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博士科研启动基金(2003AA223539)
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2007
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抗HBV preS1嵌合抗体的真核表达及活性分析
2007年
目的 通过真核系统表达抗HBVpreS1嵌合抗体4D11并分析其活性。方法 通过RT-PCR方法从分泌抗乙型肝炎病毒preS1的鼠源单克隆抗体4D11的杂交瘤细胞中克隆出抗体基因的重链可变区(VH)、轻链可变区(Vk)序列,并分别克隆到含有人71重链和X轻链恒定区序列的pcDNA3.1-AH和pcDNA3.1-Ak质粒中,共转染人胚肾细胞变种(293FT)细胞。通过Western blot、竞争ELISA、阳性血清阻断及血清中preS1的检测实验来分析其活性。结果 轻重链基因在细胞内正确组装成嵌合抗体分子并分泌至细胞外,具有结合活性。嵌合抗体可以很好的与病毒preSl结合,对阳性血清的检测效果与鼠单抗一致。结论 成功的利用293FT细胞表达了4D11嵌合抗体,抗体保留了原鼠单抗的特异性和活性,为探讨乙肝抗体的治疗提供了试验资料。
陈瑛炜
罗文新
王晋
王明桥
顾颖
林亦伟
张军
夏宁邵
关键词:
乙型肝炎病毒
嵌合抗体
真核表达
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