广东省医学科学技术研究基金(A2009763)
- 作品数：16 被引量：123H指数：7
- 相关作者：张秀明王伟佳温冬梅欧阳能良阚丽娟更多>>
- 相关机构：中山大学中山大学附属第一医院南方医科大学南方医院更多>>
- 发文基金：广东省医学科学技术研究基金中山市科技局资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 耐药表皮葡萄球菌生物被膜形成前、后差异蛋白表达的分析被引量：3
- 2013年
- 目的探讨耐药表皮葡萄球菌生物被膜形成前、后差异蛋白的表达。方法将耐药表皮葡萄球菌分为药物处理组(用400μg/mL鞣酸处理)和对照组(用生理盐水处理),观察菌落生长情况,并采用快速银染法鉴定药物作用前、后生物被膜的形成;用CRA平板法检测药物作用前、后,表皮葡萄球菌产生细胞间多糖黏附因子(PIA)的能力。用双向电泳技术对细菌总蛋白进行分离,并对差异蛋白点进行高效液相色谱-芯片/质谱(HPLC-Chip/MS)鉴定。结果与对照组比较,药物处理组表皮葡萄球菌菌落数明显减少(P<0.01),PIA生成能力减弱,生物被膜的形成被抑制。通过电泳分离,共得到19个差异表达的蛋白分子,其中13个仅在药物处理组表达升高,有6个仅在对照组表达升高。结论生物被膜形成是表皮葡萄球菌耐药的主要途径,差异蛋白在生物被膜的形成中可能起到关键作用。
- 王伟佳张秀明
- 关键词：蛋白质组学生物被膜
- 化学发光免疫法检测B型利钠肽的检测限值和功能灵敏度研究被引量：4
- 2011年
- 目的探讨西门子ADVIA Centaur 240化学发光免疫系统检测B型利钠肽（BNP）的检测限值和功能灵敏度。方法参照美国临床实验室标准化协会（CLSI）EP-17A文件和有关文献，选择BNP通用稀释液作为空白标本，批内重复测定10次，计算光量子值的均数、标准差和变异系数（CV），用以确定检测低限（LLD）；同时，空白标本每天上、下午各检测1批，每批重复检测3次，连续检测5d，共获得30个空白结果，用非参数方法确定空白限（LoB）。制备接近1～4倍LoB浓度的系列实验标本，各浓度每天上、下午各检测1次，连续检测5d，计算每个浓度水平光量子值的均数、标准差和CV，用以确定生物检测限（BLD）和CV值为10％条件下的功能灵敏度（FS）；同时对所有80个测定结果，按EP-17A文件采用非参数方法确定检出限（LoD）。结果ADVIA Centaur 240检测系统BNP的LLD为1．47pg／mL，LoB为0．86pg／mL，均低于厂家声明的灵敏度；BLD为3．27～3．71pg／mL，LoD为3．54pg／mL，10％CV条件下的FS为4．64pg／mL。结论厂商声明的LLD和BLD得到验证，同时建立了实验室BNP检测的LoB、LoD和FS，为临床提供了准确、可靠的检验结果。建议临床实验室使用EP-17A文件确定LoB和I．oD，并确定在一定精密度条件下的FS。
- 李飞王伟佳温冬梅索明环欧阳能良严海忠阚丽娟张秀明
- 关键词：利钠肽化学发光测定法免疫测定
- 化学发光免疫法检测BNP的分析测量范围和临床可报告范围研究被引量：6
- 2011年
- 目的 研究化学发光免疫法检测B型钠尿肽（BNP）的分析测量范围（AMR）和临床可报告范围（CRR）.方法 参照美国临床和实验室标准化研究院（CLSI）发布的EP6-A文件要求制备实验样品,每个样品在西门子ADVIA Centaur化学发光免疫分析系统上重复测定2次,利用多项式回归法确定BNP的分析测量范围;通过稀释回收试验确定最大稀释度,结合功能灵敏度和分析测量范围上限确定临床可报告范围.结果 ADVIA Centaur化学发光免疫分析系统的分析测量范围为2.0～5 094 pg/ml,临床可报告范围为2.5～10 188 pg/ml.结论 厂商声明的ADVIA Centaur化学发光免疫系统检测BNP的分析测量范围得到验证确认,但对于超过分析测量范围的高值标本建议用生理盐水做1∶2稀释.
