广西大学科研基金(X061060)
- 作品数:1 被引量:4H指数:1
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- 相关领域:生物学更多>>
- 酿酒酵母蔗糖酶基因的克隆、异源表达及重组酶学性质研究被引量:4
- 2008年
- 以酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)基因组DNA为模板,通过PCR扩增得到蔗糖酶基因(suc2),并将其克隆到表达载体pSE380中,将得到的重组质粒pSE-suc2转化进E.coli BL21中,利用镍金属螯合层析方法分析测定其酶学性质。重组菌株的SDS-PAGE结果显示重组蔗糖酶基因(suc 2)有60kDa目的蛋白出现,纯化的SDS-PAGE分析得到均一的蛋白条带;重组蔗糖酶的Km值为47.73mmol/L,最大反应速率为79.59mg还原糖mg-1蛋白min-1,最适温度为42℃,最适pH值为5.5,Zn2+、Cu2+对重组蔗糖酶酶活有较强的抑制作用,Ba2+、Mg2+、Mn2+对重组蔗糖酶酶活稍有激活作用。
- 杜丽琴杨键朱绮霞杨登峰韦宇拓黄日波
- 关键词:蔗糖酶克隆酶学性质