上海市科学技术发展基金(01JC14018)
- 作品数：9 被引量：55H指数：3
- 相关作者：陈琦于鸿王小刚郭慕依张秀荣更多>>
- 相关机构：复旦大学上海医学院泰州市人民医院复旦大学更多>>
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- 转染Smad3基因的大鼠肾系膜细胞uPA及PAI-1表达的改变被引量：1
- 2008年
- 目的:通过对大鼠肾小球系膜细胞(MsC)转染Smad3基因,观察转染阳性细胞克隆尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)及纤溶酶原激活物抑制因子-1(PAI-1)表达的改变,以进一步阐明转移生长因子-β(TGF-β)介导肾小球硬化发生的作用机制。方法:经脂质体介导将含有Smad3重组表达质粒转染大鼠MsC,用G418筛选及RT-PCR,West-ern blot法鉴定;又分别采用RT-PCR与Western blot法,检测转染阳性细胞克隆uPA及PAI-1表达改变。结果:成功建立高表达Smad3的阳性MsC克隆(Th-8,Th-15),并证实其uPAmRNA及蛋白表达明显降低,而PAI-1 mRNA及其蛋白的表达显著增加。结论:TGF-β可能通过上调Smad3而减少组织内uPA的生成和增加PAI-1的合成,从而促进肾小球硬化的进展。
- 于鸿陈琦刘晔王小刚赵仲华
- 关键词：系膜细胞尿激酶型纤溶酶原激活物纤溶酶原激活物抑制因子-1
- 转染Smad7基因的大鼠肾系膜细胞uPA及PAI-1表达的改变被引量：1
- 2004年
- 目的 通过对大鼠肾小球系膜细胞(mesangial cell,MsC)转染Smad7基因,观察转染阳性细胞克隆uPA及PAI-1表达的改变,以进一步阐明Smad7阻断组织纤维化过程的作用机制。方法 经脂质体介导将含有Smad7重组表达质粒转染大鼠MsC,用G418筛选及RT-PCR、Western blot法鉴定;又分别采用RT-PCR与Western blot法,检测转染阳性细胞克隆uPA及PAI-1表达改变。结果 成功建立高表达Smad7的阳性MsC克隆(S-22、S-26),并证实其uPA mRNA及蛋白表达明显增加,而PAI-1 mRNA及其蛋白的表达显著下降。结论 Smad7可能通过增强组织内uPA酶的生成和减少PAI-1的合成而减轻组织纤维化进展。
- 于鸿王小刚汪怡陈琦张秀荣郭慕依
- 关键词：SMAD7基因UPA尿激酶型纤溶酶原激活物纤溶酶原激活物抑制因子-1
- 转染Smad2基因的大鼠肾系膜细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的改变被引量：1
- 2004年
- 于鸿汪怡王小刚许杰赵仲华张秀荣郭慕依
- 关键词：肾系膜细胞SMAD2转染基因
- IFN-γ对大鼠肾小球系膜细胞Smad7及Ⅳ型胶原表达的影响被引量：2
- 2008年
- 目的为阐明IFN-γ抗纤维化机制及治疗器官纤维化提供理论和实验依据。方法终浓度为10ng/mL的IFN-γ作用MsC不同时间,又分别采用RT-PCR与Western blot法检测各时间点MsCSmad7与Ⅳ型胶原mRNA及蛋白表达情况。结果IFN-γ可显著增加MsC Smad7 mRNA及其蛋白的表达,而明显下调MsC ColⅣmRNA及其蛋白的表达。经Spearman等级相关检验显示Smad7蛋白与ColⅣ蛋白间的变化存在高度负相关性。结论IFN-γ可能通过上调Smad7而减少MsC ColⅣ的生成,从而抑制肾小球硬化进展。
- 姜琳李亮高冉谢国柱陈琦
- 关键词：IFN-Γ系膜细胞SMAD7
- 转染Smad 7基因的大鼠肾系膜细胞基质金属蛋白酶2及其组织抑制因子2表达的改变被引量：45
- 2003年
- 目的 通过对大鼠肾小球系膜细胞 (mesangialcell,MsC)转染Smad 7基因 ,观察转染阳性细胞克隆基质金属蛋白酶 2 (MMP 2 )及其组织抑制因子 2 (TIMP 2 )表达的改变 ,以进一步阐明Smad7阻断肾组织纤维化过程的作用机制。方法 经脂质体介导将含有Smad 7重组表达质粒转染大鼠MsC ,用G4 18筛选及Western印迹分析、逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)法鉴定 ;又分别采用Western印迹分析、酶谱分析法和RT PCR法 ,检测转染阳性细胞克隆MMP 2和TIMP 2表达改变。结果 成功建立高表达Smad 7的阳性MsC克隆 (S 2 2 ,S 2 6 ) ,并证实其MMP 2蛋白分泌和酶活性均明显升高 ,而TIMP 2mRNA及其蛋白的表达则被明显抑制。阳性MsC克隆S 2 2 ,S 2 6细胞分泌MMP 2比对照组高约 3 8倍 (P <0 0 1) ;S 2 2与S 2 6细胞TIMP 2蛋白表达约为对照组 4 8% (P <0 0 5 )。结论 Smad 7可能通过增强肾组织内MMP 2酶活性和抑制TIMP 2的生成而起到减轻肾组织纤维化进展的作用。