- 严海忠王伟佳张秀明温冬梅欧阳能良李飞阚丽娟索明环
- 关键词：B型钠尿肽化学发光免疫测定法分析测量范围临床可报告范围
- 降钙素原检测在感染性疾病诊断中的干扰研究被引量：24
- 2013年
- 目的探讨降钙素原(PCT)检测在感染性疾病诊断中潜在的干扰因素,为临床医师合理分析检验结果及正确使用抗菌药物提供依据。方法采用美国临床实验室标准化研究所(CLSI)颁布的EP15-A2文件验证PCT常用检测仪器"电化学发光免疫检测系统Roche Cobas E601"对PCT检测的精密度和准确度,评价由于仪器本身原因造成的检测结果偏离;然后对患者标本在不同标本采集管和不同放置时间的检测结果进行对比分析,并采用EP7-A2文件探讨内源性干扰物对标本PCT检测的干扰,评价由于标本不合格造成的检测结果偏离;最后,在保证仪器运行及标本采集均符合要求情况下,对214例正常体检人群、血培养阳性早期脓毒症患者及血培养阴性、白细胞、C反应蛋白无明显升高的慢性心衰患者样本中PCT进行检测,探讨由于患者自身因素造成的检测结果干扰。结果 Cobas E601对PCT检测具有良好的重复性,总不精密度<3.59%,与定值校准品的偏差<3.38%,符合临床检测10.00%的要求;EDTA抗凝管检测PCT结果最为稳定(CV总=6.37%),可室温稳定保存至少24h;血红蛋白(2g/L)、直接胆红素(428μmol/L)、血乳糜(2000FIU)不会对PCT的检测造成影响;脓毒症患者、慢性心力衰竭患者及正常人群3组样本间PCT水平差异有统计学意义(P<0.05),早期脓毒症患者PCT水平最高(77.37±59.83)ng/ml,再者为慢性心力衰竭患者(14.56±10.26)ng/ml,正常对照组无明显升高(0.04±0.01)ng/ml。结论 PCT的检测仪器性能应符合临床要求,虽然检测仪器具有较强的抗干扰能力,但在评价合并有慢性心力衰竭的感染性疾病时,应客观分析PCT的诊断价值。
- 王伟佳张秀明阚丽娟徐全中欧阳能良
- 关键词：降钙素原感染性疾病
- ADVIA Centaur化学发光免疫分析系统检测B型钠尿肽的性能评价被引量：1
- 2011年
- 目的评价ADVIA Centaur化学发光免疫分析法(CLIA)检测B型钠尿肽(BNP)的分析性能。方法参考美国临床和实验室标准协会(CLSI)发布的方法学评价系列文件(EP文件)及有关文献,对西门子公司ADVIA Centaur CLIA系统检测BNP的精密度、空白限(LoB)、检出限(LoD)、功能灵敏度(FS)、分析测量范围(AMR)、最大稀释度和临床可报告范围(CRR)以及胆红素、Hb和乳糜对分析的干扰进行全面系统地评价,比较肝素抗凝管、EDTA抗凝管、分离胶管和血清管4种不同标本类型及放置不同时间对BNP测定的影响,并对单纯心力衰竭(心衰)患者和急性脑梗死合并心衰患者的血浆BNP和血清NT-proBNP浓度进行检测,观察二者在不同疾病状态下的相关性。结果 ADVIA Centaur CLIA系统检测BNP的批内不精密度(批内CV)和总CV分别为1.1%～2.3%和2.3%～3.6%,LoB、LoD和FS分别为0.86、3.61和4.64 pg/mL,AMR为4～5 094 pg/mL,最大允许稀释度为1∶2,CRR为5～10 188 pg/mL,胆红素(428μmol/L)、Hb(2 g/L)和乳糜(2 200 FIU)对BNP测定无干扰;单纯心衰患者BNP与NT-proBNP的检测结果有良好的相关性(P<0.001),而急性脑梗死合并心衰患者二者无明显相关(P>0.05)。结论西门子公司ADVIA Centaur CLIA系统检测BNP的主要分析性能达到厂商声明的性能和有关的质量要求,建立的LoD、FS、最大稀释度和CRR可为临床提供更好的质量保证,但在急性脑梗死合并心衰患者BNP与NT-proBNP的变化不一致,在临床应用时应引起重视。
