公共文化服务平台

国家自然科学基金(30770758): 作品数：16 被引量：87H指数：6; 相关作者：贾延劼张博爱文全庆赵二义王留东更多>>; 相关机构：郑州大学第一附属医院郑州大学第三附属医院郑州大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金河南省教育厅自然科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

盐酸法舒地尔对体外培养大鼠神经干细胞分化的影响被引量：4: 2010年; 目的观察盐酸法舒地尔对体外培养神经干细胞(NSCs)分化的影响。方法体外分离培养NSCs,通过不同浓度的盐酸法舒地尔干预后,采用免疫细胞化学及流式细胞技术检测神经元特异性烯醇化酶(NSE)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达。结果分离培养的NSCs具有自我复制、增殖能力,可以表达Nestin;诱导分化后的细胞可以表达NSE和GFAP。免疫细胞化学染色提示,盐酸法舒地尔干预组NSE阳性细胞显著高于对照组(P<0.05),但是不同浓度盐酸法舒地尔之间无统计学差异(P>0.05)。流式细胞仪检测结果显示,盐酸法舒地尔干预组NSE阳性细胞比例明显增加,与对照组相比有统计学差异(P<0.05)。结论盐酸法舒地尔可以促进NSCs向神经细胞方向分化。; 沈雷张博爱贾延劼石进峰关文娟赵二义文全庆; 关键词：盐酸法舒地尔神经干细胞神经元分化

缺血性脑损伤后OX_1R的表达变化及电刺激小脑顶核对其调节作用: 2010年; 彭涛贾延劼滕军放董为伟谢鹏张博爱; 关键词：缺血小脑顶核电刺激

大鼠脑缺血急性期脑组织miRNA的表达变化被引量：20: 2008年; 目的:观察脑缺血急性期大鼠脑组织小RNA(microRNA,miRNA)差异表达。方法:采用双颈总动脉结扎方法制备大鼠脑缺血模型(2VO),脑缺血后30min,将动物断头取皮层脑组织,miRNA表达谱芯片检测miRNA差异表达。结果:与正常组比较,2VO术后60min大鼠皮层脑组织中35个已知miRNA表达上调2倍以上;89个表达下调2倍以上等,其中促进凋亡和影响细胞周期的miRNA,如miR-23、-24、-26、-30、-103、-107等显著上调,与神经干或前体细胞分化有关的let-7、miR-124、-128、-9等也显著上调。结论:miRNA在脑缺血早期表达即有明显差异,可能在大鼠脑缺血早期病理生理变化中发挥作用。; 文全庆贾延劼王明闯赵二义王留东张博爱刘洪波; 关键词：小RNA 脑缺血

P2Y_1受体介导Aβ_(25-35)所致大鼠星形胶质细胞活化被引量：2: 2011年; 目的:观察嘌呤受体P2Y1在Aβ25-35所致的大鼠星形胶质细胞活化中所起的作用。方法:体外分离培养大鼠星形胶质细胞,按空白对照、Aβ25-35和P2Y1受体阻断剂MRS2179+Aβ25-35和MRS2179分组干预后,通过免疫细胞化学、免疫荧光法和Western blotting方法观察GFAP和P2Y1表达的变化。结果:各组细胞数量无明显变化。与对照组相比,Aβ25-35组GFAP荧光强度明显增加;MRS2179+Aβ25-35和MRS2179组均降低,两组间无明显差异。Western blotting显示GFAP在各组间表达与免疫荧光法有相似趋势;与对照组相比,P2Y1表达在Aβ25-35组明显增多(P<0.05)和MRS2179+Aβ25-35和MRS2179组无明显变化(P>0.05)。结论:Aβ25-35通过P2Y1受体活化激活星形胶质细胞。; 常利张博爱贾延劼付振强沈雷石进峰文全庆赵二义; 关键词：淀粉样Β蛋白星形细胞

