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国家自然科学基金(30901586)

作品数:7 被引量:16H指数:2
相关作者:马丁王世宣廖书杰胡晓继韩凌斐更多>>
相关机构:华中科技大学广州军区武汉总医院华中科技大学同济医学院附属同济医院更多>>
发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划中华医学会临床医学科研专项资金更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 7篇中文期刊文章

领域

  • 7篇医药卫生

主题

  • 3篇疫苗
  • 3篇乳头
  • 3篇瘤病毒
  • 2篇人乳
  • 2篇乳头状
  • 2篇乳头状瘤
  • 2篇乳头状瘤病
  • 2篇乳头状瘤病毒
  • 2篇肿瘤
  • 2篇基因
  • 2篇宫颈
  • 1篇蛋白
  • 1篇蛋白质
  • 1篇蛋白质类
  • 1篇蛋白质疫苗
  • 1篇毒性
  • 1篇性健康
  • 1篇疫苗预防
  • 1篇载体疫苗
  • 1篇真核

机构

  • 5篇华中科技大学
  • 1篇广州军区武汉...
  • 1篇华中科技大学...

作者

  • 4篇马丁
  • 4篇王世宣
  • 3篇廖书杰
  • 2篇卢运萍
  • 2篇韩凌斐
  • 2篇胡晓继
  • 1篇王恬
  • 1篇吴章颖
  • 1篇张维娜
  • 1篇蒋学峰
  • 1篇夏曦
  • 1篇廖术杰
  • 1篇周志刚
  • 1篇陶涛
  • 1篇王常玉
  • 1篇杨润峰
  • 1篇王薇
  • 1篇董红
  • 1篇高纯
  • 1篇陈刚

传媒

  • 2篇中华妇产科杂...
  • 1篇中华医学杂志
  • 1篇河北医科大学...
  • 1篇华中科技大学...
  • 1篇Journa...
  • 1篇医学分子生物...