- 李飞王伟佳温冬梅张秀明
- 关键词：化学发光免疫分析法B型钠尿肽心力衰竭
- 应用CLSI EP15-A2文件评价BNP和NT-proBNP测定的精密度性能被引量：17
- 2011年
- 目的评价西门子ADVIA Centaur化学发光免疫系统检测B型利钠肽(BNP)和罗氏Cobas E601检测N末端B型利钠肽原(NT-proBNP)的精密度性能。方法使用美国临床与实验室标准化协会(CLSI)EP15-A2文件,选用5个不同浓度的BNP和NT-proBNP样本,每个样本每天批内重复测定4次,持续5天,计算批内不精密度(批内CV)和总不精密度(总CV),并与厂商声明的不精密度进行比较。结果 BNP浓度为30.6、70.3、452.2、1069.4、1736.8pg/mL时批内CV分别为2.3%、1.7%、1.8%、1.3%、1.1%,总CV分别为3.5%、3.2%、2.7%、2.6%、2.3%,均低于厂家声明的不精密度;NT-proBNP浓度为72.9、123.9、466.8、2123.9、4322.0pg/mL时批内CV分别为2.2%、1.3%、1.9%、1.2%、1.1%,总CV分别为2.9%、1.9%、2.3%、1.8%、1.5%,NT-proBNP浓度为72.9pg/mL时的不精密度虽高于厂商声明的不精密度,但小于经计算得到的验证值,说明与厂家声明的不精密度无差异,其他浓度均低于厂家声明的不精密度。结论化学发光免疫法测定BNP和电化学发光免疫法测定NT-proBNP测定的精密度性能良好,可满足临床要求。应用EP15-A2文件验证厂商声明的不精密度性能操作简便,经济实用。
- 欧阳能良王伟佳李飞阚丽娟索明环严海忠温冬梅张秀明
- 关键词：化学发光免疫测定法
- 电化学发光免疫法检测NT—proBNP的分析性能评价被引量：9
- 2011年
- 目的 评价电化学发光免疫法检测NT-proBNP的分析性能.方法 参考CLSI发布的方法学评价系列文件,对Roche Cobas E601电化学发光免疫系统检测NT-proBNP的精密度、正确度、空白限（LoB）和检出限（LoD）、功能灵敏度（FS）、分析测量范围（AMR）、最大稀释度、临床可报告范围（CRR）以及胆红素、血红蛋白和乳靡对分析的干扰进行评价,并与厂商声明的性能和有关的质量标准进行比较.根据CLSI C28-A2文件,选择18～74岁的健康体检者80名,按年龄分为4组,每组20名,以验证厂商声明的生物参考区间的适用性.结果 电化学发光免疫法检测NT-proBNP的批内CV和总CV分别为1.1％ ～2.2％和1.5％ ～2.9％,与卫生部临床检验中心室间质量评价调查品同方法组的均值和配套校准品标示值的偏差分别为2.7％ ～5.9％和2.7％～7.5％,LoB、LoD和FS分别为2.5、7.8和8.8 pg/ml,AMR为8～35 126 pg/ml,最大允许稀释度为1∶2,CRR为9～70 252 pg/ml,胆红素（428 μmol/L）、血红蛋白（2 g/L）和乳靡（2 200 FIU）对NT-proBNP测定无干扰.不同年龄组各20名健康参考个体NT-proBNP浓度除1个检测值（167 pg/ml）超出厂商提供的参考区间外,其余均在厂商提供的参考区间内.结论Roche Cobas E601电化学发光免疫系统检测NT-proBNP的主要分析性能达到了厂商声明的性能和有关的质量要求,建立的LoD、FS、最大稀释度和CRR可为临床提供更好的质量保证,厂商声明的生物参考区间可满足临床需要.
