河南省高校科技创新团队支持计划(2010HASTIT026)
- 作品数：24 被引量：69H指数：5
- 相关作者：王自良张海棠范国英姜金庆刘俊伟更多>>
- 相关机构：河南科技学院西北农林科技大学黄淮学院更多>>
- 发文基金：河南省高校科技创新团队支持计划“十一五”国家科技支撑计划国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生轻工技术与工程生物学更多>>
- 镉离子单克隆抗体的制备及其阻断ELISA检测方法的建立被引量：5
- 2011年
- 目的制备重金属镉离子(Cd2+)单克隆抗体,并建立Cd2+残留阻断ELISA检测方法。方法用异硫氰酸苄基乙二胺四乙酸(ITCBE)螯合Cd2+合成Cd-ITCBE半抗原,异硫氰酯法制备免疫抗原Cd-ITCBE-BSA和检测抗原Cd-ITCBE-OVA,并进行鉴定;用Cd-ITCBE-BSA免疫BALB/c小鼠,经细胞融合后,间接ELISA和阻断ELISA筛选阳性杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备Cd2+单抗,并进行鉴定;建立检测Cd2+残留的阻断ELISA法,并进行验证。结果 Cd-ITCBE-BSA和Cd-ITCBE-OVA中BSA与OVA含量分别为7.1和6.7 mg/ml,Cd2+含量分别为191.7和130.1μg/ml;共筛选出1A3、2B7、2E10、4F3 4株杂交瘤细胞,其中2E10株分泌的Cd2+单抗效价最高,细胞培养上清和腹水的间接ELISA效价分别达1∶4.32×102和1∶5.12×105,亲和常数(K)a也最高,为7.58×108 L/mol,对Cd2+的半数抑制浓度(IC50)为16.3μg/L;建立的阻断ELISA法的标准曲线呈典型的S型,符合4参数logit曲线拟合;最低检测限为5μg/L;饲料样、猪尿样的平均添加回收率分别为92.9%和88%,平均变异系数分别为12.35%和12.45%;与Hg2+的交叉反应率为96.5%,与其他化合物未见交叉反应;试剂可在4℃保存180 d。结论已成功制备了高亲和力的Cd2+单抗,并建立了快速、简便、敏感、特异的Cd2+残留阻断ELISA检测方法。
- 张海棠王申锋姜金庆王自良刘耀东王淑云
- 关键词：镉人工抗原酶联免疫吸附测定
- 19-去甲类固醇激素的结构、性能及其代谢特点研究被引量：1
- 2010年
- 19-去甲类固醇类化合物是临床应用最多的合成类雄性蛋白同化激素,可用于治疗骨质疏松症,蛋白质缺陷型疾病和烧伤等。它还可以提高运动员和赛马比赛的成绩,增强食源性动物瘦肉生产率,进而提高饲料转化率。但19-去甲类固醇及代谢残留引起人的肝功能障碍和心血管系统受损,内分泌失调等副作用,因此在世界上多数国家中,除医疗和科研之外,禁止使用。详尽阐述了19-去甲类固醇类化合物的结构、功能、副作用和代谢特点。
- 姜金庆张海棠王建华王自良
- 关键词：副作用代谢特点
- 牛真菌性皮肤病的诊疗被引量：1
- 2012年
- 皮肤真菌病俗称钱癣、脱毛癣、秃毛癣或匐行疹等,是由多种皮肤真菌引起的人和动物的一种真菌性皮肤传染病。病原菌主要侵害动物的被毛、指（趾）甲、爪、蹄等角化组织。临床上以脱毛、脱屑、渗出、痂块及痒感为主要特征。此病极其常见于犊牛,也常见于成年牛。致病微生物抵抗力极强,2个月以上至1岁犊牛最易感染。
- 范国英刘俊伟陈俊杰钟华
- 关键词：真菌性皮肤病皮肤真菌病诊疗致病微生物脱毛癣秃毛癣
- Cd^(2+)人工抗原的制备及其抗体特性被引量：4
- 2011年
- 用异硫氰酸苄基乙二胺四乙酸(ITCBE)鳌合Cd2+合成Cd-ITCBE半抗原,异硫氰酯法制备免疫抗原Cd-ITCBE-BSA,紫外分光光度法(UV)、SDS-PAGE和电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)进行鉴定;用Cd-ITCBE-BSA免疫Balb/C小鼠,间接ELISA测定多抗血清(pAb)效价,阻断ELISA鉴定其敏感性,交叉反应试验鉴定其特异性。结果表明,Cd-ITCBE-BSA偶联成功,Cd-ITCBE-BSA中BSA和Cd2+的含量分别为7.1g/L和191.7 mg/L;间接ELISA效价达到1∶(5.12×104),阻断ELISA检测Cd-EDTA的IC50为26.9μg/L,除与Hg-EDTA具有较强交叉反应外,与EDTA及其他金属离子鳌和物无交叉反应,获得高效价、敏感、特异的Cd2+pAb,为Cd2+残留免疫学检测方法的建立奠定基础。
- 张海棠姜金庆王顺来刘耀东王淑云王自良
- 关键词：半抗原人工抗原抗体
