-效应关系。经石英刺激后的AM上清液可导致小鼠胚肺成纤维细胞增殖,有明显剂量-效应关系,AM上清TGF-β1越高,促增殖能力越强,二者呈正相关。这说明TGF-β1与石英引起的肺纤维化有明确的联系,它可能是矽肺发生发展一个重要因素。; 姬文婕周欣杨磊王世鑫; 关键词：石英巨噬细胞矽肺转化生长因子-Β1

FasL在染矽尘大鼠肺组织细胞不同时间点的表达: 2005年; 【目的】探讨FasL在矽肺肺纤维化过程中的作用。【方法】随机将Wistar大鼠分为对照组和染矽尘组。采用暴露式气管内一次注入二氧化硅粉尘悬液建立大鼠矽肺模型。模型建立后,分4个时间点(7、14、21、28 d),每组分别取8只大鼠将其处死取肺组织,用组织芯片技术结合免疫组化SP法观察大鼠肺组织不同时间点FasL的表达情况,采用Image-Pro Plus Version 4.5 for windowsTM图像分析计算积分光密度。【结果】大鼠矽肺模型组肺组织FasL在染矽尘后的7、14、21和28 d时,表达显著高于对照组,差异有显著性(P<0.05),表达高峰是在染矽尘后的14 d。【结论】肺组织FasL的表达与矽肺纤维化的发生发展有关。; 史化才杜海科梁先才曾锦波张诗武王世鑫; 关键词：矽肺 FASL 肺纤维化

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国家自然科学基金(30070654)

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