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江苏省卫生厅资助项目(Z200919)
作品数:
2
被引量:3
H指数:1
相关作者:
李燕
迟莹
张文帅
焦永军
温恬
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相关机构:
卫生部
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发文基金:
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2011
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甲型H1N1流感病毒非结构蛋白NS1真核表达载体的构建与表达
被引量:2
2011年
目的:构建甲型H1N1流感病毒非结构蛋白NS1真核表达载体并表达其编码蛋白(转染293T细胞)。方法:从江苏首例甲型H1N1流感病毒毒株(A/Nan jing/1/2009(H1N1))提取病毒RNA,采用RT-PCR技术扩增NS1全长基因,将其克隆至pMD18-T Vector中构建pMD18-T-NS1质粒,双酶切pMD18-T-NS1与PXJ40-HA后,构建真核表达载体PXJ40-HA-NS1,经酶切及测序鉴定后将质粒转染到293T细胞中,通过Western blot鉴定NS1蛋白的表达。结果:经双酶切、测序鉴定证实NS1基因的真核表达载体构建成功。West-ern blot法可见NS1基因编码蛋白的成功表达。结论:成功克隆NS1全长基因,并构建了其真核表达载体,该表达载体的构建为后期建立稳定表达NS1蛋白的细胞模型和NS1蛋白功能研究提供了材料。
张文帅
卞倩
温恬
迟莹
李燕
焦永军
关键词:
甲型H1N1流感病毒
NS1
真核表达
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