- 张秀明温冬梅王伟佳李飞阚丽娟严海忠索明环欧阳能良
- 关键词：电化学免疫测定
- 不同抗凝剂、样本放置时问及保存温度对B型利钠肽和氨基末端B型利钠肽原检测的影响被引量：8
- 2012年
- 目的探讨不同标本类型，不同放置时间及不同样本保存温度，对心衰标志物B型利钠肽（brain natriuretie pep—tide，BNP）与氨基末端B型利钠肤原（N—terminal pro-B-type rmtriuretic peptide，NT-proBNP）检测的影响。方法采用美国临床与实验室标准化协会（CIsI）颁布的EPl5-A2文件对NT-proBNP与BNP常用检测仪器“电化学发光免疫检测系统Roche CobasE601”和“化学发光免疫检测系统SIEMENS ADVIA Centaur”检测NT-proBNP与BNP的精密度进行验证。然后分别对采用肝素抗凝管、EDTA抗凝管、分离胶管和干燥血清管抽取不同浓度BNP和NT-proBNP血样，在不同时间进行栓-刹，比较检测结果的变化趋势，判断最适标本类型；然后将检测最适类型的样本在不同温度及不同放置时间对二者的检测稳定性进行探讨，分析不同样本保存温度对BNP和NT-proBNP检测结果的影响。结果Cobas E601与ADVIA Centaur对NT-proBNP与BNP检测均具有良好的重复性，总不精密度小于3．5％，符合临床检测要求。对于BNP而言，分离胶管与干燥管血清检测结果随放置时间的延长而明显下降（t=3．98，P〈O．05），EDTA或肝素抗凝血浆在放置2h内对BNP检测稳定（Cv〈3．79％），EDTA抗凝血浆BNP测定值明显高于肝素抗凝血浆（P〈0．05），并与NT—proBNP结果有很好的互通性与相关性，相关系数（r）〉O．99，是BNP最适标本类型。而对NT-proBNP而言，不同标本类型均可室温稳定2h（CV（2．28％）。非抗凝血清NT-proBNP检测变异程度最小，与EDTA抗凝血浆BNP检测相关性最好，相关系数（r）=0．9985，是NT-proBNP最适标本类型。EDTA抗凝血浆BNP与血清NT-proBNP在不同温度保存48h内，结果稳定，组间差异无统计学意义（t=1．466，P〉O．05）。结论不同标本类型对BNP及NT-proBNP的检测有很大影响，正确的选择检测标本类型是获得准确结果的前提条件。
- 王伟佳张秀明温冬梅欧阳能良
- 关键词：B型利钠肽保存温度
- Roche电化学发光免疫法检测NT—proBNP的检测限值和功能灵敏度研究被引量：2
- 2012年
- 目的探讨电化学发光免疫法检测N末端B型利钠肽原（NT—proBNP）的检测限值和功能灵敏度。方法参照美国临床和实验室标准化协会（CLSI）Ep-17A文件制备空白样品及系列低浓度样品。‘空白样品采用配套的稀释液，系列低浓度样品采用倍比稀释的方法获得。样品制备后用RocheCobasE601电化学发光免疫系统检测NT-proBNP浓度，以确定该方法的空白限、检出限和功能灵敏度。结果NT—proBNP的空白限为2．53pg／ml，检出限为7．75pg／ml，10％CV时的功能灵敏度为8．82pg／ml。结论建立了RocheCobasE601电化学发光免疫系统检测NT-proBNP的空白限、检出限和功能灵敏度，为临床诊断和治疗提供了更有价值的信息。
- 索明环张秀明温冬梅王伟佳李飞欧阳能良阚丽娟严海忠
- 关键词：电化学发光免疫法
- 降钙素原检测在感染合并心力衰竭患者中的诊断价值被引量：11
- 2015年
- 目的探讨血清降钙素原(PCT)检测对于感染合并心力衰竭疾病的诊断价值,分析其在感染合并心力衰竭与一般感染性疾病的差异,为临床诊断提供参考。方法选取医院收治的单纯感染性疾病患者122例、单纯心力衰竭患者87例、感染合并心力衰竭患者53例以及到医院体检的健康成人178名,采取分组对比的方法,分别测定血清降钙素原水平与感染关系,数据采用SPSS 17.0软件进行统计分析。结果单纯心力衰竭组和健康成人组PCT测定结果,单纯心力衰竭组阳性率为64.37%,与于健康成人组9.55%相比,差异有统计学意义(P<0.01);单纯感染组和感染合并心力衰竭组PCT测定结果,单纯感染组阳性率为64.75%,与感染合并心力衰竭组94.33%相比,差异有统计学意义(P<0.01)。结论心力衰竭患者PCT检测水平较高,PCT检测能够较为准确的对感染合并心力衰竭患者做出初步诊断,该方法较为灵敏,操作简单,建议在临床工作中进一步推广。
- 郑阳陈良王伟佳
- 关键词：血清降钙素原心力衰竭
