广州市医药卫生科技项目(2009-YB-174)
- 作品数:3 被引量:4H指数:2
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- 重组质粒pEGFP-Brn-4的构建与鉴定
- 2011年
- 目的构建神经同源盒基因Brn-4真核表达重组质粒。方法从新生SD大鼠脑组织提取总RNA,利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)的方法扩增编码鼠Brn-4的基因片段,应用基因重组技术将鼠Brn-4基因片段克隆到真核表达载体pEGFP-C2中,经BamHI、EcoRⅠ双酶切和单酶切证实所构建的载体。结果 RT-PCR方法获得鼠Brn-4的基因片段,限制性内切酶酶切分析和PCR法鉴定表明为正确重组子。结论新构建的真核表达重组质粒pEGFP-Brn-4通过鉴定,结构正确,为后续研究在神经干细胞中表达及其体内研究奠定了基础。
- 陈艳方继荣宣爱国
- 关键词:真核表达载体基因重组
- Brn-4基因修饰骨髓间质干细胞移植对老年痴呆鼠学习记忆的影响被引量:2
- 2012年
- 目的探讨Brn-4基因修饰大鼠骨髓间质干细胞(MSC)移植后对老年痴呆鼠学习记忆的影响。方法实验分为3组:正常组、模型组和移植组。以单侧切断穹隆海马伞(FF)建立老年性痴呆模型鼠;应用脂质体将表达载体转染到MSC中,荧光显微镜观察该Brn-4基因在MSC中的表达;将成功转染Brn-4基因修饰的MSC植入模型鼠尾静脉,4 w后行Y迷宫测试,并行免疫组化结合图像分析技术观察各组大鼠基底前脑p75阳性神经元数,同时采用电生理技术检测离体海马CA1区长时程增长效应(LTP)的诱导变化。结果 Brn-4基因在MSC中获得成功表达;免疫组化表明模型组大鼠p75阳性神经元数在内侧隔阂和斜角带较正常组明显下降(P<0.01);移植组p75阳性神经元数较模型组有改善(P<0.05)。离体海马CA1区移植组LTP在移植后6 d,12 d,30 d均较模型组有显著增强(P<0.05)。Y迷宫测试结果显示,大鼠的学习记忆能力与基底前脑p75阳性神经元数呈正相关。结论 Brn-4基因修饰MSC移植后提高了老年痴呆鼠学习记忆能力。
- 陈艳宣爱国方继荣
- 关键词:骨髓间质干细胞老年痴呆学习记忆
- 危重患者氨基末端脑钠肽与无创血流动力学参数相关性及预后价值被引量:2
- 2014年
- 氨基末端脑钠肽(NT-ProBNP)已成为心力衰竭筛查、诊断、治疗的敏感指标〔1,2〕。血流动力学监测可以早期测得危重患者血流动力学异常,指导治疗。目前临床上主要方法为肺动脉漂浮导管法(PAC)。PAC技术要求高,并发症多,费用昂贵。胸阻抗无创血流动力学(TEB)具有无创、操作简便、可动态连续监测等优点,目前临床应用较多。本研究旨在通过探讨重症监护病房(ICU)
- 陈艳李风雷方继荣
- 关键词:氨基末端脑钠肽血流动力学