国家高技术研究发展计划(2001AA212151)
- 作品数:3 被引量:64H指数:3
- 相关作者:魏建华赵华燕宋艳茹王台张景昱更多>>
- 相关机构:中国科学院植物研究所北京市农林科学院农业生物技术研究中心北京农业生物技术研究中心更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划国家自然科学基金北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学农业科学更多>>
- 利用反义CCoAOMT基因培育低木质素含量毛白杨的研究被引量:28
- 2004年
- 以造纸原料树种毛白杨 (Populustomentosa)为研究对象 ,用农杆菌介导法将与木质素合成相关的酶咖啡酰 辅酶A O 甲基转移酶 (CCoAOMT)的反义基因导入毛白杨 ,对影响植株再生和转化率的多种因子进行研究 ,建立了一套较为稳定的遗传转化再生体系 .转化毛白杨的PCR South ern印迹杂交检测表明 ,反义CCoAOMT基因已整合到毛白杨基因组中 ;RT PCR和Western印迹杂交结果显示 ,内源CCoAOMT基因的表达在转录和翻译水平均受到抑制 .这些转基因毛白杨的Klason木质素含量均有不同程度的降低 .其中木质素含量下降幅度较大的株系 ,伴随其茎杆局部区域明显发红 ,呈条状或斑状分布 .以上结果表明将CCoAOMT基因用于材性改良的研究具有潜在的应用价值 .
- 赵华燕魏建华路静石超王宏芝宋艳茹
- 关键词:毛白杨CCOAOMT农杆菌转化木质素毛白杨
- 毛白杨4CL基因启动子的克隆及初步功能分析被引量:6
- 2007年
- 4CL(4-coumarate:CoA ligase,4-香豆酸:辅酶A连接酶)在植物木质素合成途径中催化羟基香豆酸生成羟基肉桂酰CoA,主要在木质部中表达,对植物木质素生物合成具重要调控作用.为研究4CL基因启动子在转基因植物中的表达特性,探索其在植物基因工程研究中的潜在应用价值,利用PCR方法从毛白杨基因组DNA中扩增得到了4CL启动子片段.序列分析表明与美洲山杨(P.tremuloids)的4CL启动子同源性为95%.采用生物信息学方法对该序列进行分析.与GUS基因融合构建双元表达载体,转化烟草的瞬时表达检测可见明显GUS活性.
- 邢智峰张安世徐存栓魏建华
- 关键词:毛白杨GUS基因
- 抑制COMT与CCoAOMT调控植物木质素的生物合成被引量:35
- 2002年
- 咖啡酸-3-O-甲基转移酶(COMT)与咖啡酰辅酶A-3-O-甲基转移酶(CCoAOMT)基因分别编码植物木质素生物合成中不同底物水平的甲基化酶,构建了它们的单价与双价反义表达载体,并用农杆茵介导转化烟草.PCR-Southern检测表明外源基因已整合到烟草基因组DNA中;Northern点杂交结果表明外源基因在烟草中以转录水平表达.对表达单个及两个甲基化酶反义基因的成熟转基因植株的木质素含量测定结果表明,反义抑制COMT与CCoAOMT的表达均使转基因植株的木质素含量下降,但单独抑制CCoAOMT表达引起的下降幅度明显大于COMT,并且两个基因同时被抑制时,降低幅度更大,说明它们具有协同效应.组织化学染色结果说明COMT被抑制引起紫丁香基(S)木质素显著减少.上述结果表明,抑制植物内源CCoAOMT表达是反向调控转基因植物木质素生物合成及改良造纸资源植物的有效途径.
- 赵华燕张景昱刘惠荣王台宋艳茹魏建华
- 关键词:生物合成COMTCCOAOMT木质素组织化学染色甲基化酶