- 于鸿王小刚汪怡陈琦张秀荣郭慕依
- 关键词：SMAD7基因肾系膜细胞基质金属蛋白酶2肾组织纤维化
- 转染Smad2基因的大鼠肾系膜细胞纤连蛋白和Ⅳ型胶原表达的改变被引量：4
- 2005年
- 目的 通过对大鼠肾小球系膜细胞(MsC)转染Smad2基因,观察转染的阳性细胞克隆纤连蛋白(FN)及Ⅳ型胶原(ColⅣ)表达的改变,以探讨转化生长因子β(TGF -β) /Smad信号转导通路引起细胞外基质积聚导致肾小球硬化发生的分子机制。方法 经磷酸钙介导将含有Smad2重组表达质粒转染大鼠MsC,用G418筛选及Western印迹分析法鉴定,又分别采用Western印迹分析法和逆转录聚合酶链反应(RT PCR)检测转染阳性细胞克隆FN及ColⅣ表达的改变。结果 成功建立高表达Smad2蛋白的阳性MsC克隆(T -12、T -31、T -35、T -40),并证实其FN及ColⅣ的mRNA和蛋白的表达水平均明显上调。阳性MsC克隆FN蛋白为对照组2. 4倍(P<0. 05),mRNA为对照组的2. 7倍(P<0 .05);阳性MsC克隆ColⅣ蛋白为对照组2 9倍(P<0。01 );mRNA为对照组的3. 3倍(P<0 .01 )。结论 TGF- β/Smad信号转导途径中的Smad2可能是促进FN及ColⅣ在肾小球中积聚,是导致肾小球硬化发生的重要信号转导分子。
- 王小刚于鸿陈琦赵仲华张志刚郭慕依
- 关键词：SMAD2转染FN纤连蛋白
- 转染Smad2基因的大鼠肾系膜细胞MMP-2及TIMP-2表达的改变被引量：4
- 2003年
- 目的 通过对大鼠肾小球系膜细胞(mesangial cell,MsC)转染Smad2基因,观察转染阳性细胞克隆MMP-2和TIMP-2表达的改变,以进一步阐明TGF-β介导肾小球硬化发生的作用机制。方法 经磷酸钙介导将含Smad2重组表达质粒转染大鼠MsC,用G418筛选及Western blot鉴定;又分别采用Western blot、酶谱分析法和RT-PCR法,检测转染阳性细胞克隆MMP-2和TIMP-2表达改变。结果 成功建立高表达Smad2的阳性MsC克隆(T-12、T-31、T-35与T-40),并证实其MMP-蛋白分泌和酶活性明显升高,同时TIMP-2 mRNA及其蛋白的表达也明显上调。结论 TGF-β可能通过上调Smad2而增强肾组织内MMP-2/TIMP-2的表达,从而促进肾小球损伤和硬化的发生发展过程。
- 于鸿王小刚陈琦张秀荣张志刚郭慕依
- 关键词：SMAD2基因MMP-2TIMP-2基质金属蛋白酶组织抑制因子-2
- 转染Smad7基因的大鼠肾系膜细胞MMP-2、uPA及Col Ⅳ表达的改变被引量：1
- 2004年
- 目的 通过大鼠肾小球系膜细胞 (mesangialcell,MsC)转染Smad7基因 ,观察转基因MsCMMP 2、uPA和ColⅣ表达的改变 ,以阐明Smad7在肾小球硬化发生中的作用及其机制。方法 经脂质体介导将含有Smad7重组表达质粒转染大鼠MsC ,用G4 18筛选及Westernblot、RT PCR法鉴定 ;采用Westernblot、酶谱分析和RT PCR法 ,检测转染阳性MsC克隆MMP 2、uPA和ColⅣ表达改变。结果 成功建立高表达Smad7的阳性MsC克隆 (S 2 2 ,S 2 6 ) ,并证实其MMP 2蛋白分泌和酶活性明显增加 ,以及uPAmRNA及其蛋白的表达明显增强 ,并伴有MsCColⅣ合成的显著下降。结论 Smad7可能通过增强MsCMMP 2。
- 于鸿汪怡王小刚陈琦张秀荣郭慕依
- 关键词：大鼠肾系膜细胞MMP-2UPA肾小球硬化
- 转染Smad4基因的人胰腺癌细胞PCNA-1 MMP-2及TIMP-2表达的改变
- 2008年
- 目的观察转染阳性细胞克隆基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)及基质金属蛋白酶组织抑制因子-2(tissue inhibitor of metalloproteinase-2,TIMP-2)表达的改变,以进一步阐明Smad4在胰腺癌侵袭和转移中的作用及机制。方法经脂质体介导将含有野生型Smad4重组表达质粒转染人PCNA-1,用G418筛选及RT-PCR、Western blot法鉴定;采用RT-PCR与Western blot法检测转染阳性细胞克隆MMP-2及TIMP-2表达改变。结果成功建立稳定高表达Smad4的阳性PCNA-1克隆(F-9、F-21)。相对对照组,稳定转染野生型Smad4基因的PCNA-1细胞其MMP-2 mRNA及蛋白(约降低62%)表达明显降低,而TIMP-2 mRNA及蛋白(约增加2.1倍)的表达显著增加。结论转染Smad4基因可抑制胰腺癌细胞的运动和侵袭,在胰腺癌抗转移治疗中可能具有重要作用。
- 于鸿李亮高冉姜琳陈琦
- 关键词：SMAD4基质金属蛋白酶组织抑制因子-2
