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国家自然科学基金(30871854)

作品数:5 被引量:2H指数:1
相关作者:赵德明杨利峰周向梅杨建民尹晓敏更多>>
相关机构:中国农业大学中国检验检疫科学研究院更多>>
发文基金:国家自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
相关领域:生物学农业科学医药卫生更多>>

文献类型

  • 4篇中文期刊文章

领域

  • 2篇生物学
  • 2篇农业科学
  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇蛋白
  • 1篇原核表达
  • 1篇圆二色
  • 1篇圆二色谱
  • 1篇人外周血
  • 1篇色谱
  • 1篇体外
  • 1篇朊蛋白
  • 1篇外周
  • 1篇外周血
  • 1篇细胞
  • 1篇细胞因子
  • 1篇小胶质细胞
  • 1篇胶质
  • 1篇胶质细胞
  • 1篇海绵状脑病
  • 1篇分泌
  • 1篇PRP
  • 1篇TSG101
  • 1篇ALTERE...

机构

  • 3篇中国农业大学
  • 1篇中国检验检疫...

作者

  • 3篇赵德明
  • 2篇尹晓敏
  • 2篇杨建民
  • 2篇周向梅
  • 2篇杨利峰
  • 1篇王伊琴
  • 1篇王桂花
  • 1篇乔俊文
  • 1篇秦贞奎

传媒

  • 1篇中国兽医学报
  • 1篇细胞生物学杂...
  • 1篇中国农业大学...
  • 1篇Virolo...

年份

  • 1篇2010
  • 3篇2009
5 条 记 录,以下是 1-4
排序方式:
热力学因素对绵羊重组朊蛋白体外构象转化的作用
2009年
构建了绵羊朊蛋白的原核表达载体,获得了高纯度的融合表达蛋白。并在热力学因素的作用下,研究了重组绵羊朊蛋白的构象转化。以基因型为ARQ/ARQ蒙古绵羊的血液DNA为模板,利用DNA重组技术,将绵羊朊蛋白正常成熟蛋白基因OvPrP插入表达载体pET30a,在大肠杆菌BL2l(DE3)中高效表达,获得的表达产物以包涵体形式存在,并对其进行纯化和复性。超滤浓缩后浓度约为0.5 mg/mL的OvPrP97-234,进行热力学处理,利用远紫外线圆二色谱(CD)分析热力学处理前、后蛋白的二级结构的变化,同时,对热力学处理前、后的蛋白进行了蛋白酶K抗性的检测,并对其高级结构进行了预测。结果表明:获得的表达产物经SDS-PAGE分析可见分子量为16kD的蛋白条带,Western-blotting的鉴定证实了所获得的蛋白是特异性的朊蛋白。经Jascow32软件分析,测得天然构象的OvPrP97-234的二级结构含量为:α螺旋为28.8%、β折叠为0%、转角和无规卷曲为71.1%,无蛋白酶K的抗性。经过热力学处理之后,OvPrP97-234的二级结构含量为:α螺旋为19.3%,β折叠为36.9%,转角和无规卷曲为43.8%,有一定的蛋白酶K抗性。绵羊重组朊蛋白的体外构象转化的分析为朊蛋白的体外构象转化机制和致病机理的研究提供科学依据。
王伊琴秦贞奎包勇敢乔俊文赵德明
关键词:原核表达圆二色谱
人外周血单核细胞释放PrP^C与其分泌Exosomes相关性研究
2009年
为探求人外周血单核细胞是否分泌exosomes以及exosomes的分泌与细胞外环境中PrP^C的关系。采用密度梯度离心的方法从人外周血单核细胞系的培养基中提取exosomes,并利用电镜技术和免疫印迹分析对其形态学和生物学特征进行鉴定。结果显示所提取的exosomes主要分布在1.13~1.16 g/ml的密度层中,平均直径在30~100 nm之间,呈杯状,这与相关报道关于其他细胞分泌的exosomes特征分析的结果相一致;与exosomes相关的分子Tsg101、flotillin-1、Hsp70、PrP^C均为阳性标记,而作为内质网标志蛋白的钙连接蛋白在exosomes上没有检测到。以上结果说明人外周血单核细胞分泌的exosomes没有被细胞器污染,而且细胞向培养基中释放PrP^C与其分泌exosomes有关。
王桂花周向梅尹晓敏杨利峰杨建民赵德明
关键词:传染性海绵状脑病EXOSOMESTSG101
PrP 106-126 Altered PrP mRNA Gene Expression in Mouse Microglia BV-2 Cells
2010年
Prion diseases are infectious and fatal neurodegenerative diseases.The pathogenic agent is an abnormal prion protein aggregate.Microglial activation in the centre nervous system is a characteristic feature of prion disease.In this study,we examined the effect of PrP 106-126 on PrP mRNA gene expression in Mouse microglia cells BV-2 by real-time quantitative PCR.PrP mRNA expression level was found to be significantly increased after 18 h exposure of BV-2 cells to PrP 106-126,with 3-fold increase after 18 h and 4.5-fold increase after 24 h and BV-2 cells proliferating occurred correspondingly.Our results provide the first in vitro evidence of the increase of PrP mRNA levels in microglial cells exposed to PrP 106-126,and indicate that microglial cells might play a critical role in prion pathogenesis.
Yu BAIYu-rong LIGui-hua WANGXiang-mei ZHOUDe-ming ZHAO
关键词:朊蛋白MRNA
PrP106-126毒性多肽影响小胶质细胞IL-1β、TNF-α的mRNA表达量变化的研究
2009年
体外合成的人PrP106-126毒性多肽具有PrPSc类似的特性,如富含β折叠,具有部分蛋白酶抗性,可以在脑组织内沉积形成淀粉样斑块等等。因此PrP106-126可作为替代PrPSc研究TSE发病机制的理想模型。PrP106-126对神经元的损伤作用可能主要通过两种途径:一方面它可与神经元表面的相关受体相结合通过信号转导途径直接对神经元造成损伤,另一方面它可激活小胶质细胞产生炎性介质或NO等毒性物质间接引起神经元凋亡。激活的小胶质细胞主要产生IL-1β、TNF-α两种炎性介质,这两种细胞因子的持续产生可致使神经元凋亡。本研究旨在对PrP106-126多肽作用小胶质细胞过程中,IL-1β、TNF-α的mRNA表达量随时间变化的规律,为阐明TSE发病过程中,小胶质细胞促进神经元凋亡的作用机制提供基础数据,并为一定程度上抑制小胶质细胞激活,减轻其对神经元的损伤作用奠定理论基础。
杨利峰周向梅杨建民尹晓敏赵德明
关键词:小胶质细胞细胞因子
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