Caveolin-1在大鼠骨髓间质干细胞分化为神经细胞中的作用被引量：2: 2010年; 目的:探讨caveolin-1在骨髓间质干细胞(MSCs)分化为神经细胞中的作用。方法:实验分为未转染组、转染组(转染Rn-caveolin-1-siRNA)、阳性对照组(转染Rn-MAPK-1control siRNA)及阴性对照组(转染negative control siRNA)4组。采用β-巯基乙醇诱导大鼠MSCs分化为神经细胞。倒置荧光显微镜下观察MSCs转染后荧光表达情况;RT-PCR检测caveolin-1和促分裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)mRNA的表达变化;免疫细胞化学法检测caveolin-1、神经元烯醇化酶(NSE)、神经微丝亚单位(NF-M)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达变化;MTT方法检测细胞存活率。结果:(1)siRNA转染72h,MSCs荧光表达最强,转染率可达(81.5±2.8)%;而且转染组MSCs的caveolin-1mRNA转录下降(P<0.05);MTT提示转染组细胞存活率无显著变化(P>0.05)。(2)β-巯基乙醇可以诱导MSCs向神经细胞分化,其中以转染组诱导效果最佳,NSE、NF-M的表达率显著高于其它各组(P<0.01)。(3)随诱导时间延长,各组caveolin-1表达持续增加,诱导6d达到峰值,与诱导前、诱导6h相比有显著差异(P<0.05)。此外,转染组与其它各组同时点的caveolin-1表达均显著降低(P<0.01)。结论:以caveolin-1为标记蛋白的脂筏在MSCs诱导分化为神经细胞中可能起到重要的调控作用。; 王留东赵二义文全庆关文娟鲁晶晶彭涛张博爱贾延劼; 关键词：骨髓间质干细胞神经元 CAVEOLIN-1 RNA干扰

小凹蛋白-1在大鼠骨髓间质干细胞分化为神经元样细胞中的作用被引量：2: 2010年; 目的应用RNA干扰(RNA interference)技术,抑制沉默小凹蛋白-1(caveolin-1)基因的表达,观察小凹蛋白-1在骨髓间充质干细胞(MSCs)分化为神经元样细胞的作用.方法构建大鼠caveolin-1 siRNA(small interfering RNA),然后传染大鼠MSCs,诱导分化并在倒置显微镜下进行形态学观察,用MTT比色法检测细胞存活率,采用免疫细胞化学染色法检测Nestin、 NSE(神经元标记物) 、GFAP(神经胶质细胞标记物)的表达,设诱导未传染组和传染对照组作为对照研究.结果用caveolin-1 siRNA传染MSCs后,caveolin-1基因表达消失,传染后24 h和3 d MSCs细胞存活率下降,与诱导未传染组和传染对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),传染caveolin-1 siRNA的MSCs向神经元样细胞分化效率显著提高,诱导24 h后NSE阳性细胞率为(75.5±2.5)%,6 d后达(81.6±3.5)%,且未见GFAP的表达,与诱导未传染组和传染对照组比较差异有统计学意义(P<0.01).结论 caveolin-1 siRNA抑制caveolin-1基因的表达,可提高MSCs向神经元样细胞的分化效率.; 王留东赵二义贾延劼; 关键词：小凹蛋白骨髓间质神经元样细胞 MARROW MARROW

大鼠骨髓间充质干细胞向神经细胞分化过程中Notch信号与RhoA/Rho激酶信号的协同作用被引量：1: 2010年; 目的探讨Notch信号通路在大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)向神经细胞分化中与RhoA/Rho激酶信号的协同作用.方法实验分为无血清培养基对照组和盐酸法舒地尔组.采用盐酸法舒地尔诱导大鼠MSCs分化为神经细胞.RT-PCR检测Hes1的表达变化;免疫细胞化学法检测神经元特异性烯醇化酶(NSE)、神经微丝蛋白亚单位(NF-M)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达变化.结果 ①盐酸法舒地尔组MSCs的Hes1 mRNA转录下降(P<0.05).②盐酸法舒地尔可以诱导MSCs向神经细胞分化,NSE、NF-M的阳性表达率显著高于无血清培养基组(P<0.05).结论盐酸法舒地尔在诱导大鼠MSCs向神经细胞分化过程中,可能存在Notch信号通路与RhoA/Rho激酶通路信号的协同作用,共同促进MSCs向神经细胞分化.; 赵二义王留东文全庆关文娟鲁晶晶彭涛张博爱贾延劼; 关键词：分化过程 MARROW GTPASE NEUROFILAMENT MARROW STROMAL