年份

  • 1篇2020
  • 1篇2019
  • 1篇2013
  • 1篇2012
  • 1篇2011
  • 1篇2010
  • 1篇2009
7 条 记 录,以下是 1-7
排序方式:
人乳头瘤病毒18型E7多肽联合CpG制备疫苗及其体外效应研究被引量:1
2012年
目的用SYFPEITHI数据库筛选针对HIA-A2的人乳头瘤病毒(HPV)18E7抗原表位多肽联合CpG制备HPV18疫苗。方法(1)利用生物信息学平台预测和筛选HPV18E7蛋白的HLA-A2抗原结合表位。(2)收集HLA-A2和HPV18阳性/阴性的病人/志愿者外周血和相应的肿瘤组织标本,并将这些标本随机分为7组:ETPA+CpG、E7PB+CpG、E7PC+CpG、E7PD+CpG、CpG、IRT+CpG及对照组。利用MTT比色法检测各组不同时间段的T细胞增殖效应;利用乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测人外周血淋巴细胞(PBMC)在不同效靶比下对肿瘤细胞的细胞毒活性;利用酶联免疫斑点测定法(ELISPOT)检测外周血中分泌IFN-γ的T细胞水平。结果(1)筛选出一致性较高,特异性及亲和力较强,综合评分前4位的4段多肽作为研究对象,分别命名为E7PA,E7PB,ETPC,E7PD。(2)各实验组中T细胞较对照组增殖明显(P〈0.05),在接种疫苗后不同时间点连续观察中以E7PA+CpG组增殖效应最为突出;LDH释放实验示:效靶比为100:1时,E7PA+CpG组与对照组相比,差异有统计学意义(P〈0.01),且效靶比呈明显的浓度依赖性。而除IR-T+CpG组外其余各组较对照组差异有统计学意义(P〈0.05),但组间差异无统计学意义;外周血中分泌IFN-γ的T细胞在E7PA组激活最明显,与对照组比差异有统计学意义(P〈0.01);E7PA+CpG组在HPV18阳性组中可引起大量的T细胞分泌IFN-γ,与其他组相比差异有统计学意义(P〈0.05)。结论HPV18E7PA联合CpG可以在体外激活特异性的细胞免疫,是治疗HPV18相关疾病的有效靶点。
廖书杰张维娜胡晓继蒋学峰王常玉卢运萍王世宣马丁
关键词:人乳头瘤病毒宫颈肿瘤疫苗
人乳头状瘤病毒16型多肽疫苗的制备及体内外效应观察被引量:2
2009年
目的探讨人乳头状瘤病毒(HPV)16型多肽疫苗的制备,并观察HPV16多肽疫苗的体内外效应。方法(1)针对抗原加工相关转运子(TAP)设计HPV16E7蛋白的主要组织相容性复合物I类分子(MHC—I)的抗原结合表位,利用生物信息学分析平台筛选出一致性较高、特异性及亲和力较强的HPV16E7多肽作为研究对象制备HPV16多肽疫苗用于以下研究,本研究共筛选出3段多肽,分别命名为E7Pa、E7Pb、E7Pc。(2)C57BL/6小鼠注射鼠肺上皮细胞株TC-1细胞(为鼠源性的HPV16阳性的肿瘤细胞株)后,采用等额抽取的随机方法分为5组,E7Pa+二核苷胞嘧啶(CpG)、E7Pb+CpG、E7Pe+CpG[均为实验组,分别加入终浓度为50μg/ml的E7Pa、E7Pb、E7Pc和终浓度为12mg/L的刀豆蛋白(ConA)]、CpG(为阳性对照,加入终浓度为12mg/L的ConA)和空白对照组(不做任何处理)。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测各组作用不同时间后小鼠脾T淋巴细胞的体外增殖效应,乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测小鼠脾T淋巴细胞在不同效靶比下的体外细胞毒T淋巴细胞(CTL)活性,实时荧光定量RT—PCR技术检测小鼠肿瘤组织中1干扰素(IFN-γ)、白细胞介素2(IL-2)mRNA的表达水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠外周血中IFN-γ、IL-2的表达水平,通过定期测量比较各组小鼠接种HPV16多肽疫苗后体内肿瘤体积的变化。结果(1)本研究筛选出了一致性较高、特异性及亲和力较强的3段HPV16E7多肽作为研究对象制备HPV16多肽疫苗,分别命名为E7Pa、E7Pb、E7Pe。(2)MTT比色法检测显尔,在接种疫苗24、48、72、96h后,以E7Pa+CpG组的增殖效应最明显,其细胞增殖率分别为(131±32)%、(302±15)%、(552±28)%、(731±24)%,明显高于空白对照组的(72±15)%、(120±57)%、(176±41)%、(288±29)%(P〈0.01);E
廖书杰胡晓继韩凌斐蒋学峰夏曦王薇卢运萍王世宣马丁
grp78真核表达载体构建及其稳定转染HeLa细胞系建立
2011年
目的构建人grp78基因真核表达载体,并建立稳定高表达grp78的人宫颈癌HeLa细胞系。方法用RT—PCR方法从人宫颈癌HeLa细胞中扩增grp78基因编码区,将PCR产物克隆到pcDNA3.1(+)真核表达载体,构建重组质粒pcDNA3.1(+)/grp78并测序鉴定。用构建成功的pcDNA3.1(+)/grp78真核表达载体转染入人宫颈癌HeLa细胞,经G418筛选获得grp78稳定高表达的HeLa细胞系,并用RT—PCR及Western印迹方法鉴定。结果成功构建pcDNA3.1(+)/grp78真核表达载体,筛选获得稳定高表达人grp78的HeLa细胞系。结论grp78真核表达载体的成功构建和稳定高表达grpTS的HeLa细胞系的建立为进一步研究grp78的功能奠定了基础。
王恬陶涛杨润峰吴章颖李伟廖书杰王世宣
关键词:转染
携带小鼠HVEM的重组腺相关病毒载体的构建及鉴定被引量:1
2010年
目的克隆小鼠疱疹病毒侵入介体(HVEM)基因,构建其重组腺相关病毒载体,鉴定目的基因在真核细胞中表达。方法用RT-PCR法从小鼠脾脏淋巴细胞克隆出全长HVEM基因,构建携带HVEM基因的穿梭质粒pAAV-IRES-HVEM-hrGFP和辅助质粒pAAV-RC及pAAV-Helper,利用磷酸钙共沉淀法将穿梭质粒共转染入AAV-293细胞中,采用细胞内质粒DNA同源重组法构建重组腺相关病毒rAAV-HVEM。用氯仿-PEG8000法纯化病毒,实时荧光定量PCR测病毒滴度。RT-PCR检测rAAV-HVEM在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中的表达情况。结果成功构建组装重组小鼠HVEM腺相关病毒,纯化后病毒滴度为5×1010v.g/mL,且在CHO转导细胞中能有效表达目的基因。结论构建的重组腺相关病毒载体rAAV-HVEM为组织工程相关细胞转基因构建及临床应用提供先进的载体系统,为今后进一步研究HVEM的功能及其在部分疾病基因免疫治疗中的应用奠定基础。
