国家重点实验室开放基金(2008SKLID302)
- 作品数：3 被引量：5H指数：1
- 相关作者：王湛杜海军李淑英周玲曾毅更多>>
- 相关机构：中国疾病预防控制中心河北联合大学华北煤炭医学院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- EB病毒感染与胃癌患者临床病理特征相关性的Meta分析被引量：5
- 2009年
- EB病毒(EPstein-Barr virus,EBV)感染与多种恶性肿瘤的发生相关.大约10%的胃癌组织细胞中可以检测到EB病毒编码的小RNA(EBERs),表明EBV感染与部分胃癌的发生相关.为研究EBV感染与胃癌临床病理特征的相关性,本研究汇总了EBV相关胃癌的研究论文,对采用原位杂交方法检测EBV的22篇论文进行了Meta分析.22篇入选的论文中收集的胃癌病例5475例,检测到EBV阳性病例411例,EBV阳性率为7.5%.在EBV阳性胃癌中,男性检出率为11.1%,女性检出率为3.0%,男性检出率相当于女性检出率3倍多;EBV阳性胃癌与阴性胃癌相比具有较少的淋巴结转移;EBV阳性胃癌与癌组织发生部位相关,并且残胃癌中EBV感染率较高.依据组织学分型,EBV阳性胃癌弥漫型为8.1%,肠型为8.0%.统计分析显示,EBV感染与组织学分型无显著相关性(P>0.05);被检标本类型包括存档蜡块和新鲜手术切除组织标本:EBV阳性率分别为7.9%,6.5%.统计分析表明,EBV相关胃癌与标本类型无显著相关性(P>0.05);在地域分布方面,EBV阳性胃癌检出率美洲为9.4%,亚洲为6.1%,欧洲为9.1%,统计分析显示,EBV相关胃癌与地域分布显著相关(P<0.05).Meta分析表明,EBV感染仅发生在胃癌组织细胞中,并且与患者性别、淋巴结转移、肿瘤组织发生部位及地域分布显著相关(P<0.05),与患者肿瘤组织学分型、标本类型无显著相关性(P>0.05).结果提示,EBV阳性胃癌具有独特的临床病理学特征.
- 李淑英杜海军王湛周玲赵晓瑜曾毅
- 关键词：EB病毒胃癌META分析原位杂交
- BARF1基因真核表达载体PIRES2-EGFP/BARF1的构建及鉴定
- 2011年
- 提取B95-8细胞RNA,进行逆转录聚合酶链反应(Reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)扩增BARF1基因,将其克隆到pUM-T载体,转化E.coliDH5α,筛选阳性克隆,提取质粒并用EcoRI和BamHI双酶切,电泳回收BARF1片段.同时用EcoRI和BamHI双酶切真核载体PIRES2-EGFP,电泳后回收载体PIRES2-EGFP并与BARF1片段连接;转化E.coliDH5α,筛选阳性克隆.提取质粒并用EcoRI和BamHI双酶切鉴定插入方向,并进行测序分析.转染胃上皮细胞GES-1后,观察细胞形态与行为变化.得到666 bp的BARF1基因片段.经双酶切鉴定,BARF1基因已正确连接到PIRES2-EGFP真核表达载体;测序结果与B95-8细胞株序列完全一致.BARF1基因转染GES-1细胞后,细胞由梭形圆化,黏着力减弱,重叠生长.结果表明成功地构建了携带EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)编码BARF1基因的真核表达载体.
- 李淑英张科杜海军王湛李旭坤慈雅丽王新燕张秀军周玲
- 关键词：EB病毒BARF1基因真核表达载体
- 携带BARF1基因的人胃上皮细胞株的建立
- 2011年
- 目的建立携带BARF1基因的人胃上皮细胞株,为探讨EB病毒编码BARF1基因对胃上皮细胞的影响而建立体外模型。方法构建携带BARF1基因的真核载体pcDNA3.1(+)-his/BARF1,转染人胃上皮细胞系GES-1,G418筛选单克隆。用CCK-8检测未转染的GES-1、转染空载体GES-1及转染BARF1基因的GES-1增殖状况。结果双酶切鉴定,666bp的BARF1基因片段已连接到真核表达载体pcDNA3.1(+)-his。转染细胞通过G418筛选,获得了稳定表达BARF1基因的人胃上皮细胞株,转染BARF1基因的GES-1细胞增殖速度显著高于未转染的GES-1和转染空载体GES-1细胞(P<0.01)。结论建立了稳定表达BARF1基因的人胃上皮细胞株。
- 李淑英张科杜海军王湛慈雅丽王新燕周玲曾毅
- 关键词：人胃上皮细胞转染BARF1基因
