国家自然科学基金(81171659)
- 作品数：9 被引量：22H指数：3
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- 川芎嗪对咖啡因引起的PC12细胞损伤的保护作用被引量：2
- 2014年
- 目的分析川芎嗪对咖啡因引起大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤克隆化细胞株PC12细胞损伤的保护作用,探讨川芎嗪治疗脑缺血-再灌注损伤的机制。方法制备咖啡因细胞损伤模型,通过CCK-8法活细胞检测、流式细胞术线粒体膜电位测定、Western-blot检测高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、酶联免疫吸附测定(ELISA)检测氧化应激指标观察咖啡因的毒性及川芎嗪的保护作用。结果川芎嗪预处理后,PC12细胞的存活数显著提高,细胞线粒体膜电位提高,HMGB1表达显著降低,超氧化物歧化酶(SOD)上调,乳酸脱氢酶(LDH)和丙二醛(MDA)下调,谷胱甘肽(GSH)升高。结论川芎嗪对咖啡因引起的PC12细胞损伤有显著的保护作用,其保护作用可能与川芎嗪抑制细胞凋亡、调节炎症性递质表达水平及氧化应激反应相关。
- 王佳高峰张春兵
- 关键词：川芎嗪PC12细胞脑缺血-再灌注
- RNA干扰抑制Fas基因的表达对小鼠脑微血管内皮细胞bEnd.3的影响被引量：1
- 2013年
- 目的用RNA干扰(RNAi)技术抑制小鼠Fas基因表达,观察其对脑微血管内皮细胞bEnd.3增殖及FADD-FLIP-TRAF-NF-κB信号传导途径的影响,为后续FasL低剂量兴奋效应研究提供实验基础。方法设计合成靶向小鼠Fas基因的小干扰RNA(siRNA)片段,用脂质体包埋转染bEnd.3细胞;CCK-8法检测细胞增殖;RT-PCR检测bEnd.3细胞Fas mRNA的表达情况;western blot检测Fas、FADD、FLIP、TRAF蛋白表达水平。结果 CCK-8法检测显示,Fas-siRNA组细胞增殖水平与空白对照组比较,无统计学差异(t=1.805,P>0.05);RT-PCR结果表明,与空白组的Fas mRNA表达水平比较,Fas-228-、Fas-310-、Fas-427-、Fas-891-siRNA组mRNA表达水平降低,差异有统计学意义(F=123.127,P<0.05);western blot显示,Fas-siRNA组与空白对照组Fas蛋白表达水平比较,差异有统计学意义(t=12.101,P<0.01);Fas-siRNA组FADD、FLIP、TRAF蛋白相对表达水平与空白对照组比较,表达均下调(t=28.315、17.563、8.903,P<0.05)。结论 Fas-siRNA能有效封闭Fas基因的表达,抑制Fas下游信号FADD、FLIP、TRAF蛋白表达。
- 张春兵高峰张明顺滕凤猛
- 关键词：FAS基因RNA干扰
- 川芎嗪降低咖啡因诱导的PC12细胞凋亡的研究被引量：3
- 2014年
- 目的分析川芎嗪预处理大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤克隆化细胞株PC12细胞后咖啡因诱导的细胞凋亡情况,探讨川芎嗪治疗脑缺血再灌注损伤的机制。方法采用川芎嗪预处理PC12细胞后,制备咖啡因细胞损伤模型,通过CCK-8法活细胞检测、Hoechst-33342染色、流式细胞术、RT-PCR分析细胞凋亡发生机制。结果川芎嗪预处理后,PC12细胞的存活数提高,细胞未见大量凋亡小体形成、总体凋亡率降低,caspase3、caspase-8、caspase9活性降低,线粒体膜电位提高,Bax/Bcl-2比值降低。结论川芎嗪预处理后能降低咖啡因诱导的PC12细胞凋亡。
- 王佳高峰张春兵
- 关键词：川芎嗪PC12细胞脑缺血性损伤凋亡
- 中药有效成分保护脑缺血再灌注损伤的研究进展被引量：5
- 2015年
- 脑缺血再灌注损伤(CIRI)的机制主要是兴奋性氨基酸神经毒性、神经元超微结构的变化、氧化应激、炎症反应、钙离子超载等〔1,2〕。中药有效成分可从多个方面发挥保护脑缺血再灌注损伤的作用,其作用机制值得进一步研究。1抑制兴奋性氨基酸引起的神经毒作用兴奋性氨基酸(EAA)主要包括谷氨酸(Glu)、天冬氨酸(Asp)和甘氨酸(Gly)。
- 吴锦萍张春兵
- 关键词：中药有效成分脑缺血再灌注损伤
- 川芎嗪对二甲酰胺引起的PC12细胞损伤的保护作用被引量：3
- 2014年