马衣努尔.买提托合提韩凌斐廖术杰周志刚董红马丁王世宣
关键词:腺相关病毒基因治疗
HPV16 E5 Peptide Vaccine in Treatment of Cervical Cancer In Vitro and In Vivo被引量:2
2013年
Human papillomavirus(HPV)-induced cervical cancer is the second most common cancer among women worldwide. Despite the encouraging development of the preventive vaccine for HPV, a vaccine for both prevention and therapy or pre-cancerous lesions remains in high priority. Thus far, most of the HPV therapeutic vaccines are focused on HPV E6 and E7 oncogene. However these vaccines could not completely eradicate the lesions. Recently, HPV E5, which is considered as an oncogene, is getting more and more attention. In this study, we predicted the epitopes of HPV16 E5 by bioinformatics as candidate peptide, then, evaluated the efficacy and chose an effective one to do the further test. To evaluate the effect of vaccine, rTC-1(TC-1 cells infected by rAAV-HPV16E5) served as cell tumor model and rTC-1 loading mice as an ectopic tumor model. We prepared vaccine by muscle injection.The vaccine effects were determined by evaluating the function of tumor-specific T cells by cell proliferation assay and ELISPOT, calculating the tumor volume in mice and estimating the survival time of mice. Our in vitro and in vivo studies revealed that injection of E5 peptide+CpG resulted in strong cell-mediated immunity(CMI) and protected mice from tumor growth, meanwhile, prolonged the survival time after tumor cell loading. This study provides new insights into HPV16 E5 as a possible target on the therapeutic strategies about cervical cancer.
廖书杰邓东锐曾丹张玲胡晓继张维娜李莉蒋学峰王常玉周剑锋王世宣章汉旺马丁
关键词:HPV16疫苗预防乳头状瘤病毒肿瘤模型
子宫颈癌HPV疫苗的研究现状被引量:7
2019年
子宫颈癌是威胁女性健康的常见妇科恶性肿瘤之一,持续性高危型HPV感染与子宫颈癌的发生、发展密切相关,通过免疫治疗途径相继出现了预防性和治疗性HPV疫苗。迄今,已有3种预防性HPV疫苗得到批准并广泛使用,均显示出高效性和安全性,但无法消除已经存在的HPV感染;治疗性HPV疫苗的研发也已取得了新的进展,包括活载体疫苗、多肽和蛋白质疫苗、核酸疫苗以及细胞疫苗等。这些疫苗具有巨大的治疗潜力,但仍处于基础研究和临床试验阶段,实际应用有限。本文回顾了子宫颈癌HPV疫苗的研究进展和应用情况,总结各种疫苗的优点和不足之处,分析疫苗的应用前景,旨在为中国人研发原创型子宫颈癌HPV疫苗奠定基础。
王仁杰李悦含耿玉笛高纯陈刚汪辉靳镭马丁廖书杰
关键词:HPV疫苗子宫颈癌HPV感染活载体疫苗蛋白质疫苗女性健康
M-Learning-LCPT-TDPC教学方法在妇产科教学中的应用和思考被引量:3
2020年
随着大数据时代来临,医疗行业对具备综合素质人才的需求不断扩大。当前高等教育中运用传统的教师授课模式,这种方法存在学生学习被动、记忆欠深刻、运用不够灵活等弊端。当前“以学生为中心”的教学导向是目前国内外医学教育改革的新趋势[1]。为满足医疗行业对人才的需求,现整合网络共享资源课、LCPT综合教学法(Lecture-Based Learning、Case-Based Learning、Problem-Based Learning、Team-Based Learning)、山东昌乐二中首创的“271教学模式”多种方法[2],将妇产科教学过程分为课前进行Mobile Learning(M-Learning)、课中运用LCPT方法授课、课后进行TDPC(Test-Discuss-Practice-Contest)模式巩固3个环节,进一步提升妇产科教学水平和帮助学生更扎实灵活的掌握临床知识。
吴迪王仁杰孟娟冯玲靳镭廖书杰
关键词:教学方法卫生教育高等教育
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