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上海市卫生局科技发展基金(054038)
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相关作者:
张永芳
胡雅儿
夏宗勤
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相关领域:
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2010
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新蛋白质合成介导知母活性成分对M_2受体稳定性的调节作用
2009年
目的探讨知母活性成分ZMS提高CHOm2细胞毒蕈碱样乙酰胆碱2型受体(M2受体)mRNA表达的机制。方法体外培养至80%~90%融合的CHOm2细胞分为ZMS1组(单纯添加1×10-5mol/LZMS作用24h)、ZMS2组(添加1×10-5mol/LZMS作用24h后加入1μg/mL环己酰亚胺作用12h)、ZMS3组(加入1μg/mL环己酰亚胺预处理4h后加入1×10-5mol/LZMS作用24h),以上各组分别设立对照组(以等体积DMSO替代ZMS,其他处理与相应ZMS组相同)。各组细胞培养基中均加入放线菌素D抑制mRNA合成,于不同时间点收集CHOm2细胞,Real-time PCR检测M2受体mRNA相对表达量并计算半衰期。结果与相应对照组比较,ZMS1组和ZMS2组CHOm2细胞M2受体mRNA的半衰期明显延长,分别为(4.75±0.54)hvs(2.13±0.23)h和(5.43±1.13)hvs(2.46±0.09)h(均P<0.05);添加1μg/mL环己酰亚胺预处理的ZMS3组CHOm2细胞M2受体mRNA半衰期的(3.06±0.23)h与其相应对照组的(3.00±0.20)h比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论ZMS提高M2受体mRNA的稳定性需要有新蛋白质合成的参与。
张永芳
夏宗勤
胡雅儿
关键词:
REAL-TIMEPCR
蛋白质因子介导知母活性成分对M2受体mRNA稳定性的调节
目的:研究知母活性成分(ZMS)提高毒蕈碱样乙酰胆碱2型受体(M2受体)mRNA基因表达的机制。方法:以转基因的CHOm2细胞系为对象,在培养基中加放线菌素D抑制mRNA合成,不同时间取样用实时荧光定量RT-PCR方法测...
张永芳
夏宗勤
胡雅儿
关键词:
MRNA稳定性
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