- 目的分析川芎嗪对二甲酰胺引起大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤克隆化细胞株PC12细胞损伤的保护作用,探讨川芎嗪治疗脑缺血再灌注损伤的机制。方法采用川芎嗪预处理PC12细胞后,制备二甲酰胺细胞损伤模型,CCK-8法检测细胞毒性、流式细胞术分析Caspase-3、8、9、Western blot检测HMGB1、ELISA检测氧化应激指标观察二甲酰胺的毒性及川芎嗪的保护作用。结果川芎嗪预处理后,PC12细胞的存活数显著提高,Caspase-3和Caspase-9活性降低,未见HMGB1表达降低,SOD上调,LDH和MDA下调,GSH升高。结论川芎嗪对二甲酰胺引起的PC12细胞损伤有显著的保护作用,但其保护作用可能与川芎嗪抑制细胞凋亡、调节氧化应激反应相关。
- 王佳高峰张春兵
- 关键词：川芎嗪PC12细胞脑缺血再灌注损伤
- 川芎嗪对过氧化氢引起的PC12细胞损伤的保护作用被引量：4
- 2015年
- 目的:探讨川芎嗪对过氧化氢引起PC12细胞损伤的保护作用。方法:采用大鼠肾上腺嗜铬瘤克隆化细胞株PC12细胞,制备过氧化氢细胞损伤模型,通过CCK-8法检测细胞活性、流式细胞术测定线粒体膜电位和酶联免疫吸附测定(ELISA)检测炎症性细胞因子、氧化应激指标观察过氧化氢的毒性及川芎嗪的保护作用。结果:川芎嗪预处理后,PC12细胞的存活率显著提高,细胞线粒体膜电位提高,白介素1β(IL-1β)分泌水平显著降低,超氧化物歧化酶(SOD)上调,乳酸脱氢酶(LDH)和丙二醛(MDA)下调,谷胱甘肽(GSH)升高。结论:川芎嗪对过氧化氢引起的PC12细胞损伤有显著的保护作用,其保护作用可能与川芎嗪抑制细胞凋亡、调节氧化应激反应相关。
- 曹慧玲高峰张春兵
- 关键词：川芎嗪PC12细胞氧化应激
- 川芎嗪对过氧化氢引起PC12细胞损伤的保护作用被引量：1
- 2015年
- 目的分析川芎嗪预处理大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞株PC12细胞后过氧化氢诱导的细胞凋亡情况,探讨川芎嗪抑制脑缺血损伤中氧自由基损伤的分子机制。方法采用川芎嗪预处理PC12细胞后,制备过氧化氢细胞损伤模型,采用CCK-8法活细胞检测、Hoechst-33342染色、流式细胞术、反转录聚合酶链反应分析细胞凋亡发生机制。结果应用0.0、0.1、1.0、10.0 mmol/L浓度川芎嗪预处理后,细胞活力分别为(51.2±4.64)%、(58.5±7.46)%、(73.8±2.94)%、(81.0±6.06)%(F=146.9,P<0.05),细胞未见大量凋亡小体形成,Bax/Bcl-2比值降低(F=2.14,P<0.05),线粒体膜电位提高,Caspase 3、9活性降低(Caspase 3:F=1.59,P<0.05;Caspase9:F=4.98,P<0.05)。结论川芎嗪预处理后可降低过氧化氢诱导的PC12细胞凋亡,抑制氧自由基损伤。
- 朱云凤高峰张春兵
- 关键词：川芎嗪PC12细胞脑缺血损伤凋亡
- 超声造影剂微气泡的包膜黏弹特性的定量表征研究被引量：4
- 2015年
- 包膜黏弹特性显著影响微气泡超声造影剂的诊断及治疗应用效果.本文结合原子力显微镜技术及声衰减特性测量提出了一种对微气泡造影剂包膜黏弹特性定量表征的新方法.首先采用原子力显微镜技术进行机械特性分析得到包膜微气泡的有效硬度及体弹性模量;然后测量声衰减特性,基于微气泡动力学理论,计算包膜微气泡的体黏度系数.为验证方法的有效性,实验制备了直径为1—5μm的白蛋白包膜微气泡造影剂,原子力显微镜测量的有效硬度和体弹性模量分别为0.149±0.012 N/m和8.31±0.667 MPa,并与粒径无关.声衰减特性测量和动力学理论拟合的包膜微气泡的体黏度系数为0.374±0.003 Pa·s.该方法可推广至其他种类包膜微气泡的黏弹特性表征,对超声造影剂的制备及其诊断和治疗应用有积极意义.
- 郭各朴张春兵屠娟章东
- 关键词：原子力显微镜
- 低剂量FasL诱导bEnd.3细胞增殖及机制研究
- 2013年
- 目的探讨低剂量FasL诱导小鼠脑微血管内皮细胞bEnd.3增殖及其可能机制。方法以500～0.015 6ng/mL 1/2倍比稀释共9个浓度梯度FasL干预bEnd.3细胞培养48h,CCK-8检测bEnd.3细胞增殖能力,ELISA检测bEnd.3细胞分泌表达VEGF能力,RNAi抑制Fas表达,Western blotting检测FADD、FLIP、TRAF蛋白表达水平,EMSA检测NF?κB蛋白表达水平。结果 0.156ng/mL FasL干预bEnd.3细胞,可诱导细胞增殖明显增加(P<0.05),bEnd.3细胞分泌表达VEGF能力明显增加(P<0.05),FADD、FLIP、TRAF、NF?κB蛋白表达水平明显增加(P<0.05);RNAi抑制Fas基因后,细胞增殖无明显变化(P>0.05),FADD、FLIP、TRAF蛋白表达水平明显下降(P<0.05),NF?κB蛋白表达水平无明显变化(P>0.05)。结论低剂量FasL可诱导bEnd.3细胞增殖,FADD-FLIP-TRAF-NF?κB信号传导途径是其机制之一。
- 张春兵张明顺滕凤猛高峰
- 关键词：细胞增殖FAS-FASLRNAI
