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Preparation and characterization of PEG-PEI/Fe_3O_4 nano-magnetic fluid by co-precipitation method被引量：11: 2008年; PEG-PEI/Fe3O4 nano-magnetic fluids with different mass fractions of reactant were prepared by co-precipitation method. Besides particle size analyzer,the methods of XRD,IR,VSM and AFM were adopted to characterize the synthesized samples. Covalent bonding of PEG,PEI and Fe3O4 exhibits superparamagnetism.The TEM photograph shows that the particles are of stable dispersion and little aggregation,with smooth surface,spherical shape and a diameter of about 80 nm,which meets the requirements of nano-materials.When the mass fraction of PEI in reactant is 25%,the particle size,Zeta-potential and pEGFP-C1 DNA loading efficiency are all satisfactory.In this case,PEG-PEI/Fe3O4 nano-magnetic fluids can be used as gene vectors or targeted drug carriers.; 彭健邹芬刘路唐亮余丽陈伟刘辉唐静波邬力祥; 关键词：氧化铁纳米磁性流体

纳米磁流体介导的重组质粒PEGFP-AFP-hTNFα对肝癌细胞HepG2的体外杀伤作用被引量：3: 2008年; 目的探讨纳米磁流体作为肝癌基因治疗载体的可行性及AFP增强子能否使外来基因在AFP阳性细胞内高表达。方法构建重组质粒PEGFP-AFP-hTNFα并通过纳米磁流体分别转染入AFP表达阳性的肝癌细胞HepG2及AFP表达阴性的宫颈癌细胞Hela。转染12h后,于荧光显微镜下动态观察;48h后,RT-PCR和Westernblot分析HepG2细胞中hTNFα基因的表达情况,用MTT法检测HepG2细胞的存活,用流式细胞分析HepG2细胞的凋亡。结果纳米磁流体能将重组质粒PEGFP-AFP-hTNFα转入HepG2细胞,并且其转染效率高于脂质体;RT-PCR及Westernblot证明转染的HepG2细胞有hTNFα基因的表达;MTT及流式细胞分析说明hTNFα基因发挥杀伤细胞作用。结论纳米磁流体能将重组质粒PEGFP-AFP-hTNFα转染HepG2细胞并获得表达,可作为肝癌基因治疗的基因载体。采用AFP增强子可使目的基因在HepG2细胞中定向而特异性表达。; 彭健曾杰刘美洲邹芬刘路汤伟周健; 关键词：肝癌

PEG-PEI/Fe_3O_4纳米磁流体-TK对裸鼠移植性肝癌细胞靶向杀伤作用研究被引量：4: 2008年; 目的研究PEG-PEI/Fe3O4纳米磁流体-TK对人肝癌细胞系SMMC-7721裸鼠移植瘤模型的靶向性治疗作用。方法建立人原发性肝癌裸鼠皮下移植瘤模型,将荷瘤裸鼠随机分成肿瘤对照组、纯自杀基因组、PEG-PEI/Fe3O4纳米磁流体-TK组3组。对照组不作任何处理,实验组于瘤体内分别直接注射纯自杀基因、PEG-PEI/Fe3O4纳米磁流体-TK,同时于裸鼠腹腔内注射GCV,观察不同时段皮下肿瘤的生长情况并做病理学检查,免疫组化法检测肿瘤微血管密度(MVD)以及血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达量,原位末端标记(TUNEL)法检测细胞原位凋亡。同时,用RT-PCR检测肿瘤鼠心,肝,肾的自杀基因表达情况。结果裸鼠皮下成瘤率100%;研究PEG-PEI/Fe3O4纳米磁流体-TK组的肿瘤体积、血清AFP含量、肿瘤MVD和VEGF表达强度均明显低于对照组、纯自杀基因组(P<0.05),细胞凋亡指数都明显高于后两组(P<0.05),可见较多的凋亡细胞。RT-PCR测示肿瘤鼠心,肝,肾未见自杀基因表达,而肿瘤细胞则出现自杀基因表达。结论PEG-PEI/Fe3O4纳米磁流体-TK可显著抑制肿瘤的生长,并对肿瘤治疗具有靶向性,是一种较为理想的肝脏肿瘤靶向给药系统,有望成为治疗原发性肝癌的新型生物制剂之一。; 彭健刘桦刘路汤伟王荣兵陈伟曾杰邹芬周健; 关键词：肝癌自杀基因靶向性治疗

