南京市医学科技发展项目(ZKX06013)
- 作品数：12 被引量：33H指数：3
- 相关作者：李建勇徐卫徐祖琼孙雪梅张苏江更多>>
- 相关机构：江苏省人民医院江苏省中医院南京大学医学院附属鼓楼医院更多>>
- 发文基金：南京市医学科技发展项目江苏省科技厅社会发展基金江苏省医学重点人才培养基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Taqman-MGB探针检测慢性骨髓增殖性疾病患者的JAK2V617F突变被引量：1
- 2009年
- 目的:采用不同方法检测慢性骨髓增殖性疾病(CMPD)患者的JAK2V617F突变率,评估临床应用的可能性。方法:提取84例Ph阴性CMPD患者单个核细胞DNA,利用RealtimePCR联合Taqman-MGB探针检测骨髓增殖性疾病患者的JAK2V6A7F的发生率,并利用限制性片段长度多态性(RFLP)对照检测CMPD患者的JAK2V617F突变率,用基因测序验证两种结果。结果:RealtimePCR联合Taqman-MGB探针检测84例Ph(-)CMPD患者,42例存在JAK2V617F,突变率为50%;其中PV、ET、IMF患者的突变率分别为76.7%(23/30)、25.9%(7/27)、42.5%(9/20),经RFLP检测84例Ph(-)CMPD总的突变率为33.3%,测序结果验证了RealtimePCR联合Taqman-MGB探针检测结果。结论:Taqman-MGB探针联合RealtimePCR方法有较高的准确率,可以作为检测JAK2V617F突变的方法。
- 孙雪梅徐祖琼于慧赖仁胜谢玲顾香芳夏珺李建勇
- 关键词：慢性骨髓增殖性疾病
- 等位基因特异性聚合酶链反应结合测序对骨髓增殖性疾病JAK2 V617F点突变的研究被引量：6
- 2007年
- 目的研究骨髓增殖性疾病(MPD)患者 Janus 激酶2(JAK2)V617F 点突变,探讨其临床应用意义。方法应用等位基因特异性聚合酶链反应(AS-PCR)结合测序检测20例慢性粒细胞白血病(CML)、23例真性红细胞增多症(PV)、40例原发性血小板增多症(ET)、8例慢性特发性骨髓纤维化(IMF)、3例高嗜酸粒细胞综合征(HES)患者外周血单个核细胞基因组 DNA 的 JAK2 V617F 点突变。结果 74例 BCR/ABL 阴性 MPD 患者中共发现38例存在 JAK2 V617F 突变(51.4%),分别为16例 PV,18例 ET,3例 IMF,1例 HES。对所有阳性样本和10例阴性样本进行测序鉴定,二者结果均一致。JAK2 V617F 突变阳性 ET 患者的外周血血红蛋白、红细胞压积和中性粒细胞比例显著高于阴性组。结论 JAK2 V617F 突变为 BCR/ABL 阴性 MPD 患者主要的分子遗传学异常,对其诊断、分类及探索有效的靶向治疗有重要影响。
- 张苏江李伟达宋君红徐卫仇红霞李建勇
- 关键词：JAK2骨髓增殖性疾病突变等位基因聚合酶链反应
- 以布加综合征为首发表现的真性红细胞增多症一例
- 2009年
- 患者，男，38岁。于2007年12月20日因反复腹胀2个月余就诊入院。既往无血液病及其他病史，无病毒性肝炎病史。查体：体温36．4℃，脉率82次／min，呼吸18次／min，血压129／95mmHg（1mmHg=0．133kPa）。精神可，巩膜轻度黄染，心、肺未见异常。腹部平软，无压痛及反跳痛，肝肋缘下可及，质中，无触痛，剑突下4cm，无触痛，肝区叩痛阳性。脾触诊不清。住院对症治疗后症状略有好转，于2008年1月14日出院。
- 洪鸣徐卫张苏江乔纯钱思轩李建勇
- 关键词：真性红细胞增多症布加综合征首发表现对症治疗反跳痛肋缘下
- JAK2靶向抑制剂治疗骨髓增殖性疾病的研究现状与前景被引量：1
- 2009年
- JAK2V617F点突变的发现使得人们对her-abl阴性骨髓增殖性疾病（MPD）的发病机制有了新的认识，分子机制的明确促进了分子靶向抑制剂治疗MPD的研究进程，多种选择性和非选择性针对JAK2的抑制剂正处在临床前研究巾，有些已经进人临床验证阶段，初步结果显示这些抑制剂体内外均有抑制JAK2相关信号途径的作用。我们就JAK2靶向抑制剂研究的现状与前景作一综述。
- 孙雪梅徐祖琼李建勇
- 关键词：骨髓增殖性疾病JAK2分子靶向抑制剂分子机制非选择性
- 原发性骨髓纤维化的诊断和鉴别诊断被引量：14
- 2009年
- 洪鸣徐卫李建勇
- 关键词：原发性骨髓纤维化
- 流式细胞术检测Bcr-Abl阳性细胞的磷酸酪氨酸水平
- 2009年
