四川省应用基础研究计划项目(07JY029-077)
- 作品数：3 被引量：11H指数：2
- 相关作者：刘小菁吴文超李良李凯何学令更多>>
- 相关机构：四川大学华西医科大学四川大学华西医院更多>>
- 发文基金：四川省应用基础研究计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 低频脉冲电磁场诱导大鼠骨髓间充质干细胞ACTN2、α-actin和TNNT2表达被引量：6
- 2012年
- 目的探讨低频脉冲电磁场(PEMFs)对大鼠骨髓间充质干细胞(rBMSCs)α-辅肌动蛋白-2(ACTN2)、α-肌动蛋白(α-actin)和肌钙蛋白T-2(TNNT2)表达的影响。方法采用差速贴壁分离方法获取rBMSCs,选用第3代rBMSCs用于实验。实验分为4组:①PEMFs诱导组,给予50Hz、1mT低频PEMFs刺激,30min/d,分别刺激10d、15d和20d;②5-氮胞苷(5-Aza)诱导组,给予10μmol/L 5-Aza诱导1d,然后采用完全培养液培养10d、15d和20d;③PEMFs+5-Aza诱导组:采用10μmol/L 5-Aza诱导1d后,再给予PEMFs诱导组相同的处理;④对照组,采用完全培养液培养10d、15d和20d。通过倒置相差显微镜逐日连续观察细胞的生长状况和形态特征。采用实时荧光定量PCR方法检测ACTN2和TNNT2的mRNA表达,采用Western blot方法检测ACTN2、α-actin和TNNT2的蛋白表达。结果在各时间点,PEMFs诱导组、5-Aza诱导组和PEMFs+5-Aza诱导组的ACTN2、α-actin和TNNT2mRNA表达与蛋白表达明显高于对照组。结论 PEMFs可促进体外培养的rBMSCs向心肌样细胞分化。
- 李凯姜建姚晓林邱飞远严中琴吴文超刘小菁李良
- 关键词：Α-肌动蛋白
- 脉冲电磁场诱导大鼠骨髓间充质干细胞体外心肌样细胞分化的研究被引量：6
- 2011年
- 观察脉冲电磁场(PEMFs)诱导大鼠骨髓间充质干细胞(rBMSCs)在体外向心肌样细胞分化的影响。选用第3代rBMSCs用于实验。实验分为PEMFs诱导组、5-氮胞苷(5-Aza)诱导组和对照组:PEMFs诱导组给予rBM-SCs 50 Hz1、mT低频脉冲电磁场刺激,30 min/d,分别刺激10 d、15 d和20 d;5-Aza诱导组给予rBMSCs 10μmol/L 5-Aza诱导1d,对照组不予处理;后两组与PEMFs诱导组同步培养10、15和20 d。通过倒置相差显微镜逐日连续观察细胞的生长状况和形态特征,采用实时荧光定量PCR检测肌钙蛋白T(TNNT2)mRNA和α-辅肌动蛋白(ACTN2)mRNA表达量的变化。结果显示:对照组rBMSCs呈纺锤形、多角形或梭形,随时间延长,细胞形态无明显变化;5-Aza或PEMFs诱导后,细胞形状逐渐变长,大量细胞聚集生长,且随着诱导时间的延长,聚集趋势不断增加,刺激20 d,细胞聚集呈长链状,高倍镜下可见细胞伸长明显,且部分细胞与邻近细胞融合。与对照组相比,5-Aza诱导组TNNT2 mRNA在3个时间点的表达量分别为相应对照组的19.40倍(P<0.01)、21.02倍(P<0.01)和2.38倍;ACTN2 mRNA在3个时间点的表达量分别为相应对照组的6.64倍(P<0.01)、6.67倍(P<0.01)和0.76倍。PEMFs诱导组中TNNT2 mRNA在3个时间点的表达量分别为相应对照组的15.78倍、6.73倍和2.73倍(均有P<0.05);ACTN2 mRNA在3个时间点的表达量分别为相应对照组的4.93倍(P<0.01)、1.89倍和0.64倍。而与5-Aza诱导组比较,PEMFs诱导组中TNNT2 mRNA在3个时间点的表达量分别为相应5-Aza诱导组的0.81倍、0.32倍(P<0.01)和1.15倍;ACTN2 mRNA在3个时间点的表达量分别为相应5-Aza诱导组的0.74倍、0.28倍(P<0.01)和0.83倍。本研究结果表明,在我们所选用的PEMFs条件下,PEMFs可以诱导rBMSCs在体外向心肌样细胞分化,最佳作用时间可能为第10 d。
- 冯贤何学令李凯吴文超刘小菁李良
- 关键词：脉冲电磁场大鼠骨髓间充质干细胞5-氮胞苷肌钙蛋白T
- 大鼠急性心肌梗死后心脏血流动力学参数、心肌组织病理学及c-kit mRNA表达的变化被引量：1
- 2009年
- 探讨大鼠急性心肌梗死(AMI)后不同时间点心脏血流动力学参数、心肌组织病理学和c-kitmRNA表达水下的变化及三者之间的相互关系。66只成年雄性SD大鼠随机分为:正常组、假手术组和结扎组。通过结扎冠状动脉左前降支建立AMI模型。实验结束后,检测心脏血流动力学参数、心肌组织病理学变化和c-kit mRNA的表达水平。结果表明,正常组与各假手术组间血流动力学参数无明显差异(P>0.05)。与正常组相比,各结扎组的左心室收缩压(LVSP)、左心室内压力最大上升速率和最大下降速率(±dp/dtmax)均明显降低(P<0.01);左心室舒张末期压力(LVEDP)明显上升(P<0.01)。但与结扎6 h组相比,其余各结扎组的LVSP、LVEDP、±dp/dtmax均明显升高(P<0.05)。结扎区心肌组织HE染色显示,与正常组相比,6 h结扎组心肌细胞无明显形态学改变;1 d结扎组细胞核固缩或碎裂,横纹不清或消失,大量心肌发生坏死;3 d结扎组心肌细胞结构消失,坏死区形成,并可见大量炎症细胞浸润;7 d结扎组中性多核细胞浸润更加明显,弥漫整个坏死区域;14 d结扎组可见梗死区周边有肉芽组织长入,并伴大量的中性多核细胞浸润。RT-PCR显示,c-kit mRNA在正常组和假手术组心肌组织中有低水下表达,但二者无明显差异(P>0.05)。结扎各组从3 d到14 d,心肌组织中c-kit mRNA表达分别为相应假手术组的1.46倍、1.91倍、2.67倍。提示,AMI后前2周内,受损心肌组织结构和心脏功能已开始修复,而c-kit+心肌干细胞在心肌的再生修复过程中可能发挥重要作用。
- 陈世前龙维富吴文超江从勋刘小菁李良
- 关键词：急性心肌梗死血流动力学参数心肌干细胞干细胞因子受体
