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沈阳市科技计划项目(无)
作品数:
1
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相关作者:
潘子瑶
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李其久
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相关机构:
辽宁大学
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机构
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辽宁大学
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贲松彬
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崔剑
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李其久
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陈长兰
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刘雪梅
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谷海峰
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潘子瑶
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生物技术
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1篇
2013
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PTD-Apoptin原核表达载体构建及可溶性表达
被引量:2
2013年
目的:可溶性表达PTD-Apoptin融合蛋白。方法:亚克隆Apoptin基因并人工合成PTD序列,构建原核表达载体pGEX-6p-1-PTD-Apoptin,使载体在E.coli BL21(DE3)中表达并优化。GST亲和纯化天然状态的融合蛋白,并通过MTT实验验证活性。结果:最佳表达条件是25℃、0.1mmol/mL IPTG过夜诱导表达,经GST亲和纯化得到天然状态的单一组分融合蛋白,与胃癌823细胞共孵育后细胞存活率为10.86%,与对照组相比具显著差异。结论:成功获得高生物活性的原核可溶性表达融合蛋白PTD-Apoptin,使胃癌823细胞存活率降至10.86%。
贲松彬
潘子瑶
刘雪梅
崔剑
谷海峰
李其久
陈长兰
关键词:
APOPTIN
可溶性表达
BL21(DE3)
MTT
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