- 目的:探讨流式细胞术检测Bcr-Abl阳性细胞的磷酸酪氨酸蛋白水平的应用。方法:采用直接免疫荧光标记方法,应用P-Tyr-100抗体标记胞浆抗原,流式细胞术检测Bcr-Abl阳性细胞系(K562细胞)和Bcr-Abl阴性细胞系(HL60细胞)磷酸酪氨酸水平,并以同样的方法分析20例正常人外周血粒细胞和32例慢性粒细胞白血病(CML)患者中性粒细胞的磷酸酪氨酸水平,以细胞的平均荧光强度(MFI)表示其磷酸酪氨酸水平。结果:HL60细胞和K562细胞的MFI分别为170.89±23.42和838.25±56.59,20例正常人、CML慢性期患者和CML加速/急变期患者的MFI分别为250.39±115.78、1549.66±453.55和1879.29±533.19,CML患者的MFI明显高于正常人(P<0.01),CML加速/急变期患者的MFI明显高于CML慢性期的患者(P<0.05)。结论:流式细胞术是一种理想的检测Bcr-Abl阳性细胞的磷酸酪氨酸水平的方法,且快速、敏感,有望用于CML的快速诊断。
- 姜鹏君孙雪梅朱学军徐祖琼李建勇陈军浩
- 关键词：磷酸酪氨酸流式细胞术
- 骨髓纤维化JAK2V617F突变的临床意义被引量：3
- 2012年
- 目的分析骨髓纤维化患者JAK2V617F突变与外周血常规的关系。方法利用Taqman-MGB探针联合实时聚合酶链反应方法检测30例原发性骨髓纤维化的JAK2V617F突变情况,并比较JAK2V617F突变与无突变患者的外周血常规改变。结果 30例中12例JAK2V617F突变,突变率为40%。JAK2V617F突变12例外周血白细胞平均(13.07±3.71)×109/L显著高于JAK2V617F无突变18例外周血白细胞平均(4.37±2.59)×109/L,两组比较差异有统计学意义(P<0.01),但两组血红蛋白及血小板数比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论骨髓纤维化患者中JAK2V617F突变者外周血白细胞数高于JAK2V617F无突变者,这对治疗有一定的指导意义。
- 徐祖琼孙雪梅陈敏刘丽
- 关键词：骨髓纤维化血细胞计数JAK2基因
- 真性红细胞增多症、原发性血小板增多症、原发性骨髓纤维化患者骨髓病理特点及JAK2突变被引量：4
- 2008年
- 目的:探讨真性红细胞增多症(PV)、原发性血小板增多症(ET)、原发性骨髓纤维化(IMF)患者的骨髓病理特点并且检测JAK2V617F突变的发生率,分析骨髓中纤维增生程度以及JAK2V617F突变对PV、ET患者白细胞数的影响。方法:69例初诊患者的骨髓切片经HGF染色以及Gomori染色后进行形态学研究,并利用real-timePCR法测38例患者的骨髓或者外周血的JAK2V617F突变;分析骨髓切片中纤维组织增生程度以及JAK2突变对患者白细胞数的影响。结果:15例PV和15例ET患者的骨髓切片中可以观察到不同程度的纤维组织增生,所有PV、ET、IMF患者骨髓中可见到巨核细胞增多、巨核细胞多形性改变以及巨核细胞定位于骨小梁旁;12例PV、4例ET、4例IMF中检测到JAK2V617F突变;有突变和无突变患者发病时白细胞数均值分别为20.4×109/L和11.4×109/L,不同纤维增生程度的PV、ET患者的白细胞数均值差异无显著性(P=0.367)。结论:69例PV、ET、IMF患者骨髓切片中均有巨核细胞的形态以及定位变化,PV、ET、IMF患者中JAK2V617F突变的发生率分别为80%、27%、50%;有突变患者的白细胞数均值高于无突变患者,初诊的PV、ET患者骨髓中不同纤维增生程度患者的白细胞均值无明显差异。
- 徐祖琼孙雪梅欧阳建谢品浩杨建刚杨永公许景艳袁翠英张启国陈兵周荣富张谦周祀侨张丽华
- 关键词：骨髓疾病
- 特发性骨髓纤维化患者JAK2V617F和MPLW515L点突变及JAK2外显子12突变的研究
- 2009年
- 特发性骨髓纤维化（IMF）为慢性骨髓增殖性疾病（CMPD）的一种，缺乏特异性诊治。现在研究表明近一半的IMF患者存在JAK2V617F点突变，另外，MPLW515突变及JAK2外显子12突变的发现提示MPD除了JAK2V617F点突变以外存在其他的发病机制。本研究应用等位基因特异性-聚合酶链反应（AS-PCR）及基因测序检测30例IMF患者的JAK2V617F、MPLW515L点突变及JAK2外显子12突变，
- 夏珺徐卫张苏江乔纯沈云峰李建勇
- 关键词：特发性骨髓纤维化JAK2点突变等位基因特异性慢性骨髓增殖性疾病
- 真性红细胞增多症患者JAK2外显子12突变研究被引量：1
- 2009年
- JAK2获得性功能性突变的发现使人们对骨髓增殖性疾病（MPD）的认识有了突破性进展。真性红细胞增多症（PV）是一种克隆性的以红细胞异常增殖为主的MPD。JAK2V617F点突变位于外显子14。最近发现JAK2V617F点突变阴性的PV患者存在JAK2外显子12的突变，这些外显子12的突变改变了539、543及547位密码子附近的多种核苷酸，并且JAK2外显子12突变的位置均有微小的差别，与JAK2V617F一致的结构形成了鲜明的对比。我们应用PCR扩增12例JAK2V617F点突变阴性PV患者的JAK2外显子12片段，通过基因测序检测JAK2外显子12突变，并结合临床和实验室资料进行分析，探讨PV患者的JAK2外显子12突变的发生率及其临床意义。
- 夏珺徐卫张苏江乔纯沈云峰李建勇
- 关键词：真性红细胞增多症JAK2点突变骨髓增殖性疾病细胞异常增殖PCR扩增
