转基因生物新品种培育专项(2008ZX08008-003)
- 作品数：7 被引量：19H指数：2
- 相关作者：岳文斌张春香任有蛇苗向阳李志军更多>>
- 相关机构：山西农业大学中国农业科学院北京畜牧兽医研究所中国农业大学更多>>
- 发文基金：转基因生物新品种培育专项中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 多浪羊与小尾寒羊皮下脂肪组织转录组分析被引量：2
- 2021年
- 旨在探索多浪羊(D组)与小尾寒羊(X组)皮下脂肪组织中的特异性表达基因,并研究其潜在的作用,为理解绵羊脂肪组织发育规律以及对脂代谢相关疾病的预防和治疗研究提供依据。本研究选取脂肪沉积能力存在差异、健康无病、体况良好、种内个体体重相近(约50 kg)的雌性成年多浪羊和小尾寒羊为试验材料,分为D组(试验组)和X组(对照组),每组3个重复,采集位于背最长肌的皮下脂肪组织,应用RNA-Seq技术和生物信息学方法进行转录组测序并对结果进行分析。以|Fold change|≥2,P adjust≤0.05为标准筛选差异表达基因,通过对差异表达基因进行GO功能注释和KEGG通路富集分析,得到与脂肪沉积和脂代谢有关的差异基因。为了验证测序数据的可靠性,本研究随机选取了6个差异表达基因进行qRT-PCR验证。结果显示,在6个样本中共检测到38672个已知的mRNAs,新的mRNAs为1606个,在两组中共有839个差异表达基因,其中有320个差异基因在多浪羊组中上调表达,有519个差异基因在多浪羊组中下调表达。通过GO功能注释分析发现,差异表达基因主要参与脂质分解代谢过程、脂质生物合成过程、脂质分解代谢负调控过程、MAPK级联反应调控、对甘油三酯的反应等生物学过程。KEGG通路富集结果显示,差异表达基因显著富集到了PI3K-Akt、MAPK、胰岛素以及PPAR等信号通路中。qRT-PCR结果与测序结果一致,表明测序结果可靠。通过对多浪羊和小尾寒羊皮下脂肪组织进行转录组测序以及生物信息学分析,筛选到与脂肪沉积和脂代谢相关的差异表达基因,这些基因主要参与脂质生物合成、脂质代谢等过程,其中COL 1A1、AKT 2、SCD、LPL、PCK 1与PPP 2R5A可能在多浪羊与小尾寒羊的皮下脂肪组织的沉积与代谢中发挥重要作用。
- 刘天义冯卉Salsabeel Yousuf解领丽苗向阳
- 关键词：皮下脂肪脂肪沉积脂质代谢
- 与绵羊多胎繁殖性状相关的BMP家族基因的研究进展
- 2012年
- 文章就BMP家族基因中与绵羊多胎繁殖性状相关的主效基因和候选基因进行了综述,主要包括BMP2、BMP4、BMP15、GDF9以及BMP的受体BMPR II、BMPR-IB等基因的最新研究进展,阐述了其对绵羊繁殖率的影响,供研究者参考。
- 秦雪张春香岳文斌
- 关键词：绵羊多胎性状BMPS主效基因
- 稀释液中添加半胱氨酸对绵羊冷冻精液品质的影响被引量：7
- 2012年
- 在绵羊冷冻精液稀释液中添加0 mmol/L、2.5 mmol/L、5.0 mmol/L、7.5 mmol/L 4个不同梯度的半胱氨酸,通过测定解冻后的精子活率、畸形率、顶体完整率、质膜完整率以及各项酶(SOD、GSH、GSH-PX、CAT和MDA)的活性来确定最适添加量。结果表明,添加5.0 mmol/L的半胱氨酸组的精子活率和顶体完整率均极显著高于对照组和其他组(P<0.01),而畸形率显著低于对照组和其他试验组(P<0.05);各项酶指标中,5.0 mmol/L半胱氨酸组SOD和GSH浓度与其余各组间差异不显著(P>0.05),MDA浓度极显著低于对照组和7.5 mmol/L试验组(P<0.01),CAT和GSH-PX活性极显著或显著高于对照组和其他试验组(P<0.01,P<0.05)。说明冷冻稀释液中添加5.0 mmol/L的半胱氨酸可有效保护精子免受过氧化物的损害。
- 程彩虹岳文斌任有蛇张春香
- 关键词：稀释液半胱氨酸绵羊冷冻精液品质
- 莱芜猪肌内脂肪和皮下脂肪转录组分析被引量：1
- 2023年
- 为探究莱芜猪中不同部位脂肪沉积产生差异的关键基因,以180日龄体重相近的莱芜猪为实验对象,鉴定肌内脂肪(intramuscular fat,IMF)和皮下脂肪(subcutaneous fat,SCF)的mRNA表达谱,对差异表达mRNA进行基因本体论(Gene Ontology,GO)与京都基因和基因组数据库(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)功能富集分析,构建平均表达量前300 mRNA的蛋白质互作网络,筛选关键调控mRNA,并分析关键mRNA对应基因的序列和蛋白质结构,探究基因表达水平、结构和功能的联系,最后随机挑选6个mRNA进行实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,qRT-PCR)验证。筛选结果显示,在IMF和SCF中共鉴定出1665个差异表达的mRNA,其中888个上调,777个下调。