国家公益性行业科研专项(200903055)
- 作品数：2 被引量：5H指数：2
- 相关作者：王刚崔然姚永红肖一红周恩民更多>>
- 相关机构：西北农林科技大学中国农业科学院哈尔滨兽医研究所山东农业大学更多>>
- 发文基金：国家公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 生鲜牛奶中牛分支杆菌PCR检测方法的建立被引量：2
- 2013年
- 为建立生鲜牛奶中牛分支杆菌的PCR检测方法,选择牛分支杆菌pncA的基因序列中一段大小为423bp的片段作为靶序列,设计并合成一对引物,对所建立的PCR方法进行了特异性、敏感性和重复性试验。结果表明,建立的PCR方法在牛分支杆菌污染模型乳中成功扩增出了423bp的特异性目的条带,而分别添加有沙门菌、大肠埃希菌、无乳链球菌、金黄色葡萄球菌、嗜肺巴氏杆菌、铜绿假单胞菌及枯草杆菌的乳样中均未扩增出任何条带。牛分支杆菌的DNA最低检测限为12.18pg/μL,牛分支杆菌污染牛奶模型的敏感性为3cfu/mL。建立的方法可用于牛奶中牛分支杆菌的检测。
- 程亮宁蓬勃张彦明曹伟伟刘伟战仁武
- 关键词：牛分支杆菌聚合酶链反应生鲜牛奶
- 猪圆环病毒2型衣壳蛋白单克隆抗体的制备及鉴定被引量：3
- 2012年
- 为获得猪圆环病毒2型(PCV2)衣壳蛋白单克隆抗体,将516 bp的ORF2基因片段克隆入pET-28a(+),转化入大肠杆菌,在IPTG的诱导下表达,用SDS-PAGE和Western blot对表达产物进行鉴定。将纯化的重组蛋白免疫小鼠,制备单克隆抗体,叠加ELISA方法检测两株单克隆抗体识别的抗原表位关系。SDS-PAGE和Western blot结果表明重组蛋白ORF2得到高效表达;筛选获得两株稳定分泌抗ORF2单克隆抗体的杂交瘤细胞系3H3和3F2,其分泌的单体均为IgG1亚型;且均具有较高的特异性和敏感性;叠加ELISA显示,两株单克隆抗体识别不同的抗原表位。本研究制备的单抗有较好的生物学特性,为PCV2的研究及快速准确诊断方法的建立提供了平台。
- 姚永红崔然赵钦王刚肖一红周恩民
- 关键词：猪圆环病毒2型单克隆抗体