改良法制备5-氟尿嘧啶磁性纳米脂质体被引量：2: 2008年; 目的探讨5-氟尿嘧啶磁性纳米脂质体（MNLF）的最佳制备方法，并观察其理化性能。方法采用正交设计对筛选出的制备工艺进行优化，以磁性脂质体的包封率和粒径分布为指标综合评价，以药物与磷脂的比例、表面活性剂的浓度及油水相的比例、冻融温度等为考察指标，分析了不同制备方法对脂质体性质的影响。最后选用逆向蒸发法结合冻融法制备MNLF，最佳方案为A3B3C2D2及蛋黄卵磷脂（PC）：去氧胆酸钠（SD）为10：1，冷冻温度为-10℃，以包封率、外观、粒径变化、渗漏率、胶体ζ电位和pH值等为评价指标，对MNLF的物理化学稳定性进行研究。结果制备的MNLF的平均粒径为450ntn，平均包封率为69．5％，ζ电位为-39．0mV，pH值为6．91，有较好的稳定性，磁响应性好。结论以改良的逆相蒸发法＋冻融法制备的MNLF粒径小、包封率高、磁响应性好。; 彭健刘路刘鑫谭亮丁诚王荣兵刘辉邬力祥; 关键词：5-氟尿嘧啶磁性脂质体

磁性阳离子纳米脂质体的制备及其性能表征: 2008年; 目的探讨磁性阳离子纳米脂质体的制备方法及其性能特征。方法采用薄膜分散法制备磁性阳离子纳米脂质体,并且对其形貌、粒径、磁场响应性、细胞毒性进行表征。结果薄膜分散法制备磁性阳离子纳米脂质体方法简单易行,制备的磁性阳离子纳米脂质体的形貌呈球形,平均粒径为98nm;且具有超顺磁性,在水溶液中的磁场响应性能良好;MTT实验表明磁性阳离子纳米脂质体是毒性较小的基因转染载体。结论薄膜分散法制备的磁性阳离子纳米脂质体粒径小、分布均匀、细胞毒性小,将可作为肝癌基因治疗一种理想的非病毒转染载体。; 彭健汤伟刘路谭亮王荣兵陈伟周健; 关键词：肝癌基因治疗基因转染

5-氟尿嘧啶磁性纳米脂质体在大鼠肝癌模型体内的靶向分布被引量：14: 2007年; 目的经肝动脉给予5-氟尿嘧啶磁性纳米脂质体(MNLF),研究其在大鼠肝癌模型体内的分布。方法建立肝癌大鼠模型,随机分为3组,经肝动脉给药,A组予5-Fu溶液、B组予MNLF、C组予MNLF肿瘤区加磁场,高效液相色谱仪测量给药半小时后各组织的药物浓度,并比较不同给药方式下各组织药物浓度及肝肿瘤与各组织药物浓度比值;肝肿瘤与正常肝组织进行病理切片观察在磁场作用下,MNLF经肝动脉给药的肝肿瘤靶向性。结果经肝动脉给药30min后,C组肝肿瘤部位药物浓度较A及B组明显升高,而心、肺、肠、肾和脾等肝外组织及正常肝组织药物浓度较后2组低,肝肿瘤的药物选择指数显著升高,B组肝肿瘤的药物选择指数亦较A组升高,差异均有显著性(P<0.01)。结论MNLF经肝动脉给药并配合外加磁场治疗肝肿瘤,具有明显的肿瘤靶向性,非靶器官分布明显减少;在不加磁场情况下,MNLF对肝肿瘤仍具有一定的靶向性,但较加磁场情况下选择性降低。; 彭健刘鑫王荣兵刘路邬力祥; 关键词：药物载体靶向性

纳米磁靶向药物载体在肝癌治疗中的研究进展被引量：11: 2008年; 纳米磁靶向药物载体作为一种新型药物载体,能在特定的导向机制下,将药物高效的运输到靶器官,使药物在局部发挥作用,大大地降低了药物对全身的毒副作用。该文综述了磁性纳米微粒的现状及其在磁性靶向药物传递中作为药物载体在肝癌治疗中的应用研究进展。; 彭健刘桦邬力祥; 关键词：肝癌

PEG-PEI/Fe_3O_4纳米磁流体-TK对肝癌细胞HepG2凋亡的影响: 2009年; 目的:探讨PEG-PEI/Fe3O4纳米磁流体-TK对肝癌细胞HepG2凋亡的影响。方法:构建重组质粒PEGFP-AFP-TK并通过纳米磁流体分别转染入AFP表达阳性的肝癌细胞HepG2及AFP表达阴性的肝癌细胞SMMC7721。转染12h后,于荧光显微镜下动态观察;48h后,RT-PCR和Western blot分析HepG2细胞中HSV-TK基因的表达情况,用MTT法检测HepG2细胞的存活,用流式细胞分析HepG2细胞的凋亡。结果:纳米磁流体能将重组质粒PEGFP-AFP-TK转入HepG2细胞,并且其转染效率高于脂质体;RT-PCR及Western blot证明转染的HepG2细胞有HSV-TK基因的表达;MTT及流式细胞分析说明HSV-TK基因发挥杀伤细胞作用。结论:纳米磁流体能将重组质粒PEGFP-AFP-TK转染HepG2细胞并获得表达,PEG-PEI/Fe3O4纳米磁流体-TK可显著抑制HepG2细胞增殖,可望成为肝癌基因治疗的新型生物制剂之一。; 吴凯张阳德罗勇彭健; 关键词：TK基因肝癌基因治疗

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中国博士后科学基金(20060390884)

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