GO结果显示,差异表达mRNA显著富集于信号通路调节的生物过程条目、生物膜组成的细胞组成条目和细胞代谢过程中酶活性调节的分子功能条目。KEGG富集结果显示,差异表达mRNA主要参与脂肪细胞生成、脂代谢、炎症反应和癌症相关的信号通路。蛋白质互作网络和基因结构特征的分析结果显示,CXCR4(C-X-C motif chemokine receptor 4)、PECAM1(platelet and endothelial cell adhesion molecule 1)、PLAU(urokinase-type plasminogen activator)、AGT(angiotensinogen)、AKT2(AKT serine/threonine kinase 2)、HSP70.2(heat shock cognate 70-kD protein,tandem duplicate 2)、LGALS3(galectin 3)、POSTN(periostin)在调控网络中处于中心位置。此外,qRT-PCR验证结果和测序结果的趋势一致,证明测序结果真实可靠。文中IMF和SCF转录组的差异分析结果提示,AGT、CXCR4、HSP70.2和PLAU基因在莱芜猪IMF沉积和脂代谢过程中发挥关键作用,可作为调控IMF的候选基因。
- 冯卉刘天义SALSABEEL Yousuf苗向阳
- 关键词：脂肪代谢
- 棉花脂肪酸脱氢酶FAD2能够实现转基因小鼠n-6脂肪酸的内源性生物合成被引量：1
- 2009年
- 脂肪酸脱氢酶FAD2(fatty acid desaturase-2)是一种将油酸(18:1)脱氢生成亚油酸(18:2n-6)的植物脱氢酶.在前期研究fad2转基因小鼠模型的基础上,本文新构建CMV promoter/fad2cDNA/SV40poly A真核表达载体,通过显微注射技术,生产出转基因小鼠.7只妊娠受体合计移植184枚受精卵,出生63只(34.2%)健康的成年小鼠.PCR和Southern blotting结果显示,有10只小鼠整合了外源基因,总的转基因效率是15.9%(10/63).随后,转基因小鼠与C57BL/6小鼠杂交选育,建立了10个转基因家系.最后,以6周龄的转基因后代同窝雌鼠作为样本(包括转基因阳性和阴性雌鼠),利用微量气相色谱方法,分析了腿部肌肉组织和肝脏组织的多种n-6脂肪酸的百分含量,结果显示,只有1个(10%)家系的转基因小鼠表达了外源基因,能够有效地改变目标脂肪酸的成分.其中肌肉组织中油酸百分含量(8.580±1.232)与野生型小鼠(10.812±1.244)没有区别(P≥0.05);但是,亚油酸的含量(15.653±0.557),明显(P<0.05)高于野生型小鼠(13.168±0.634),相对含量提高了19%;同时,下游的花生四烯酸(20:4n-6)的含量(12.850±1.479)也明显(P<0.01)高于野生型小鼠(6.871±0.665),相对含量更是提高了87%;转基因肝脏组织的亚油酸(15.962±0.552vs15.200±0.170)和花生四烯酸(12.607±0.623vs11.601±0.492)含量也明显高于野生型小鼠组织(P<0.05).本实验表明,植物fad2基因能够有效地促进转基因小鼠自身生物合成n-6脂肪酸.在国际上首次成功地建立了fad2转基因小鼠的表达模型,为相关疾病的研究奠定了基础.
- 陈青柳青吴至芳王宗义苟克勉
- 关键词：脂肪酸脱氢酶FAD2转基因小鼠油酸亚油酸花生四烯酸
- 稀释液中添加棉子糖对冻融后绵羊精液品质的影响被引量：8
- 2011年
- 本试验目的是研究稀释液中添加不同浓度的棉子糖对冻融后绵羊精液品质的影响。选用10只健康乌珠穆沁种公羊,采集精液经检验合格在37℃下混匀,精液样品平均分成5份,用含有0、5、10、15、20mmol/L的不同浓度棉子糖稀释液稀释。采用0.25mL细管法冷冻,将冷冻后的细管精液置于37℃水浴锅中解冻15s后进行相关指标评价及酶(SOD、GSH、MDA、GSH-Px和CAT)的测定。结果表明,当棉子糖的添加量为15mmol/L时精子活率显著高于对照组(P<0.05),畸形率显著低于对照组(P<0.05),弯尾率显著高于对照组(P<0.05),SOD活力显著提高(P<0.05),MDA也显著低于对照组(P<0.05)。
- 张少华张春香岳文斌曹宁贤任有蛇李志军
- 关键词：稀释液棉子糖绵羊精子
- 山羊MSTN基因打靶载体的构建与鉴定
- 2012年
- 根据绵羊、猪、小鼠和牛的肌肉生长抑制素(MSTN)基因序列设计引物,通过PCR方法扩增了山羊MSTN基因的5'同源臂和3'同源臂,其长度分别为5.2 kb、1.1 kb。在ploxPneo载体的neo基因上游和下游分别插入上述2个同源臂,经PCR、限制性内切酶鉴定及DNA序列测定,证实该载体的2条同源臂包含山羊MSTN基因的相应外显子及其邻近的部分内含子,从而成功构建了山羊ploxP-MSTN打靶载体。
- 刘文娟李袁飞庄波钟部帅王锋
- 关键词：山羊MSTN基因基因打靶