- 动物性食品镉离子污染检测技术研究进展被引量：2
- 2010年
- 本文详细综述了目前国内外在食品Cd2+污染检测方面的研究方法和成果,主要包括紫外分光光度法、电化学分析法、原子吸收光谱法、电感耦合等离子体法、氢化物发生-原子荧光光谱法、中子活化分析法等理化分析方法和荧光偏振免疫测定法、酶联免疫吸附测定法、一步竞争免疫测定法、KinExA免疫测定法、胶体金免疫层析试验测定法和微悬臂梁免疫传感器等免疫分析方法。在此基础上,展望了食品Cd2+污染免疫检测技术的发展方向。
- 张海棠刘耀东王淑云王自良
- 关键词：免疫分析法
- 吡虫啉残留酶联免疫吸附检测方法的建立被引量：7
- 2011年
- 通过化学修饰合成吡虫啉(imidacloprid,IMI)人工半抗原,采用碳二亚胺法(EDC)将该抗原与牛血清蛋白和卵清蛋白偶联成功制备分子结合比合理的免疫抗原(IMI-BSA)和包被抗原(IMI-OVA)。对经IMI-BSA免疫的6周龄Balb/c实验鼠的免疫抗血清进行间接酶联免疫吸附和阻断酶联免疫吸附,初步探明抗吡虫啉多克隆抗体(IMI-pAb)的免疫学特性。在此基础上,采用聚乙二醇(PEG)介导细胞融合技术进行了免疫鼠脾细胞和骨髓瘤细胞融合,通过阳性杂交瘤细胞筛选和克隆化培养,获得3C8杂交瘤细胞株。结果显示:该3C8杂交瘤细胞株具有高效价、高亲和力和强特异性的特点;通过方阵滴定法确定最佳抗原包被浓度和最佳抗体稀释倍数,建立基于吡虫啉单克隆抗体(IMI-mAb)的IMI残留阻断酶联免疫吸附,其线性范围为7.48×10-6～3.24×10-4mg/mL(R2=0.9928),最低检测限为8.00×10-6mg/mL。
- 李广领姜金庆陈锡岭张淑静王自良
- 关键词：吡虫啉单克隆抗体酶联免疫吸附测定法
- 吡虫啉残留免疫学快速检测技术研究
- 研究了免疫学快速检测吡虫啉残留的方法，采用HPLC-MS、IR、UV和NMR技术,对通过化学修饰合成的吡虫啉(IMI)人工半抗原及EDC法合成的IMI完全抗原进行了结构表征,证明IMI人工半抗原和完全抗原合成成功,且完全...
- 李广领陈锡岭王自良李新安
- 关键词：吡虫啉
- 19-去甲睾酮单克隆抗体的筛选及icELISA方法的建立被引量：5
- 2011年
- 采用细胞融合技术筛选抗19-去甲睾酮(nortestosterone,NT)单克隆抗体(monoclonal antibody,mAb)杂交瘤细胞株,体内诱性腹水法制备NT mAb,建立异源性间接竞争ELISA(indirect competitive ELISA,icELISA)标准曲线,并对其特异性、理化因素的影响和基质效应性进行探讨.结果表明,筛选的5株杂交瘤细胞分泌的单抗腹水效价为0.64×105～2.56×105,半数抑制浓度IC50为0.55～1.0ng/mL,抗体为IgG1亚型,具k轻链,亲和常数Ka为2.6×109～4.7×109L/mol.建立的icELISA标准曲线在磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline,PBS)中的线性检测范围为0.004～85.8ng/mL,IC50值为0.55ng/mL,检测限(limit of detection,LOD)为0.002ng/mL;抗体与17a-去甲睾酮的交叉反应率(cross-reactivity,CR)为62%,与其他化合物无CR.标准品稀释液中甲醇的最佳含量为10%,牛尿1:20倍稀释可消除基质干扰,ELISA方法和液质联用检测(LC-MS/MS)的相关性良好(R2=0.9871).
- 姜金庆张海棠范国英马金友王自良王建华
- 关键词：杂交瘤细胞株单克隆抗体间接竞争ELISA牛尿
- 副猪嗜血杆菌病的诊断与治疗试验被引量：2
- 2011年
- 副猪嗜血杆菌病是由猪副嗜血杆菌引起的一种条件性、依赖性的致病性传染病。猪副嗜血杆菌是引起猪的浆膜炎和关节炎的主要病原体，为革兰阴性小杆菌，形态多变，可见荚膜，广泛存在于猪的上呼吸道中，
- 范国英刘俊伟王顺岗钟华陈俊杰
- 关键词：副猪嗜血杆菌病副嗜血杆菌上呼吸道传染病
- 长角血蜱侵袭致藏獒“蜱麻痹”和巴贝斯虫感染的诊治被引量：1
- 2011年
- 对卫辉市某2.5月龄的以后肢麻痹为特征的藏獒进行临床检查、血液涂片染色镜检、血液常规检测、蜱形态学观察和蜱种鉴定。结果表明:藏獒红细胞内有大量犬巴贝斯虫寄生,血液常规检查白细胞数升高,血红蛋白含量正常,感染蜱为长角血蜱。最终确诊为长角血蜱侵袭致藏獒"蜱麻痹"和巴贝斯虫感染。应用伊维菌素、血虫净等药物进行治疗,3d后该犬病情基本好转,血常规检查白细胞恢复正常。
- 范国英刘俊伟王顺岗钟华陈俊杰
- 关键词：藏獒长角血蜱
