上海市卫生系统百名跨世纪优秀学科带头人培养计划(07XD14004)
- 作品数:2 被引量:7H指数:2
- 相关作者:黄国英张颖陈伟呈齐春华谢利剑更多>>
- 相关机构:复旦大学复旦大学上海医学院更多>>
- 发文基金:上海市卫生系统百名跨世纪优秀学科带头人培养计划国家自然科学基金上海市科学技术委员会科研基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 连接蛋白40、45在连接蛋白43基因敲除小鼠胚胎心脏的时空表达被引量:3
- 2009年
- 目的检测连接蛋白(Cx)40、45在Cx43基因敲除小鼠胚胎心脏的时空表达。方法选取Cx43基因敲除胎鼠,通过PCR方法鉴定其基因型,以Cx43基因敲除胎鼠纯合子作为研究对象,野生型为对照组,获取胎龄10.5、11.5、12.5、13.5、14.5、15.5d纯合子及野生型各2只胎鼠,免疫组化检测Cx40、Cx45在心脏各部位的表达,SCIM显微图像分析系统对染色强度进行定量分析。结果(1)野生型小鼠心室原始小梁网在胎龄10.5d就已经有Cx40表达(A值为8.6),随后在心房、心室、小梁网、房室间隔和主、肺动脉壁表达逐日增加,胎龄14.5d在心室部位达到高峰(A值为94.8),然后逐渐减少;Cx43基因敲除小鼠胚胎心脏发育中Cx40在各部位的时空表达趋势与野生型相似,胎龄10.5d在肌小梁A值为7.9,胎龄14.5d心室部位为75.8。纯合基因敲除型胎鼠Cx40的表达量明显弱于野生型。(2)野生型小鼠肌小梁部在胎龄10.5d出现Cx45的表达(A值为20.0),随后在房室各部位相继表达,胎龄12.5d在心房部位达到高峰(A值为49.6),然后表达逐渐减少;Cx43基因敲除小鼠胚胎心脏发育中Cx45在各部位的时空表达趋势与野生型相似,胎龄10.5d在肌小梁A值为17.8,胎龄12.5d心房部位为31.5。纯合基因敲除型胎鼠Cx45的表达量明显弱于野生型。结论Cx40和Cx45在Cx43基因敲除小鼠纯合子胎龄10.5~15.5d这一心脏分隔、瓣膜发育的关键时期表达异常,可能与Cx43基因敲除小鼠心脏的异常发育有关。
- 谢利剑黄国英赵晓睛齐春华彭涛周国民
- 关键词:胎儿心脏连接蛋白43小鼠
- Cx43基因敲除胎鼠心脏近端流出道隔心肌化过程中的关键基因被引量:4
- 2010年
- 目的研究Cx43基因纯合敲除(Cx43-/-)小鼠胚胎心脏近端流出道组织中基因表达谱的改变,筛选可能导致Cx43-/-小鼠流出道梗阻的关键基因。方法以胎龄(embryonic day,ED)14.5的Cx43-/-和野生型(Cx43+/+)鼠胚心脏近端流出道部分为研究对象,分别提取总RNA,逆转录成cDNA,并在体外转录为cRNA,同时进行生物素标记及片段化,再与Affymetrix-430 2.0基因芯片进行杂交。杂交信号经扫描后,应用相关生物信息软件分析基因表达情况。结果与Cx43+/+组相比,Cx43-/-组中表达上调2倍以上的基因共有143个,表达下调2倍以上的基因有235个。其中表达差异的基因参与转录调控、细胞周期、细胞黏附、细胞活动和细胞骨架的信号通路等主要生理过程。进一步筛查表达差异1.5倍以上的基因发现,与圆锥动脉干畸形相关的TGFβ/BMP信号通路上的多个基因以及Ssr1、Ptk2、Bmp6等基因在Cx43-/-组有明显变化。对这些基因进行荧光定量PCR验证,结果与基因芯片一致(P<0.05)。结论利用基因芯片技术初步筛选出与Cx43-/-鼠胚心脏近端流出道发育有关的多个基因,并经荧光定量PCR验证。其中TGFβ/BMP信号通路上的多个基因以及Ssr1、Ptk2、Bmp6等基因可能与Cx43-/-小鼠流出道梗阻的发生有关。
- 陈伟呈张颖黄国英
- 关键词:心脏发育CX43TGFΒBMP