广州市医药卫生科技项目(20121A011154)
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 相关作者：刘美玲江镜全黄洁贞陈兴文张轩更多>>
- 相关机构：广州医学院第三附属医院广东省中医院广州医科大学更多>>
- 发文基金：广州市医药卫生科技项目广东省社会发展领域科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 肺炎链球菌毒力相关基因检测及临床意义被引量：3
- 2012年
- 目的:检测肺炎链球菌临床分离株毒力基因存在情况。方法:以临床分离出的91株肺炎链球菌作为研究对象,利用PCR法对肺炎链球菌5种毒力基因实施检测。结果:在全部的91株肺炎链球菌中LytA、PsaA、NanA、PspA、Ply这5种基因的检测阳性率分别为94.5%、85.7%、85.7%、61.5%、82.4%。结论:肺炎链球菌毒力因子是肺炎链球菌致病的基础,5种常见的毒力基因在肺炎链球菌检测中,其阳性率都比较高,此实验为进一步阐明毒力因子的作用机制并应用于指导抗肺炎链球菌新药和新型疫苗研制奠定了一定的基础。
- 刘美玲江镜全黄洁贞
- 关键词：肺炎链球菌毒力基因疫苗
- 肺炎链球菌丝氨酸-苏氨酸激酶基因的原核表达及免疫血清的制备
- 2014年
- 目的制备抗肺炎链球菌(S.pn)丝氨酸-苏氨酸激酶(STKP)基因的特定区域的免疫血清,为疫苗研究奠定基础。方法 PCR扩增S.pn STKP蛋白C末端314个氨基酸区域的基因,将其克隆入pMD19-T载体,将鉴定正确的STKP基因从pMD19-T载体亚克隆至PET-32a(+)原核表达载体进行诱导表达;获得的可溶性蛋白经Ni2+柱纯化及Western blot鉴定后,免疫家兔制备抗STKP血清,间接ELISA鉴定抗体效价,Western blot鉴定免疫血清特异性。结果成功将STKP基因特定序列克隆入PET-32a(+)原核表达载体并诱导表达,形式以可溶性表达为主,经Ni2+柱层析法纯化STKP,纯度达92%,免疫家兔制备出STKP免疫血清,间接ELISA检测抗体效价为1∶100 000,Western blot证实免疫血清能与目的蛋白特异结合。结论获得STKP重组蛋白及免疫血清,重组表达产物具有免疫原性,为S.pn多价联合蛋白疫苗研制奠定了基础。
- 刘美玲李有强陈东成屈平华张轩张汉运陈兴文
- 关键词：肺炎链球菌免疫血清
