国家自然科学基金(30370659)
- 作品数：3 被引量：9H指数：2
- 相关作者：陈琪潘超白小明季勇范乐明更多>>
- 相关机构：南京医科大学厦门大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 甘氨酸在细胞ATP耗竭性损伤中的保护作用被引量：4
- 2005年
- 目的:观察甘氨酸(Gly)对ATP耗竭的犬近曲小管上皮细胞(MDCK细胞)的保护作用,探讨其对复能时细胞损伤、增殖及代谢情况的影响。方法:通过正置显微镜观察、四甲基噻唑蓝(MTT)实验、3H鄄TdR掺入实验、乳酸脱氢酶(LDH)释放、台盼蓝活细胞计数,观察ATP耗竭时加入Gly对MDCK细胞的保护作用,及其后细胞复能时对细胞损伤、增殖及代谢情况的影响。结果:ATP耗竭2h后,Gly处理组细胞台盼蓝染色率较耗竭组降低约50%,LDH释放率明显减少,而3H鄄TdR掺入量为耗竭组细胞的3倍以上。复能不同时相,光镜下Gly处理组细胞损伤程度明显减轻,台盼蓝染色率及LDH释放率均显著低于耗竭组,而MTTD值和3H鄄TdR掺入量明显高于耗竭组。结论:甘氨酸对ATP耗竭的MDCK细胞具有保护作用,可增加复能后细胞存活的机会,防止细胞膜通透性增加,提高受损细胞的增殖活性和代谢潜能。
- 白小明潘超范乐明季勇陈琪
- 关键词：甘氨酸
- 甘氨酸受体在肾细胞缺氧保护中的作用研究被引量：4
- 2007年
- 目的明确甘氨酸受体(glycine receptor,GlyR)是否介导甘氨酸对ATP耗竭细胞的保护作用。方法构建甘氨酸受体α1亚单位(GlyRα1)的真核表达载体pcDNA3.1(b),转染入缺乏天然GlyR的人胚胎肾细胞HEK293。化学性缺氧使细胞处于ATP耗竭状态,光学显微镜及电镜观察细胞形态及超微结构改变,LDH释放率、细胞膜对荧光标记复合物通透性反映细胞膜完整性,台盼蓝染色观察细胞活性。结果细胞ATP耗竭3h后,细胞膜通透性明显增加,细胞器结构损伤,大量细胞死亡。甘氨酸明显降低表达GlyR的转染HEK293细胞膜通透性,阻止荧光标记复合物进入细胞内,细胞LDH释放率由59.18±8.10%下降为35.15±2.61%。从而维持细胞形态结构,降低细胞死亡率。对不表达GlyR细胞无保护作用。结论GlyR介导甘氨酸对ATP耗竭细胞的保护作用,增强细胞对ATP耗竭的耐受能力,增加细胞的存活几率。
- 潘超白小明陈琪
- 关键词：甘氨酸甘氨酸受体细胞保护
- 甘氨酸对ATP耗竭诱生性细胞自噬的作用及其机制被引量：2
- 2009年
- 目的:研究甘氨酸(Gly)在ATP耗竭性细胞自噬中的作用及其可能机制。方法:用脂质体转染法将绿色荧光蛋白-微管相关蛋白轻链3(GFP-LC3)质粒导入犬肾细胞(MDCK)中,在倒置荧光显微镜下观察细胞内自噬体的生成。同时收集细胞总蛋白,用Western blot检测LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的表达,并检测AMP激活的蛋白激酶(AMPK)的磷酸化活性改变。结果:MDCK细胞经转染GFP-LC3质粒后,可见细胞浆内散布明显的点状荧光颗粒;转染细胞被剥夺ATP后,发现细胞内自噬体数目明显增多,GFP-LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值明显增高,AMPK的磷酸化水平增强。用甘氨酸处理细胞后,发现自噬体较ATP耗竭组明显减少,GFP-LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值明显降低,细胞AMPK的磷酸化水平也有所降低。结论:ATP耗竭能诱导细胞的自噬性死亡,Gly可抑制ATP耗竭细胞的自噬,其机制可能与AMPK活性受抑有关。
- 秦霞曹剑秋柏惠杨青陈琪
- 关键词：甘氨酸自噬AMPK
