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毛囊干细胞及Noggin对其调控作用的研究进展: 2016年; 毛囊干细胞(HFSC)通常能够分化为角质细胞、皮脂腺细胞和短暂扩充祖细胞,因其快速增殖的能力,HFSC为细胞的治疗提供了构建干细胞来源的基础。本综述将系统描述HFSC的定位、培养以及分子标志物,为鉴定、分离细胞提供有力的参考。同时针对HFSC增殖和分化调控的关键基因Noggin,从基因发现、分子功能等进行全面阐述,并结合BMP信号通路叙述Noggin调控HFSC研究的最新进展。; 马雨楠曾林; 关键词：毛囊干细胞分子标志物 NOGGIN

iRhom2及其突变基因重组慢病毒的包装和稳定表达细胞系的建立被引量：1: 2015年; 目的通过重组慢病毒感染,建立iRhom2及其突变基因的Vero细胞稳定细胞表达系,用于iRhom2的功能研究。方法将iRhom2及其突变基因克隆到慢病毒载体Lenti-OE-Flag,构建重组慢病毒载体Lenti-OEiRhom2和Lenti-OE-iRhom2mut,将重组质粒瞬时转染HEK-293T包装细胞,获得重组慢病毒。将重组病毒感染Vero细胞,利用puromycin进行加压筛选,获得二者的重组表达细胞系。结果构建了iRhom2及其突变基因的逆转录病毒载体,并获得了重组逆转录病毒,并利用该病毒获得了二者的稳定表达细胞系。Western-blot实验证实,二者能够在Vero细胞内稳定表达。结论利用重组逆转录病毒感染,成功获得了iRhom2及其突变系的Vero细胞稳定表达株,为进一步研究iRhom2的生物学功能及其机制奠定了良好的基础。; 游颖马雨楠曾林孙兆增; 关键词：慢病毒载体包装细胞

PKH26和Hoechst 33258联合示踪Uncv无毛小鼠iRhom2及其突变体蛋白: 2017年; 目的利用PKH26和Hoechst 33258联合示踪Uncv无毛小鼠iRhom2及其突变体蛋白在Vero细胞中的定位。方法用PKH26对细胞膜进行染色,同时用Hoechst 33258染料对细胞核进行染色,置于激光共聚焦显微镜下观察。结果通过激光共聚焦荧光显微镜观察目的蛋白,发现野生型iRhom2分布在细胞的胞浆,而iRhom2mut于细胞浆内和细胞核内都存在。结论亚细胞定位的不同推测到iRhom2的N末端缺失突变可能对其细胞内的定位有影响。; 游颖陈丙波曾林; 关键词：PKH26

BALB/c突变卷毛小鼠血液学指标的检测分析被引量：2: 2014年; 目的探讨BALB/c突变卷毛小鼠的血液学指标与正常BALB/c小鼠之间是否存在突变差异。方法选择6周龄的BALB/c突变卷毛小鼠和正常BALB/c小鼠各20只(雌雄各半),使用全自动血细胞分析仪检测8项血液常规指标;使用全自动生化仪检测15项血清电解质及生化指标,并对两组结果进行对比分析。结果 BALB/c突变卷毛小鼠的白细胞、平均血细胞容积、血小板计数和平均血细胞血红蛋白浓度的性别及组间结果与正常小鼠具有显著性差异(P<0.05,P<0.01);BALB/c突变卷毛小鼠Na+、K+和Cl-的性别及组间结果与正常小鼠具有显著性差异(P<0.05,P<0.01);BALB/c突变卷毛小鼠丙氨酸转氨酶、葡萄糖和甘油三酯的性别和组间结果与正常小鼠具有显著性差异(P<0.05,P<0.01)。结论 BALB/c突变卷毛小鼠和正常BALB/c小鼠的部分血液学指标存在明显差异,这为今后研究和应用BALB/c突变卷毛小鼠模型提供了理论参考。; 李瑞生李晓娟汤紫荣姜棋予李蓓侯俊; 关键词：BALB/C小鼠血液学指标

欧美实验动物福利立法浅析被引量：13: 2013年; 实验动物为了科技进步和人类健康做出了巨大的牺牲。在最近的几十年中,与动物生活质量有关的伦理问题已日益成为公共政策制定中争议的主题。实验动物福利相关法律可以规范人类的行为,给予实验动物应有的法律权利和地位。欧美发达国家的实验动物福利法律法规相对比较完善,尤其是英国,拥有世界上最多的,对世界影响最大的动物福利立法。深入研究欧美先进的法律法规对我国相关立法意义重大。; 冯丽萍李焱冬林金杏高诚史光华; 关键词：实验动物动物福利

Noggin基因沉默表达载体的构建及效果评价: 2016年; 目的构建慢病毒介导的Noggin RNAi干扰序列,并分析这些干扰序列对Noggin基因的沉默效果。方法针对目的基因Noggin的m RNA设计四条干扰序列,并将这些序列连接到Lenti-KD慢病毒载体,将重组质粒瞬时转染HEK-293T包装细胞,获得重组慢病毒。将重组病毒感染MC3T3-E1细胞,利用puromycin进行筛选,获得稳定表达细胞系。通过实时荧光定量PCR和Western blot技术分析不同干扰序列的干扰效果。结果实时荧光定量PCR结果显示,四种干扰序列对Noggin基因的表达都有一定的沉默效果,但只有sh Noggin-1(P<0.01)对其表达影响显著。Western blot结果显示,四种干扰序列中只有sh Noggin-1(P<0.01)对Noggin的表达蛋白具有显著的降低作用。结论获得了一种Noggin基因的干扰序列,该序列能够干扰Noggin基因m RNA的稳定性,从而影响蛋白的表达。该干扰序列可以用于部分敲除Noggin基因,从而用于研究Noggin基因的功能。; 马雨楠游颖孙兆增曾林; 关键词：基因沉默

REACH法规下化学品眼刺激性评价的分层组合测试策略被引量：3: 2012年; 欧洲化学品REACH法规在减少化学品健康危险和职业危害,推动环境质量改善的同时,也对化学品毒理学安全评价策略的实施和试验技术的革新提出了要求,法规特别指出＂最大化地使用非动物的试验方法,并鼓励研究新的非动物试验的替代方法＂;＂鼓励欧盟或其成员国研究和验证替代方法,减少或杜绝动物试验,; 程树军刘超马来记; 关键词：眼刺激化学品

SV40LT基因过表达慢病毒载体的构建与包装被引量：1: 2016年; 目的构建SV40LT基因过表达慢病毒载体,并对其进行慢病毒包装,为建立永生化的uncv小鼠胚胎成纤维细胞奠定基础。方法从293T细胞中获得SV40LT基因,将其克隆到p Lenti-GFP质粒中,构建重组穿梭质粒p Lenti-GFP-SV40LT,测序鉴定后分别将鉴定的阳性p Lenti-GFP-SV40LT和包装质粒p MD2.0G和ps PAX2共转染293T细胞,包装产生慢病毒。结果 SV40LT基因过表达慢病毒载体的构建与包装成功。结论 SV40LT基因过表达慢病毒载体构建与包装的成功为uncv小鼠胚胎成纤维细胞的永生化提供了工具。; 游颖沈欢欢马雨楠曾林; 关键词：慢病毒永生化

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国家科技支撑计划(2011BA115B03)