重庆市科技攻关计划(CSTC2012GG-YYJS80014)
- 作品数：2 被引量：4H指数：2
- 相关作者：尹忠宝蔡家利陈文毫黄国光孙加燕更多>>
- 相关机构：重庆理工大学更多>>
- 发文基金：重庆市科技攻关计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 重组猪α干扰素的体外活性测定和冻干保护剂的筛选被引量：2
- 2014年
- 为了测定猪α干扰素的活性并选出合适的冻干保护剂,制备了重组猪α干扰素,利用细胞病变抑制法测定了干扰素在Marc-145细胞抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)时的活性,并筛选出效果较好的冻干保护剂。结果表明:制备的重组猪α干扰素活性达到了4.41×105U/mg。选择3%甘露醇作为保护剂,为进一步研究干扰素注射剂奠定了基础。
- 蔡家利尹忠宝朱广倍任燕斌吴胜昔黄国光
- 关键词：活性测定保护剂
- 重组猪IFNα的构建及原核可溶性表达研究被引量：2
- 2013年
- 使用原核表达系统可溶性表达猪α-干扰素,并进行纯化和鉴定。根据Gene Bank中报道的猪α-干扰素成熟肽基因序列设计引物,以猪肝脏细胞基因组DNA为模板,用PCR方法扩增猪α-干扰素成熟肽基因,并将其定向克隆到原核表达载体pET32a+中,转化大肠杆菌DH5a。阳性克隆经PCR鉴定、双酶切鉴定以及测序鉴定后,转入大肠杆菌BL21进行诱导表达。对表达产物进行SDS-PAGE分析、镍柱亲和层析纯化、Western-blot鉴定。结果表明:成功构建了猪α-干扰素原核表达载体pET32a+-poIFN-α;表达产物经SDS-PAGE分析,在相对分子质量约3.8×104的位置出现了目的蛋白条带,与预期相符;Western-blot鉴定显示有特异性条带出现。实现了重组猪α-干扰素的可溶性表达,获得了纯度较高的重组猪α-干扰素,为进一步研究其药物作用奠定了基础。
- 蔡家利户国达孙加燕尹忠宝张存亮陈文毫
- 关键词：基因工程药物生物药物兽药