MicroRNA-9-1慢病毒载体的构建及其对小鼠骨髓间质干细胞诱导分化为神经细胞的影响被引量：14: 2011年; 目的:探讨microRNA-9-1在体外诱导小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)向神经细胞分化中的作用。方法:构建小鼠microRNA-9-1慢病毒载体(microRNA-9-1-LV)并感染小鼠MSCs,筛选最适感染复数(MOI);实验分为未感染组、感染组(感染microRNA-9-1-LV)、阴性对照组(感染FU-RNAi-NC-LV);采用β-巯基乙醇诱导感染后小鼠MSCs分化为神经细胞。倒置荧光显微镜下观察MSCs感染后荧光表达情况;采用免疫细胞化学染色检测神经元烯醇化酶(NSE)、神经微管结合蛋白(MAP-2)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达变化;PT-PCR检测MAP-2 mRNA的表达变化;MTT方法检测细胞存活率。结果:(1)阳性克隆PCR证明小鼠mi-croRNA-9-1慢病毒载体构建成功,孔稀释法测定病毒滴度为1×1012 TU/L。(2)倒置显微镜下观察小鼠microR-NA-9-1慢病毒载体感染成功,MOI值为20,感染4 d时感染率最高,细胞存活率较高,感染率可达91.3%±4.2%。(3)β-巯基乙醇可以诱导MSCs向神经细胞分化,其中以感染组诱导效果最佳,NSE和MAP-2的表达率显著高于其它各组(P<0.05)。结论:(1)MicroRNA-9-1-LV可高效感染小鼠MSCs。(2)感染miRNA-9-1-LV后MSCs经β-巯基乙醇诱导向神经细胞分化比率增加。; 景黎君贾永林鲁晶晶韩瑞王舒阳李尽义彭涛贾延劼; 关键词：骨髓间充质干细胞慢病毒

人脐血MSCs向神经元样细胞分化过程中neurogenin1的表达变化被引量：1: 2011年; 目的:探讨人脐血间质干细胞(MSCs)体外向神经元样细胞分化过程中neurogenin 1的表达变化。方法:常规从人脐血中分离MSCs,采用生长因子EGF和bFGF联合诱导人脐血MSCs向神经元样细胞分化,免疫细胞化学法检测诱导前、后神经元表面标志蛋白NF-M、NSE、胶质细胞标志蛋白GFAP和neurogenin 1的表达情况;Western blotting和RT-PCR法检测诱导前、后人脐血MSCs中neurogenin 1蛋白和mRNA的表达变化。结果:诱导前,人脐血MSCs不表达NF-M、NSE和GFAP;诱导7 d,人脐血MSCs可以分化为神经元样细胞,同时表达NF-M、NSE和GFAP。诱导前,人脐血MSCs不表达neurogenin 1,诱导后neurogenin 1蛋白和mRNA表达显著增加。结论:Neurogenin 1可能参与了体外诱导人脐血MSCs向神经细胞分化的过程。; 朱登纳贾延劼王军张博爱范亚珍; 关键词：脐带血间质干细胞神经元

miR-124-1促进大鼠骨髓间充质干细胞神经分化的实验研究被引量：8: 2012年; 目的探讨miR-124-1在大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)神经分化中的作用。方法构建大鼠miR-124-1慢病毒载体及Anti-rno-miR-124*Inhibitor载体,体外感染大鼠MSCs,筛选最适感染复数(MOI)。实验分为对照组(未行感/转染组)、miR-124-1+组(感染miR-124-1慢病毒)及miR-124-1-组(转染Anti-rno-miR-124*Inhibitor)。采用β-巯基乙醇诱导MSCs分化为神经细胞。倒置荧光显微镜下观察感染后荧光表达情况,MTT法检测感/转染后各组细胞存活率;免疫细胞化学法、RT-PCR法、Western blot法检测各组诱导6 d后神经细胞标记物β3微管蛋白(β3 tubulin)、神经微管结合蛋白(MAP-2)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达变化。结果倒置荧光显微镜下观察大鼠miR-124-1慢病毒感染成功,MOI值为30。miR-124-1+组慢病毒载体感染MSCs 2 d后,实时定量PCR显示miR-124-1的表达显著上调(P<0.01);Anti-rno-miR-124*Inhibitor载体转染24 h后,细胞存活率下降,实时荧光定量PCR显示转染后miR-124-1的表达显著下降(P<0.01)。β-巯基乙醇可诱导MSCs分化为神经细胞,miR-124-1+组诱导6 d后细胞的β3 tubulin、MAP-2表达率显著高于其他两组(P<0.01),miR-124-1-组β3tubulin、MAP-2的表达率显著低于对照组(P<0.01);各组GFAP表达率均较低(<1%)。结论 miR-124可能促进大鼠MSCs的神经分化。; 周燕陈奎生高剑波韩瑞鲁晶晶彭涛贾延劼; 关键词：神经分化神经细胞骨髓间充质干细胞

国家自然科学基金(30770758)

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

国家自然科学基金(30770758)

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